薛秀蕾
- 作品数：5 被引量：7H指数：1
- 供职机构：东南大学医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种用于人乳头瘤病毒基因分型检测的分子信标-实时PCR方法
- 目的建立一种基于分子信标探针的多重实时荧光定量PCR方法实现人乳头瘤病毒部分高危型别基因分型的快速检测方法2.1引物和分子信标的设计与合成通用引物GP5+/6+位于HPV病毒基因组中最为保守的L1区,(forward 5...
- 薛秀蕾吴国球
- 结缔组织生长因子CT结构域的原核表达及分离纯化
- 2017年
- 目的:构建pET32a-TrxA-His-CTGF-CT原核表达载体,实现重组CTGF-CT的可溶性表达及分离纯化,以用于制备CTGF-CT抗体。方法:基因合成CTGF-CT序列,利用NcoI和XhoI限制性内切酶双酶切后插入pET32a载体,构建pET32a-TrxA-His-CTGF-CT重组质粒,阳性质粒转化E.coli strain BL21(DE3)细胞,通过异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导获得重组融合蛋白,利用镍柱亲和纯化及肠激酶酶切纯化获得目的蛋白CTGF-CT,SDS-PAGE鉴定蛋白纯度并进行Western blotting分析。结果:所构建pET32a-TrxA-His-CTGF-CT重组质粒验证正确。经诱导表达获得了与预期分子量(28 kD)一致的融合蛋白,融合蛋白经肠激酶切割及两次镍柱亲和纯化获得目的蛋白CTGF-CT,纯化后纯度约95%,Western blotting分析表明纯化目的蛋白为CTGF-CT。结论:通过构建原核pET32a-TrxA-His-CTGF-CT表达载体实现了重组CTGF-CT蛋白的表达及分离纯化,为CTGF-CT抗体的制备和CTGF-CT功能的深入研究打下了基础。
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- 关键词：结缔组织生长因子原核表达蛋白纯化
- 人乳头瘤病毒基因检测及分型方法研究进展被引量：7
- 2010年
- 流行病学和分子生物学资料表明,人乳头瘤病毒(HPV)的感染能够引起子宫内上皮样瘤变(CIN)及宫颈癌的发生。并且HPV的不同型别致病力也存在差异,高危型别、高病毒载量的持续感染是促使宫颈癌发生的重要因素。因此,HPV感染的早期发现、准确分型及病毒定量对宫颈癌的防治具有重要意义。作者对HPV基因的检测和分型方法如核酸杂交、PCR、荧光定量PCR等,以及各方法的优缺点进行综述。
- 薛秀蕾吴国球
- 关键词：聚合酶连反应实时荧光定量分子信标
- 重组抗菌肽S-thanatin的表达纯化及不同MIC鉴定方法对其结果的影响
- 2011年
- 目的:获得重组抗菌肽S-thanatin(Ts)在大肠杆菌的可溶性表达及分离纯化方法,通过不同方法鉴定Ts的最低抑菌浓度(MIC),揭示不同方法对结果的影响。方法:利用基因重组手段构建表达质粒pET32a-Ts,转化大肠杆菌BL21(DE3),可溶性表达Ts融合蛋白,利用镍柱亲和层析纯化出融合蛋白,透析以后经凝血酶酶切,再通过葡聚糖凝胶G-50纯化除去融合伴侣TRX,最后冻干精制得到Ts冻干粉。利用玻璃管的常量肉汤稀释法、聚苯乙烯和聚丙烯96孔板的微量肉汤稀释法和MH琼脂打孔法测定阳离子肽Ts的抑菌活性。结果:Ts在大肠杆菌中成功可溶性表达并获得85%以上纯度的目的蛋白。不同测定方法显示,Ts对同一菌株具有不同的MIC,以常量肉汤稀释法和聚丙烯96孔板的微量肉汤稀释法测定的多肽抑菌活性效果最佳。结论:Ts在工程菌BL21(DE3)中得到高表达,纯化出后具有较高的抑菌生物活性。不同方法测定出差异化MIC表明,阳离子肽Ts的抑菌活性易受实验材料材质影响。
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- 关键词：大肠杆菌表达纯化抗菌活性
- 靶向MDA-MB-231乳腺癌的新型肽的荧光成像研究（英文）
- 2014年
- 整合素αvβ3受体在某些肿瘤细胞和肿瘤新生血管表达上调,可以作为受体阳性表达的肿瘤的示踪靶点。本研究利用近红外荧光染料Cy5.5标记一种新型肽(命名为P1c)构建的分子探针(Cy5.5-P1c),对高表达整合素αvβ3受体的人乳腺癌MDA-MB-231裸鼠肿瘤模型进行在体及体外近红外光学成像研究。流式细胞术及激光共聚焦显微镜结果显示P1c能够与MDA-MB-231细胞特异性结合。活体近红外荧光成像显示Cy5.5-P1c探针在肿瘤部位有明显的积聚,且肿瘤对探针的摄取能被游离的P1c阻断;离体肿瘤组织的荧光强度明显高于其它正常组织;免疫组织化学结果提示肿瘤组织对Cy5.5-P1c探针的摄取与整合素αvβ3受体阳性表达有关。以上结果提示,P1c有希望成为疾病治疗中药物传递的载体,有助于肿瘤定位的研究。
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- 关键词：整合素ΑVΒ3分子探针近红外荧光成像
