陈静静
- 作品数:17 被引量:109H指数:8
- 供职机构:珠海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目珠海市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 多重PCR检测食品中转基因成分研究被引量:11
- 2006年
- 〔目的〕建立检测转基因食品的多重PCR—聚丙烯酰胺凝胶电泳快速检测体系。〔方法〕针对转基因大豆、玉米、油菜的多个相对稳定的转基因元件,包括35S、NOS、EPSPS、Cry1A、NPTⅡ等基因,同时选定植物本身固有的大豆Lectin、玉米IVR、油菜Napin基因作为内源参照指示基因,设计、筛选出9对引物分别组成多重PCR,结合高灵敏度的聚丙烯酰胺凝胶电泳组成快速检测体系,对转基因食品进行检测,1 ̄2天能完成整个检测过程。对珠海地区市售的大豆、玉米、油菜及其加工产品共185个样品中的转基因成分进行了初步调查。〔结果〕建立的多重PCR检测体系稳定可靠、特异性好,灵敏度高。调查的185份可疑食品样品中,转基因阳性率达27.6%。〔结论〕该检测体系快速可靠、灵敏准确、特异性好,且操作简便、成本低廉,是一种进行转基因食品检测的良好的技术模式。对珠海地区的转基因食品状况有了一定了解。
- 冯家望王小玉李丹琳唐食明游淑珠吴小伦陈静静
- 关键词:转基因食品多重PCR食品检测
- 基因芯片鉴别诊断禽流感和新城疫病毒方法的建立和应用
- 薄清如罗宝正徐海聂廖秀云沙才华王小玉杨素陈静静侯亚琴
- 本研究建立了一种分型检测禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)并能同时区分鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)和鸡减蛋综合征病毒(Egg Drop Syndro...
- 关键词:
- 关键词:新城疫病毒基因芯片禽流感
- 口蹄疫VP1和NS诊断试剂盒的试应用及推广
- 潘文波徐海聂薛景山廖秀云杨素薄清如冯家望周思波陈静静
- 利用中牧股分公司和UBI公司研制生产的FMDV合成肽VP1和NS诊断试剂盒对珠海等地出口场猪血清、牛血清和人工发病猪血清、健康猪血清、免疫猪血清、免疫后攻毒猪血清进行检测,试验表明FMDV合成肽VP1和NS诊断试剂盒能较...
- 关键词:
- 关键词:口蹄疫合成肽琼脂免疫扩散试验
- 多重荧光PCR鉴别诊断猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒被引量:9
- 2012年
- 为了建立一种快速、灵敏、特异的能够同时检测猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒的多重荧光PCR方法,根据GenBank中公布的猪瘟病毒基因序列,设计一套特异性的引物和探针,对猪瘟病料提取RNA,经RT-PCR扩增后将产物回收,克隆至pMD18-T构建pMD18-T-CSFV阳性质粒;非洲猪瘟的目的片段序列采用化学合成,构建pMD18-T-ASFV阳性质粒。以两种阳性质粒为模板对建立的多重荧光PCR方法做特异性、灵敏度和重复性试验,结果表明该方法可以将猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒同口蹄疫病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪水泡病病毒、猪圆环病毒2型区分开,灵敏度可以达到10拷贝的数量级,而且方法稳定。对2份已知猪瘟阳性血清样品和120份猪内脏、猪鼻腔拭子及血清样品检测后,发现对已知阳性样品的检测结果符合预期目标,未知样品检出猪瘟病毒3份阳性,未检出非洲猪瘟病毒阳性。
- 陈静静罗宝正沙才华廖秀云王振全陈伟生徐海聂薄清如
