钟耀华
- 作品数：35 被引量：44H指数：4
- 供职机构：山东大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技部农业科技成果转化资金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- 一株过表达β-葡萄糖苷酶的斜卧青霉工程菌及其应用
- 本发明公开了一株过表达β-葡萄糖苷酶的斜卧青霉工程菌，其含有过表达的β-葡萄糖苷酶基因，该菌命名为斜卧青霉(Penicillium decumbens)Gi31-2，并于2010月5日7日保藏于“中国典型培养物保藏中心”...
- 汪天虹杜春梅钟耀华李忠海张艳美
- 文献传递
- 里氏木霉QM9414尿嘧啶缺陷型转化体系改进和β-葡萄糖苷酶的过量表达被引量：1
- 2016年
- 里氏木霉是广泛应用于纤维素酶生产的工业真菌,但高产突变株遗传操作困难,限制了菌种改良。首先利用定点整合策略敲除里氏木霉突变株QM9414的pyr4基因,成功构建尿嘧啶营养缺陷型菌株QP4,其遗传转化效率显著提高,而且产酶能力不受影响。进一步在QP4中过量表达β-葡萄糖苷酶(BGL)基因bgl1,经大量平板显色筛选获得2株BGL活力明显增强的工程菌QPB4和QPB5,其酶活分别提高10.01倍和8.26倍。利用发酵酶液对2种不同预处理的玉米芯底物进行水解糖化实验,结果显示以酸处理玉米芯为底物时QPB4和QPB5的葡萄糖得率比QP4分别提高60.98%和52.44%,而以脱木素处理玉米芯为底物时其葡萄糖得率分别提高80.01%和86.00%。研究表明改进里氏木霉高产突变株遗传转化体系可以显著促进菌株改良,提高糖化应用效果。
- 钟立霞钱远超戴美学钟耀华
- 关键词：纤维素酶生物技术生物工程
- 里氏木霉VPS13基因缺失对菌丝分支、生孢和纤维素酶产量的影响被引量：4
- 2017年
- 【目的】丝状真菌里氏木霉是纤维素酶生产的主要工业真菌。纤维素酶分泌过程中的蛋白运输途径是控制大量纤维素酶成功输出的重要环节,因此,研究蛋白分泌途径的特定靶标基因功能将有助于鉴定纤维素酶运输分泌过程的关键调控因子。本研究借助基因敲除方法将里氏木霉液泡蛋白分选相关基因VPS13缺失,分析了该基因缺失对菌株生长、生孢尤其是纤维素酶分泌的影响。【方法】利用Double-joint PCR技术和同源重组策略构建里氏木霉VPS13基因缺失突变株,通过菌丝培养、显微观察、生孢检测、蛋白与酶活测定,系统比较VPS13基因敲除前后菌株的生长特征、菌丝形态、孢子形成、蛋白分泌以及纤维素酶活等。【结果】成功获得两株VPS13基因缺失株。与出发菌株相比,该基因突变后菌丝蔓延速率明显减慢,但菌体生物量在对数生长期后显著增多。通过显微观察,发现该基因缺失株菌丝更加密集,分支明显增多。此外,该基因缺失也导致菌株生孢延迟。纤维素底物平板分析发现VPS13基因缺失株菌落周围透明圈更加清晰,且透明圈圈径比是出发菌株的4倍,说明降解纤维素的能力有明显提高。进一步的液体发酵实验结果显示,该基因缺失导致蛋白产量及纤维素酶活力分别提高16.4%和21.9%。【结论】里氏木霉VPS13基因在菌丝生长、生孢、蛋白分泌等不同生物学过程中具有功能多样性,且该基因在菌种改良上可以作为提高纤维素酶产量的重要靶点。
- 刘瑞艳侯运华王逸凡钱远超钟耀华
- 关键词：里氏木霉基因缺失蛋白分泌纤维素酶
- 一种利用纤维素诱导型启动子提高里氏木霉纤维素水解酶活的方法
- 本发明公开了一种利用纤维素诱导型启动子提高里氏木霉纤维素水解酶活的方法，是制备利用纤维素诱导型启动子Pegl2过表达转录调控因子xyr1基因的表达盒，将其转化到里氏木霉QEB4菌株中得到高纤维素水解酶活里氏木霉工程菌株Q...
