许德华
- 作品数：43 被引量：120H指数：6
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划南京医科大学校科研和教改项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 永生化转TH基因胶质细胞治疗帕金森病
- 帕金森病(PD)的基因治疗虽已进行多年的研究,但至今仍无可供临床应用的治疗方案.在exvivo的治疗方案中,我们考虑脑来源的细胞可以和宿主的脑细胞相容,并可长期表达所转基因.而胶质细胞在脑组织中具营养和支持作用,是神经系...
- 许德华卓铭曹蕾徐舲飞郑仲承刘新垣
- 文献传递
- 胞嘧啶脱氨酶基因联合干扰素-酌基因治疗大肠癌的实验研究被引量：1
- 2004年
- 目的:研究胞嘧啶脱氨酶基因(EC鄄CD)联合干扰素-酌(INF鄄酌)基因对大肠癌的治疗作用。方法:以重组腺病毒载体AdCMVCD转导EC鄄CD基因;AdCMVINF鄄γ转导鼠INF鄄γ基因。采用体外培养和小鼠移植瘤实验,研究EC鄄CD基因联合INF鄄γ基因对CT26大肠癌细胞的杀伤作用。结果:AdCMVIFN鄄γ感染对CT26细胞生长有明显的抑制作用。AdCMVCD/5鄄FC联合AdCMVINF鄄γ可以增强对CT26细胞的杀伤作用,IC50明显变小(P<0.01),肿瘤生长明显抑制(P<0.01)。组织学检查显示,EC鄄CD基因与INF鄄γ基因联合治疗后肿瘤内有大量淋巴细胞浸润。结论:EC鄄CD基因联合INF鄄γ基因可以明显增强抗肿瘤效应,局部淋巴细胞浸润增加可能起到一定作用。
- 沈历宗华一兵吴文溪许德华丁强陈国玉郑仲承刘新垣
- 关键词：Γ基因CD基因胞嘧啶脱氨酶基因大肠癌EC
- 5-氟胞嘧啶对表达胞嘧啶脱氨酶的人肾母细胞瘤裸鼠异种移植瘤的疗效被引量：3
- 2000年
- 目的 以人肾母细胞瘤裸鼠异种移植瘤模型 ,研究 5 氟胞嘧啶 (5 FC)作为原药对表达胞嘧啶脱氨酶 (CD)的肾母细胞瘤治疗 (以下简称CD/ 5 FC)的作用。方法 1例低分化肾母细胞瘤组织 ,移植于无胸腺BALB/c裸鼠 ,经连续传代 ,建立了人肾母细胞瘤异种移植瘤模型。以腺病毒为载体 ,分别建立CD基因 (Ad/CMV CD)和lac基因 (Ad/CMV lac)的表达载体。瘤内注射基因表达载体 ,使基因转导入肿瘤细胞。用RT PCR检测转导基因在瘤细胞内的表达。腹腔注射 5 FC ,5 0 0mg·kg-1·d-1,连续 10d ,观察移植瘤生长情况。结果 经 5 FC治疗的小鼠 ,表达lac基因的移植瘤生长情况与未转导基因的移植瘤并无两样 ;表达CD基因的移植瘤生长则受到显著抑制。根据接种肿瘤后 8周的肿瘤重量 ,5 FC治疗对CD基因转导的移植瘤生长抑制率为 6 5 %。病理检查可见瘤细胞坏死 ,细胞器出现空泡。结论 在瘤内转导CD基因的基础上施以 5 FC治疗 ,对人肾母细胞瘤裸鼠移植瘤有明显疗效。
- 毕允力高解春许德华
- 关键词：肾母细胞瘤药物疗法氟胞嘧啶胞嘧啶脱氨酶
- 人γ-干扰素基因导入人大肠癌细胞中的方法及鉴定被引量：5
- 2002年
- 目的：为将人γ－干扰素（ｈｕＩＦＮ－γ）基因尽快用于临床基因治疗，寻求基因导入的有效方法。方法：利用阳离子脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ将ｈｕＩＦＮ－γ基因导入人大肠癌细胞株，利用ＰＣＲ、ＲＴ－ＰＣＲ对该基因的整合和表达进行鉴定，并对细胞培养上清中γ－干扰素的活性进行了检测。结果：该基因已经有效地进入细胞内并实现了表达。结论：利用脂质体可以有效地将ｈｕＩＦＮ－γ基因导入肿瘤细胞内，基因表达的持续时间可以满足肿瘤基因治疗的需要。不同细胞株其上清中ｈｕＩＦＮ－γ的分泌量不同。
- 丁强沈历宗华一兵吴文溪许德华刘新垣
- 关键词：Γ-干扰素阳离子脂质体大肠癌细胞大肠癌
- 白介素-2基因增强胞嘧啶脱氨酶基因的抗结肠癌效应被引量：6
- 2004年
- 目的探讨联合应用白介素(IL)-2基因与胞嘧啶脱氨酶基因(EC-CD)对结肠癌的治疗效应。方法分别以重组腺病毒载体AdCMVCD、AdCEACD转导EC-CD基因;AdCMVIL-2转导人IL-2基因。分别在体外、内(Balb/cnu/nu裸鼠)研究EC-CD基因联合人IL-2基因对LOVO细胞肿瘤的治疗作用。结果LOVO细胞受AdCMVIL-2感染后,细胞生长有比较明显的抑制。AdCEACD/氟胞嘧啶(5-FC)联合AdCMVIL-2可增强对LOVO细胞的细胞毒作用(P=0.001),肿瘤生长明显抑制(P=0.000),联合治疗的效果与单用AdCMVCD/5-FC接近(P=0.815)。结论联合IL-2基因可明显增强EC-CD基因抗肿瘤效应,且可弥补靶向性载体治疗效率较差的缺点。
- 沈历宗华一兵吴文溪许德华丁强刘新垣王国梁
- 关键词：LOVO细胞胞嘧啶脱氨酶基因CD基因结肠癌IL-2基因基因增强
- 帕金森病动物模型的实验治疗
- 许德华郑仲承蒋琼陈生弟曹蕾刘健徐玲飞刘振国卓铭陈生文刘新垣孙兰英
- 从PK发病机制是黑质多巴胺能神经元退变出发，本研究从两个方面进行治疗，一是以多巴胺（DA）合成途径的关键酸--酪氨酸羟化酶基因为治疗基因，以成肌细胞，原代胶质细胞和于生化的胶质细胞为效名细胞通过逆转录病毒将基因转录效应细...
