金海珍
- 作品数：10 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目国家大学生创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 一种抗人Delta like4单克隆抗体
- 本发明涉及一种抗人Delta like4(hD114)单克隆抗体。本发明提供的单克隆抗体或其片段的特征在于：可以与hD114特异性结合；可以阻断D114对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的抑制；同时，可以在鸡胚尿囊膜模...
- 王旻王泽根涂孝洁金海珍厉道娟许卓斌张娟吴旻
- 文献传递
- 抗EGFR/KDR双特异性抗体的表达与活性研究
- 金海珍张娟王旻
- 一种全人源靶向EGFR/KDR的IgG样双特异性抗体
- 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及抗表皮生长因子受体(EGFR)和抗血管内皮生长因子受体2(VEGFR2/KDR)的IgG样双特异性抗体(Bispecific antibody，Bi‑Ab)的制备方法及用途。本发明利...
- 张娟王旻陈治国金海珍袁锡彬赵虹
- 文献传递
- 一种靶向EGFR/VEGRFR2的双特异性抗体的体外抗肿瘤活性研究
- 背景:VEGFR2和EGFR信号通路相互作用,同时抑制这两条通路的抗肿瘤效果优于仅抑制单一信号通路。本实验室构建了同时靶向VEGFR2和EGFR通路的双特异性双链抗体Db,以期获得增强的抗肿瘤活性。方法:利用SPR技术、...
- 徐孟怀金海珍张娟王旻
- 关键词：EGFRVEGFR2双特异性抗体抗血管新生抗肿瘤
- 文献传递
- 抗KDR单链抗体阻断VEGF/KDR通路的活性研究被引量：1
- 2014年
- 为了阻断VEGF与KDR的结合,抑制VEGF结合KDR后介导的内皮细胞迁移和血管新生,实验室已经从全人源噬菌体展示抗体库中筛选得到几种抗KDR的单链抗体,从中挑选一种亲和力较高的抗体命名为AK506进行周质表达,纯化后经SDS-PAGE鉴定,可获得纯度为95%的电泳纯抗体,产量可以达到每升发酵液1 mg。经表面等离子共振技术测定,AK506与KDR胞外区相互作用的平衡解离常数为7.99×10-9nmol/L。细胞ELISA分析显示,AK506与内皮细胞表面膜受体KDR的结合呈剂量依赖性。采用细胞划痕损伤修复实验和鸡胚尿囊膜实验证明,AK506可以显著抑制内源性VEGF诱导的血管内皮细胞迁移和新血管生成,具有进一步研究开发用于抗肿瘤血管生成治疗的潜力。
- 李海鑫陈治国陈晨金海珍张娟王旻
- 关键词：血管内皮生长因子受体2单链抗体
- 血管内皮生长因子受体2胞外区3(KDR3)血管抑制活性研究被引量：1
- 2013年
- 血管内皮生长因子(VEGF)是一种重要的血管生成调节因子。血管内皮生长因子受体2(VEGFR2,人VEGFR2也称为Kinase insert domain-containing receptor,KDR)是VEGF的特定膜受体之一。血管内皮生长因子阻断剂可以通过阻断VEGF-VEGFR2信号通路来调节重要的抑癌过程。目前尚没有研究VEGFR2胞外3区(KDR3)抑制血管活性的文献。因此,该研究旨在用大肠杆菌表达可溶性KDR3,并研究其抑制血管生成的活性。采用表面等离子体共振(SPR)技术检测到可溶性表达KDR3与VEGF16 5之间的平衡解离常数为54 nmol/L。采用划痕损伤修复实验来证明KDR3能够显著抑制EA.hy926细胞的迁移能力。最后通过鸡胚尿囊膜实验表明,KDR3在体内同样能够抑制新生血管生成。因此,该文初步论证外源性KDR3作为一种血管内皮生长因子阻滞剂的能力。
- 曹婉璐张娟涂孝洁许卓斌金海珍王旻
- 关键词：血管内皮生长因子受体
- 重组人Dll4真核载体的构建及其在CHO细胞中的表达被引量：2
- 2015年
- PCR法扩增rh Dll4基因片段,用EcoR I和Not I双酶切后克隆到真核载体p CA中,并对其进行双酶切和测序鉴定;用电转法将真核载体导入CHO细胞中,并利用Western blot法检测rh Dll4在CHO细胞中的表达水平。经双酶切和测序验证,成功构建p CA-rh Dll4真核表达载体。Western bolt验证表明,rh Dll4基因在CHO细胞中正常表达。经镍柱亲和层析纯化后,rh Dll4蛋白纯度达95%以上。MTT法检测,rh Dll4可以有效地抑制HUVEC增殖;同时可以促进Notch1受体的切割,表明所表达的rh Dll4蛋白具有生物学功能,为本实验下一步抗rh Dll4单克隆抗体的筛选奠定了基础。
- 王泽根解伟许卓斌涂孝洁金海珍厉道娟吴旻张娟王旻
- 关键词：真核表达
- 抗EGFR/抗KDR双特异性单链抗体的构建及表达被引量：2
- 2012年
- 针对EGFR或VEGFR信号通路的相互作用导致的耐药性,为增强抗EGFR或抗VEGFR2抗体单独使用疗效不佳的癌症的治疗效果,本文利用重叠PCR将抗人EGFR胞外区单链抗体基因scFv-E10和抗人VEGFR2(KDR)的单链抗体基因scFv-AK404R融合在一起,得到抗EGFR/抗KDR双特异性单链抗体(bispecific single-chain diabody,scDb)基因,scDb的连接肽序列为15个氨基酸(G4S)3,在肽链的C端引入His标签及myc标签。将scDb基因连接入载体pHEN2,转化大肠杆菌HB2151并诱导表达,经镍柱纯化获得电泳纯scDb蛋白,产量约为570μg.L 1发酵液。ELISA测定显示,scDb与EGFR胞外区的结合与亲本scFv-E10相当,与KDR胞外区的结合略低于亲本scFv-AK404R,表明抗EGFR/抗KDR scDb可与EGFR和KDR两种抗原特异性结合,可用于进一步的抗肿瘤活性研究。
- 周雅琼张娟金海珍何远王彤王旻
- 关键词：表皮生长因子受体血管内皮生长因子受体2双特异性单链抗体单链抗体原核表达
- 一种靶向EGFR/KDR特异性双链抗体
- 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及抗肿瘤表皮生长因子受体(EGFR)和抗肿瘤血管内皮生长因子受体(VEGFR／KDR)的双特异性双链抗体(Bispecific diabody，Db)的制备方法及用途。本发明利用基因工...
- 张娟王旻金海珍徐孟怀周雅琼
- 文献传递
- 一种全人源靶向EGFR/KDR的IgG样双特异性抗体
- 本发明属基因工程抗体技术领域，具体涉及抗表皮生长因子受体(EGFR)和抗血管内皮生长因子受体2(VEGFR2/KDR)的IgG样双特异性抗体(Bispecific？antibody，Bi-Ab)的制备方法及用途。本发明利...
- 张娟王旻陈治国金海珍袁锡彬赵虹
- 文献传递