- 关键词:猪瘟病毒非洲猪瘟病毒
- 养殖对虾病毒病PCR诊断方法的建立及在流行病学调查中的应用被引量:1
- 2004年
- 利用分子生物学技术 ,建立了一种快速、准确、实用的养殖对虾白斑病和斑节对虾杆状病毒的 PCR检测方法 ,通过特异性试验和敏感性试验 ,并经测序 ,其 PCR产物与目的基因符合率为 99% ,证实该方法具有良好的特异性。本项目还将该方法应用于对虾育苗过程的各个环节 ,并对珠海地区养殖场养殖对虾、市场销售的对虾和进出口对虾等进行了对虾白斑病毒和斑节对虾杆状病毒的流行病学调查。在调查中首次发现虾蛄对虾白斑病毒呈阳性反应 ,说明该病毒可以感染除对虾外的节肢动物。
- 薄清如吴小伦黄建珍徐海聂朱建洪王小玉黄云君周思波陈静静
- 关键词:PCR诊断方法
- 食品中李斯特菌污染状况研究被引量:12
- 2007年
- 目的了解冷藏冷冻食品中李斯特菌污染状况。方法采用PCR方法对样品中的李斯特菌进行初筛,阳性样品用国标法确证,对6类冷藏冷冻食品共3586份样品进行了李斯特菌带菌状况调查。结果珠海地区李斯特菌污染较为普遍,且存在着多重污染现象,生鲜奶、生肉禽类、蔬菜类样品不仅带李斯特菌率高,且带单增李斯特菌率高。结论应加强冷冻食品的李斯特菌监测与管理。
- 冯家望吴小伦陈静静王小玉李丹琳唐食明游淑珠
- 关键词:单核细胞增生食品污染
- 多重荧光PCR鉴别诊断猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒被引量:1
- 2012年
- 为了建立一种快速、灵敏、特异的能够同时检测猪瘟病毒和非洲猪瘟病毒的多重荧光PCR方法,根据GenBank中公布的猪瘟病毒基因序列,设计一套特异性的引物和探针,对猪瘟病料提取RNA,经RT-PCR扩增后将产物回收,克隆至pMD18-T构建pMD18-T-CSFV阳性质粒;
- 陈静静罗宝正沙才华
- 关键词:猪瘟病毒弱光
- 多重荧光PCR检测Ⅱ型猪链球菌方法的建立及应用被引量:11
- 2007年
- 建立了一种快速检测Ⅱ型猪链球菌(Streptococcus suis)的多重荧光PCR(multiplex real-time polymerase chain reaction)方法。首先,从GenBank中获得Ⅱ型猪链球菌荚膜抗原编码基因簇中的cps2I和溶菌素释放蛋白基因mrp,用Primer Express2.0设计引物和Taqman荧光探针,在ABI7500荧光PCR仪上进行荧光PCR检测。荧光曲线表明该多重荧光PCR可以特异性地检测型猪链球菌,而参考猪链球菌、大肠杆菌等细菌和空白对照均为阴性;检测方法灵敏度达10个细菌的最小检测量,整个过程仅需60min;稳定性试验表明,2次检测所得的Ct值之间无统计学差异(P>0.05)。本试验建立的多重荧光PCR检测Ⅱ型猪链球菌的方法快速、特异性强,灵敏度高,稳定性好,适合于大批量样品的检验,可广泛用于出入境检疫和动物防疫监督部门的疫情监测。
- 陈博文罗宝正陈竞帆薄清如徐海聂杨素陈静静黄新民侯亚琴
- 多重荧光PCR检测Ⅱ型猪链球菌方法的建立及应用
- 陈博文罗宝正薄清如徐海聂杨素陈静静黄新民
- 该项目建立的Ⅱ型猪链球菌的荧光PCR检测方法,检验时间由传统方法的5-7天缩短为1小时(单重荧光PCR),解决了传统细菌检测方法耗时长、灵敏度低,并有交叉反应等问题,提高了该项目的检验检疫水平,为加快口岸验放速度,缩短检...
- 关键词:
- 基因芯片分型检测禽流感病毒的研究
- 本研究建立了一种分型检测禽流感病毒、新城疫病毒和鸡减蛋综合征病毒的基因芯片检测方法。首先, 在 GenBank 中获取禽流感病毒、相关基因序列,用分子生物学软件进行序列分析,用 Primer Express 等引物和设计...
- 薄清如徐海聂廖秀云罗宝正沙才华杨素陈静静
- 关键词:禽流感病毒新城疫病毒鸡减蛋综合征病毒基因芯片
- 文献传递