- 钟耀华沈林静王逸凡
- 文献传递
- 一种利用黑曲霉表达<Sup>6</Sup>G-β-呋喃果糖苷酶生产新科斯糖的方法
- 本发明公开了一种利用黑曲霉表达红发夫酵母<Sup>6</Sup>G‑β‑呋喃果糖苷酶生产新科斯糖的方法，是制备红发夫酵母来源<Sup>6</Sup>G‑β‑呋喃果糖苷酶Xd‑INV置换型表达盒，将该表达盒转化进入黑曲霉A...
- 钟耀华万秀芬王璐
- 内质网压力响应相关的蛋白质降解被引量：5
- 2016年
- 内质网相关蛋白质降解途径(ERAD),即蛋白质分泌过程中错误折叠或未折叠的蛋白质在内质网中被识别并逆向运输到细胞质经聚泛素化后由蛋白酶体降解的过程.自从发现该途径后对其机制的阐明一直处于不断探索的阶段.近年来,对ERAD底物识别、逆向运输和泛素化新组分的发现以及新技术的应用,使得该途径的具体分子机制更加清晰.本文全面梳理并综述了内质网应激响应、ERAD降解过程与机理的最新进展,并对模式蛋白底物和最新研究方法进行了总结,以期展示该领域的研究概况.
- 闫孟节侯运华吕珊珊钟耀华
- 关键词：内质网ERAD
- 一种表达葡萄糖氧化酶的低聚果糖合成工程菌株及其构建方法与应用
- 本发明公开了一种表达葡萄糖氧化酶的低聚果糖合成工程菌株，是基因组中含有融合基因gox‑fopA‑C的工程菌；其中，所述工程菌株的出发菌是黑曲霉ATCC 20611，融合基因gox‑fopA‑C是葡萄糖氧化酶GOX编码基因...
- 钟耀华张静刘彩霞谢益佳隆倩
- 文献传递
- 关于秸秆资源高效转化的策略与发展趋势探讨
- 2023年
- 秸秆是一种丰富的可再生资源,但是不充分利用会造成极大浪费和严重环境问题,秸秆资源的高效转化是解决这一问题的根本途径。目前国内外已发展出多种不同类型的秸秆资源转化策略,本文根据秸秆资源综合利用情况、技术核心问题以及行业进展情况,对典型的秸秆资源转化策略做了阐述,并着重对其发展趋势进行了简要探讨,期望为秸秆资源的高效转化利用提供参考。
- 栗科航钟耀华
- 关键词：秸秆资源转化热解纤维素乙醇生物精炼
- 一株内切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶双高分泌的里氏木霉工程菌及其构建方法与应用
- 本发明公开了一株内切葡聚糖酶和β‑葡萄糖苷酶双高分泌的里氏木霉基因工程菌，命名为里氏木霉(Trichoderma reesei)QMEB5，该菌株基因型为QM9414ΔEegl2ΔEbgl1，是以里氏木霉QM9414为出...
- 钟耀华钟立霞钱远超
- 文献传递
- 一株过表达β-葡萄糖苷酶的斜卧青霉工程菌及其应用
- 本发明公开了一株过表达β-葡萄糖苷酶的斜卧青霉工程菌，其含有过表达的β-葡萄糖苷酶基因，该菌命名为斜卧青霉(Penicillium decumbens)Gi31-2，并于2010月5日7日保藏于“中国典型培养物保藏中心”...
- 汪天虹杜春梅钟耀华李忠海张艳美
