高畅
- 作品数:16 被引量:10H指数:2
- 供职机构:南京医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省科技支撑计划项目南京市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学自动化与计算机技术农业科学更多>>
- 婴幼儿人体工学唾液收集器
- 本发明公开了一种婴幼儿人体工学唾液收集器,其包括牙弓板,人体工学导管,收集器盖和收集器;所述牙弓板包括牙板和弧板,所述牙板具有符合人体口腔的牙弓形态,所述牙板的下部连接有用于为舌体预留足够空间的弧板;所述人体工学导管包括...
- 肖子昂季明辉庄添驰梅浩坤高畅孙舒婷
- 全人源抗狂犬病病毒G蛋白单链抗体制备及中和活性鉴定被引量:5
- 2013年
- 目的:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,筛选针对狂犬病病毒G蛋白不同表位的单链抗体(scFv)并鉴定其中和活性。方法:分离130例经狂犬病疫苗免疫接种志愿者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,逆转录制备cDNA,构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库。以纯化的狂犬病病毒G蛋白包板筛选,对阳性克隆进行可溶性表达,并鉴定中和活性。结果:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,库容为5.0×107,经核酸序列分析,证实插入片段为scFv。经过5轮筛选,从富集的次级抗体库中随机挑出140个克隆,通过phage-ELISA鉴定得到4株核酸序列不同的scFv抗体。经His-Trap纯化后进行中和活性鉴定,获得1株有中和活性的scFv,其中和效价为0.13 IU/mg。结论:构建全人源抗狂犬病病毒scFv噬菌体抗体库,获得1株具有中和活性的抗狂犬病病毒G蛋白scFv抗体,为进一步研发狂犬病治疗性抗体药物奠定了基础。
- 张倩倩赵茜张晓丁贵鹏金秋高畅熊四平陈玉平朱进冯振卿
- 关键词:噬菌体抗体库中和活性
- 抗EB病毒LMP2A单克隆抗体的制备及免疫学特性分析
- 2014年
- 目的:利用杂交瘤技术制备抗EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)单克隆抗体并分析其免疫学特性。方法:以LMP第2和第5胞外区表位串联制备的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,制备抗LMP2A的单克隆抗体。通过ELISA、Western blot、免疫荧光、免疫组化、流式细胞术等方法鉴定单抗的免疫学特性。结果:获得1株稳定并持续分泌抗LMP2A单克隆抗体的稳定杂交瘤细胞株,所分泌的单克隆抗体5C12-C4-A6能够特异性识别鼻咽癌细胞膜表面的LMP2A蛋白。结论:本文制备了能够特异性识别鼻咽癌细胞膜表面LMP2A蛋白的单克隆抗体,为进一步进行鼻咽癌临床早期诊断和分子靶向治疗奠定了基础。
- 徐鑫唐小军熊林王欢李文杰高畅熊四平仇镇宁Tan Min HanVo Jess Honganh冯振卿陈仁杰
- 关键词:EB病毒LMP2A单克隆抗体免疫学特性
- 一种基于HNB-LAMP耦合CRISPR/Cas12a的肠道病毒及其EV-A71的试剂盒及使用方法
- 本发明公开了一种基于HNB‑LAMP耦合CRISPR/Cas12a技术的肠道病毒及其EV‑A71分型的试剂盒及使用方法。本发明克服了传统检测技术对肠道病毒及其EV‑A71分型同时检测的难题,在不降低检测方法灵敏度与精确度...
- 季明辉赵文武杨沐怿陈星彤庄添驰高畅周子涵李宁刘云孙涛李为祖
- 一种用于RNA检测的免扩增CRISPR/Cas13a的方法及病原体活性检测试剂盒
- 本发明涉及一种用于RNA检测的免扩增CRISPR/Cas13a的方法及病原体活性检测试剂盒,属于核酸检测技术领域。本发明开发的一种用于RNA检测的免扩增CRISPR/Cas13a技术及病原体活性检测试剂盒,无需扩增、无气...
- 季明辉高瑜戴启刚高畅庄添驰梅浩坤贾书宜赵文武王尚
- 重组豹蛙酶的制备及其生物学特性分析被引量:5
- 2013年
- 目的:通过构建豹蛙酶原核表达载体pColdⅡ-Rap,表达、纯化豹蛙酶并研究其生物学活性。方法:合成豹蛙酶全基因序列,克隆于原核表达载体pColdⅡ中,鉴定正确后转化至大肠杆菌BL21,用SDS-PAGE和Western blot验证豹蛙酶的表达;大量表达重组豹蛙酶融合蛋白(Rap-His),通过MTT法分析Rap-His对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:成功构建了pColdⅡ-Rap原核表达载体,经优化表达、纯化的条件,获得纯度较高的Rap-His;MTT法检测结果表明,该融合蛋白在320、160μg/ml时对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的抑制率在加药后4 d达到93.49%。结论:本研究制备的重组Rap-His融合蛋白能够抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖。这为进一步与肿瘤特异抗体偶联,构建肿瘤特异性靶向药物的研究奠定了基础。
- 汪楠唐小军熊四平郑峰张慧林高畅李文杰董华朱进
- 关键词:融合蛋白细胞增殖抑制
- 基于颜色编码的免扩增CRISPR/Cas12/13多样本多核酸检测方法
- 本发明公开了一种基于颜色编码的免扩增CRISPR/Cas12/13多样本多核酸检测方法。本发明的检测方法包括:将染料分别与不同样本、针对不同靶标的CRISPR/Cas12/13检测体系混合,并分别制备为大量单分散微滴;大...
- 高畅庄添驰季明辉杨英淇梅浩坤赵昕怡赵文武沈洁淼崔焱
- 一种高通量分型检测的离心式数字PCR芯片及使用方法
- 本发明公开了一种用于样本高通量分型检测的离心式数字PCR芯片,其包括圆形的芯片本体,芯片本体内开设有有中轴安装孔,芯片本体上分为两个以上的扇形区域,每个扇形区域上从中心到外缘依次设置有缓液池、储液池和微滴生成单元,缓液池...
- 杨英淇庄添驰喻悦高畅季明辉徐婷梅浩坤储金雨
- 一种B族链球菌的快速检测方法、试剂盒和系统
- 本发明公开了一种B族链球菌的快速检测方法、试剂盒和系统。族链球菌快速检测试剂盒,包括:检测B族链球菌cfb基因的LAMP混合液和CRISPR/Cas12b混合液。本发明具有免提取检测,高灵敏度,快速的优点。
- 季明辉贾书仪赵文武庄添驰高畅梅浩坤周子涵杨英淇孙涛刘云李宁丁竞竞杨沐怿沈洁淼刁红婷
- 一种指压式核酸检测的微流控芯片及使用方法
- 本发明涉及一种指压式核酸检测的微流控芯片,包括底层、流道层、指压层和薄膜层,流道层包含LAMP反应腔室、CRISPR反应腔室、储水腔室、特斯拉阀、指压腔室、试纸反应腔室,其中LAMP反应腔室中包含基于LAMP的免核酸提取...
- 季明辉孙舒婷庄添驰梅浩坤陈星彤沈洁淼高畅戴启刚丁竞竞李宁孙涛刘云贾书仪