- 关键词：
- 关键词：帕金森病基因治疗酪氨酸羟化酶
- 酪氨酸羟化酶和GTP环水解酶-1基因修饰永生化成纤维细胞及其表达研究被引量：2
- 2001年
- 目的 探讨酪氨酸羟化酶 (TH)和GTP环水解酶 1(GCH)基因修饰的永生化成纤维细胞的可行性和表达能力 ,为其混合移植治疗帕金森病 (PD)作准备。方法 SV40大T抗原转化成纤维细胞使其永生化。构建TH和GCH基因真核表达质粒并转染永生化成纤维细胞 ,利用免疫组化和RT PCR检测其在体内外的表达。结果 TH和GCH基因修饰的永生化成纤维细胞在体外可长期传代培养且可有效表达 ,脑内移植后TH基因至少可表达 8周以上。
- 陈先文陈生弟许德华徐羚飞郑仲衡
- 关键词：酪氨酸单氧化酶成纤维细胞GTP
- 人γ-干扰素基因在大肠癌细胞中的表达研究被引量：8
- 2002年
- 目的探讨γ 干扰素用于基因治疗的有效途径。方法将人γ 干扰素 (huIFN γ)全长cDNA经序列测定后克隆到真核表达质粒pcDNA 3中 ,构建真核表达质粒pcDNA 3 IFN γ ,利用阳离子脂质体Lipofectamine介导转染人大肠癌细胞 ,用PCR、RT PCR对该基因的整合和表达进行鉴定 ,并对细胞培养上清中γ 干扰素的活性进行检测。结果该基因已经有效地进入细胞内并实现了表达。结论利用脂质体可以有效地将huIFN γ基因导入肿瘤细胞内 ,并获得稳定表达。
- 丁强沈历宗吴文溪许德华刘新垣
- 关键词：大肠癌细胞
- 癌胚抗原启动子控制胞嘧啶脱氨酶基因体外对结肠癌细胞专一性杀伤被引量：6
- 2003年
- 目的 :研究癌胚抗原 (CEA)启动子是否能控制大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶 (EC CD)基因在CEA阳性结肠癌细胞中专一性表达和杀伤结肠癌细胞。方法 :构建由CEA启动子驱动的含EC CD基因的重组腺病毒载体AdCEACD与由巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的含EC CD基因的腺病毒载体AdCMVCD ,分别感染CEA阳性的人结肠癌细胞株Lovo细胞和CEA阴性的Hela细胞 ,用RT PCR法检测受染细胞中EC CD基因的表达 ,并用MTT法检测感染后细胞对 5 氟胞嘧啶 (5 FC)的敏感性。结果 :Lovo细胞在AdCMVCD及AdCEACD感染后均有EC CDmRNA表达 ,且对 5 FC的敏感性明显增强 ,Hela细胞在AdCMVCD感染后有EC CDmRNA表达 ,对 5 FC的敏感性增强 ,而在AdCEACD感染后则没有EC CDmRNA表达 ,5 FC对其亦无杀伤作用。结论 :CEA启动子能够控制EC CD基因专一性地在CEA阳性的结肠癌细胞中表达 ,从而实现EC
- 吴文溪沈历宗刘新垣许德华丁强华一兵
- 关键词：胞嘧啶脱氨酶自杀基因结肠癌
- 腺病毒介导的肿瘤血管靶向的体外自杀基因治疗研究被引量：9
- 1998年
- 本工作在血管内皮细胞中分别建立了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统,用于抑制实体肿瘤中血管生成的研究.构建含自杀基因的重组腺病毒AdCMVtk和AdCMVcd,滴度均1×10^(12)pfu/ml.病毒感染小鼠血管内皮细胞lGll(MOI=100),并鉴定自杀基因的表达,测定原药对它们的杀伤.生长抑制试验表明,GCV对lGll/Ad-tk细胞杀伤的IG_(50)为0.2μmol/ L,5-FC对lGll/Ad-cd细胞杀伤的IC_(50)为20μmol/L.电镜下显示被原药杀伤的血管内皮细胞有明显的细胞凋亡现象.同时混合细胞实验证明两系统均存在明显的旁杀伤效应.从而在体外水平证明了HSV-tk/GCV和EC-cd/5-FC自杀基因系统杀伤增生血管内皮细胞的有效性.
- 徐舲飞许德华戈凯郑仲承孙兰英刘新垣
- 关键词：血管内皮细胞腺病毒自杀基因肿瘤
