袁勤生
- 作品数：328 被引量：1,824H指数：24
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 重组羧肽酶原B的体外复性及羧肽酶B的纯化研究
- 为了获得活性羧肽酶B,本文利用稀释复性和凝胶层析复性两种方法对羧肽酶B的包涵体进行了复性研究.发现在最终蛋白浓度相同的情况下,凝胶柱复性要优于稀释复性.复性后的蛋白质经过胰蛋白酶酶解后,经DEAE离子交换柱进一步纯化,得...
- 张晓彦袁勤生
- 关键词：羧肽酶B包涵体稀释复性
- 文献传递
- 金属螯合亲和层析分离纯化重组人锰超氧化物歧化酶被引量：3
- 2002年
- 以金属铜螯合的亲和层析方法分离纯化重组人锰超氧化物歧化酶,采用3种不同的洗脱方法都可以对重组酶进行分离纯化.但是通过鉴别比较,采用方法1即逐步降低洗脱液的pH和固定洗脱液的NH+4的浓度可以获得较好的结果,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得到一条分子质量约为22000u的蛋白条带,证明所得到的为纯度较高的重组人锰超氧化物歧化酶（rhMn-SOD）。
- 廖晓全张艳红袁勤生
- 关键词：重组人锰超氧化物歧化酶金属螯合亲和层析洗脱纯化
- 海藻糖的应用研究进展被引量：28
- 2005年
- 袁勤生
- 关键词：海藻糖分子结构
- 黄杆菌肝素酶I基因的克隆与表达
- 2008年
- 目的克隆并表达黄杆菌肝素酶I(HepI)基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增黄杆菌HepI基因,验证后插入到表达质粒pET-22b中构建表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白质表达,并用Azure A法测定酶活性。结果PCR扩增得到序列正确的HepI基因,并将该基因成功插入到pET-22b表达载体中。重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达的蛋白质经SDS-PAGE分析,与目的蛋白质的相对分子质量基本一致,其活性约为50 U/LA600。结论克隆并成功表达了黄杆菌HepI基因。
- 傅文彬熊可强阚梦元赵健李素霞姬胜利袁勤生
- 关键词：克隆基因表达酶活性
- 亚硝酸盐法测定超氧化物歧化酶活性被引量：3
- 1991年
- 用亚硝酸盐、氰化钾抑制区别法测定样品中的 Cu,Zn-SOD 和 Mn-SOD,灵敏度高,重现性好,操作简便。实验表明,抑制率达50%时所需 SOD 的浓度为0.07 μg/ml,其批内和批间的变异系数分别为6.0%和5.5%,鸡肝 Cu,Zn-SOD 与 KCN 的抑制复合物的表观解离常数 K′为288.6±45.5 μmol。
- 王富军袁勤生
- 关键词：亚硝酸盐氰化钾超氧物歧化酶
- 各种还原剂对Cu,Zn-SOD的失活和还原作用被引量：1
- 1990年
- 研究了某些还原剂(K_4Fe(CN)_6,NaS_2O_4,NaBH_4,H_2O_2)对Cu,Zn-SOD的失活和还原作用。并用电子顺磁共振观察了SOD被还原前后的波谱变化。
- 陆领倩邓碧玉袁勤生
- 关键词：超氧物歧化酶还原剂失活
- 口服猪脾来源免疫抑制组分抗炎作用的实验研究被引量：2
- 2001年
- 目的 研究口服Mr小于 5 0 0 0的猪脾来源免疫抑制组分 (SISC p)的抗炎作用。方法 通过给动物igSISC p ,观察其对巴豆油致小鼠耳廓肿胀和对大鼠棉球肉芽肿的影响。结果 igSISC p一次给药对巴豆油致小鼠耳廓肿胀没有影响 ,多次给药在一定剂量 (10mg·kg-1)则有显著的抑制作用 (P <0 .0 5 ) ;在实验剂量 (16 ,8和 4mg·kg-1)下 ,SISC p对大鼠棉球肉芽肿均有显著的抑制作用 ,其中高剂量和中剂量的作用效果较好。结论 igSISC
- 王凤山袁勤生程艳娜
- 关键词：抗炎作用
- EC-SOD研究概况被引量：4
- 2005年
- 朱希强袁勤生
- 关键词：EC-SOD超氧化物歧化酶糖蛋白大脑萎缩心血管疾病
- 重组人EC-SOD包涵体的稀释复性及重折叠后蛋白的纯化被引量：4
- 2005年
- 目的确定重组人ECSOD包涵体体外稀释复性和复性后蛋白纯化的适宜方法。方法通过对pH、温度、包涵体蛋白浓度、尿素和精氨酸浓度及氧化还原对比率的定性定量分析,研究重组人ECSOD包涵体体外稀释复性的基本条件。采用金属离子亲和柱(IMAC)和肝素亲和柱(Heparinsepharose)对复性蛋白进行纯化,比较纯化效率的差异。结果最佳复性条件为pH8.5,尿素浓度为1.5molL,精氨酸浓度大于0.3molL,GSH∶GSSG=4∶1;复性温度及包涵体蛋白终浓度越高,复性效率越低。IMAC和Heparinsepharose亲和柱均可用来纯化复性蛋白溶液,但Heparinsepharose纯化效率较高。结论确定了重组人ECSOD包涵体体外稀释复性的最佳条件及复性后蛋白纯化的方法。
- 朱希强袁勤生
- 关键词：包涵体蛋白蛋白浓度蛋白溶液IMAC
- 明胶修饰超氧化物歧化酶的研究被引量：2
- 1997年
- 应用经水解超滤后的小分子明胶对 SOD进行化学修饰 ,修饰 SOD的分子量为330 0 0～ 4 0 0 0 0 ,紫外吸收特性基本不变。修饰后的 SOD热稳定性、酸碱稳定性和对胃蛋白酶的稳定性均有明显提高。
- 陈红征袁勤生
- 关键词：修饰超氧化物歧化酶明胶
