陈磊
- 作品数:57 被引量:99H指数:7
- 供职机构:北京市创伤骨科研究所更多>>
- 发文基金:北京市科技新星计划首都卫生发展科研专项中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生自动化与计算机技术生物学文化科学更多>>
- 应用小牛皮制备软骨修复载体的脱毛-脱细胞-结构改建工艺探讨被引量:3
- 2014年
- [目的]软骨修复载体的制备是软骨组织工程的重要课题。本实验以小牛皮为原料,通过脱毛-脱细胞-结构改建的早期工艺探讨,掌握最佳制备流程,为后续工艺做准备。[方法]将小牛皮分别浸入0.5%dispase溶液和0.25%胰蛋白酶溶液,4℃脱毛72 h,比较脱毛效果。乙酸溶胀,刮除/切除表皮和皮下组织,获得真皮组织。真皮组织分别浸入0.5%SDS、1%SDS与0.5%TritonX-100进行脱细胞,充分冲洗之后冻干,HE染色比较脱细胞效果,MTT法进行细胞毒性检测。应用0.25%胰蛋白酶浸泡、0.25%胰蛋白酶浸泡联合220 V-250 W-40%功率超声振荡、0.5%胰蛋白酶浸泡、0.5%胰蛋白酶浸泡联合220 V-250 W-40%功率超声振荡四种方法进行结构改建,扫描电镜观察、MASSON染色、孔隙率检测比较结构改建效果。[结果]0.5%dispase溶液和0.25%胰蛋白酶溶液均能够良好的去除小牛皮的毛发。0.5%SDS、1%SDS脱细胞效果基本一致,TritonX-100似有将胶原纤维破坏的征兆,由于低浓度SDS更易于冲洗,后续实验采用0.5%SDS脱细胞。细胞毒性检测为0级。0.5%胰蛋白酶浸泡联合220 V-250 W-40%功率超声是最佳的结构改建方法,改建后的载体胶原纤维光滑、立体感明显增强,孔隙率显著高于未改建的载体(P<0.05)。[结论]0.25%胰蛋白酶溶液脱毛-0.5%SDS脱细胞-0.5%胰蛋白酶浸泡联合220 V-250 W-40%功率超声进行结构改建,是应用小牛皮制备软骨修复载体的最佳工艺。
- 綦惠孙磊陈磊江建杰永生高新生
- 关键词:脱毛脱细胞孔隙率
- 干细胞外泌体对骨质疏松大鼠骨生成的影响被引量:4
- 2021年
- [目的]探讨间充质干细胞源性外泌体对骨质疏松大鼠骨生成的调节作用。[方法]体外获取和鉴定大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)以及BMSCs源性外泌体(exosomes derived from BMSCs,BMSC-Exos)。采用CCK8法检测BMSC-Exos对BMSCs增殖的影响,碱性磷酸酶活性分析BMSC-Exos对BMSCs成骨转化的作用。成年雌性SD大鼠随机分成三组,OVX组与OVX+Exos组行双侧卵巢切除术,前者尾静脉注射PBS,后者尾静脉注射BMSC-Exos;而Control组为假手术组,仅切开背部皮肤后缝合,术后不给予任何药物。术后取股骨进行HE染色和Micro-CT观察。[结果]BMSCs具有成骨、成脂和成软骨分化能力。BMSC-Exos呈近似圆形,表达CD63、CD81和CD9。体外实验部分,BMSC-Exos与BMSCs共培养24 h和48 h,BMSCs增殖显著增强(P<0.05)。成骨诱导7 d后,BMSC-Exos组碱性磷酸酶活性明显上调。体内实验部分,OVX组骨密度(bone mineral density,BMD)下降(P<0.05),骨小梁稀疏,变细,间隙增大,注射BMSC-Exos后,BMD显著升高(P<0.05),骨小梁增粗,数量增多。[结论]BMSC-Exos能够促进骨生成,对骨质疏松具有一定程度的治疗作用。
- 綦惠黄霸杰永生郑蕊舒雄陈磊刘丹平
- 关键词:间充质干细胞外泌体骨质疏松
- 用于骨损伤的3D打印骨小梁钽金属支架
- 一种用于骨损伤的3D打印骨小梁钽金属支架,其包括根据患者骨损伤部位三维数据获得的个性化的3D打印骨小梁钽金属支架主体;其特征在于,主体包括中间的圆柱形段,设置在坏死部位的主体第一端设置与骨损伤部位形状一致的弧形面,主体第...
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- HSP90β干扰和过表达慢病毒载体的构建及其在骨肉瘤细胞Saos-2中的表达被引量:1
- 2020年
- 目的:获得热休克蛋白90β(HSP90β)基因干扰和过表达慢病毒表达系统,并检测其在人骨肉瘤细胞株Saos-2中的表达水平。方法:设计合成shRNA,以慢病毒表达质粒构建HSP90β干扰和过表达载体,酶切电泳、测序技术鉴定载体构建是否成功。重组病毒转染H1299细胞,以嘌呤霉素筛选稳定转染的Saos-2细胞,通过荧光显微镜观察计数获得转染效率。将感染好的细胞分为干扰NC组(NEG-shRNA)、干扰组(shRNA-HSP90β)、过表达NC对照组(NEG-pEZ)及过表达组(pEZ-HSP90β)。通过qRT-PCR与Western blotting分别从mRNA和蛋白表达水平验证目的基因的干扰和过表达水平。结果:插入慢病毒表达载体的基因片段与目的基因的碱基序列完全一致。病毒包装成功后,嘌呤霉素最小致死浓度1μg/ml,感染复数200,感染人Saos-2的感染效率达80%,其中shRNA-HSP90β组干扰效率为86.35%,pEZ-HSP90β组的mRNA相对表达量增加2. 8倍。进一步研究发现,shRNA-HSP90β组较NEG-shRNA组中HSP90β蛋白表达明显降低,p EZ-HSP90β组较NEG-p EZ组HSP90β蛋白表达增加。结论:HSP90β基因干扰和过表达慢病毒载体构建成功,并能够在Saos-2中稳定表达。
- 舒雄刘辉琦杰永生郑蕊綦惠陈磊靳少锋冉宇靓
- 关键词:骨肉瘤细胞慢病毒载体RNA干扰过表达
- 一种用于生物源性人工骨去抗原的制备方法
- 本发明公开了一种用于生物源性人工骨去抗原的制备方法,将待处理的生物源性人工骨骨组织放入由阴离子表面活性剂制备的溶液中,经充分湿润、渗透,使溶液进入骨组织内部,脂肪组织随之脱落,分散于表面活性剂溶液中,经三蒸水漂洗脱去。采...
- 孙磊田伟尹大庆王戈平黄啸原陈磊高新生杰永生陶剑峰褚黎刘竟成
- 文献传递
- 一种ENO1抗体及其在治疗肿瘤中的应用
- 本发明公开了一种ENO1抗体及其在治疗肿瘤中的应用,所述抗体不仅具有良好的结合活性,而且能够显著抑制各种肿瘤细胞的自我更新能力、侵袭能力和耐药能力,能够有效抑制肿瘤的生长并部分抑制其复发,本发明提供的抗体可用于已报道在细...
- 舒雄冉宇靓郑蕊綦惠陈磊杰永生
- 用于治疗和/或预防癌症的单克隆抗体及其相关产品
- 本发明公开了用于治疗和/或预防癌症的单克隆抗体及其相关产品,所述单克隆抗体9B8能够有效抑制肺癌干细胞、骨肉瘤干细胞的自我更新能力和侵袭能力,并能够显著抑制肿瘤在体内的生长,本发明为癌症治疗领域提供了一种有针对性的癌症治...
- 舒雄陈磊杰永生郑蕊綦惠
- 一种ENO1抗体及其应用
- 本发明公开了一种ENO1抗体及其应用,所述抗体包括分别如SEQ ID NO:1、2、3所示的氨基酸序列的重链可变区HCDR1、HCDR2、HCDR3;以及分别如SEQ ID NO:9、10、11所示的氨基酸序列的轻链可变...
- 舒雄冉宇靓郑蕊綦惠陈磊杰永生
- 骨组织工程PLGA/TCP复合材料的性能研究被引量:9
- 2003年
- 骨组织工程的支架要求有与人骨在功能梯度上相一致的材料结构、几何结构和生理功能。PLGA/TCP复合材料具有适用于骨组织工程支架的綜合性能。以快速成形技术低温沉积工艺的成形效栗来评价材料的成形性能,以体外降解试验来评价材料的降解性能,以国家标准的方法来评价材料的细胞毒性,对PLGA和TCP不同配比下的性能进行了研究,发现TCP含量的增加有利于降低材料的细胞毒性,加快了材料的降解,但同时降低了材料的成形性能。从骨组织工程的临床应用来看,低的细胞毒性是需要首先得到保证的,成形性能則通过其他方式来改善。
- 费小琛颜永年熊卓孙磊陈磊陶剑锋
- 关键词:骨组织工程快速成形技术细胞毒性
- 一种医用骨软骨取样环钻
- 本实用新型公开了一种医用骨软骨取样环钻,具体而言是一种主要用于自体/同种异体骨软骨移植的骨软骨取样或骨软骨缺损部位塑形的环形钻。包括均为空心圆柱状的内外侧套筒。内侧套筒最下端边缘为规则的锯齿状切割刀,锯齿状边缘最下端与零...
- 綦惠景金珠舒雄杰永生郑蕊靳少锋陈磊孙磊
- 文献传递