蒋学君
- 作品数：10 被引量：42H指数：4
- 供职机构：四川大学华西公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡的机制研究被引量：11
- 2014年
- 目的通过研究三氧化二砷对人肝癌细胞株HepG2活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)水平、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和核因子E2相关因子2(Nrf2)表达的影响,探讨三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡的机制。方法分别采用0、2.5、5和10μmol/L三氧化二砷处理HepG2达24h后,MTT实验测定细胞存活率(另增25、50μmol/L浓度组),流式细胞术检测细胞凋亡水平,DCFH-DA荧光探针测定细胞内ROS水平,5,5-二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)比色法检测细胞中GSH含量,蛋白印记检测γ-GCS催化亚基GCLC和调节亚基GCLM以及核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白的表达水平。结果随着三氧化二砷染毒浓度的增加,HepG2细胞凋亡率、ROS水平和Nrf2蛋白表达均增加(P<0.05),而细胞存活率、GSH含量、GCLC和GCLM蛋白表达量均降低(P<0.05)。结论三氧化二砷通过诱导细胞产生ROS,抑制γ-GCS的表达以及减少GSH合成,从而诱导人肝癌细胞凋亡。
- 赵巍胡亚男蒋学君陈承志张遵真
- 关键词：三氧化二砷凋亡Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶
- 虾青素对^(60)Coγ射线所致小鼠氧化损伤的保护作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨虾青素对60Coγ射线诱导的小鼠氧化损伤的保护作用。方法 50只昆明种小鼠随机分为5组,即对照组、模型组和虾青素高、中、低剂量组(10.2、2.0和4.0mg/kg)。辐照前,各剂量组每日经口灌胃不同浓度的虾青素,模型组和对照组则给予等体积植物油,连续30天。30天后,除对照组外,其余各组给予8 Gy 60Coγ射线全身一次性照射。照射后第4天处死小鼠,取肝细胞进行彗星实验以观察细胞DNA损伤,制取肝匀浆测定MDA含量、SOD和GSH-Px活性,同时进行外周血粒细胞和骨髓有核细胞计数。结果与对照组相比,模型组MDA含量显著升高(P<0.01),SOD和GSH-Px活性显著降低(P<0.01);与模型组相比,虾青素各组MDA含量显著降低(P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.01),高剂量组GSH-Px活性显著升高(P<0.01)。模型组DNA损伤指标均显著高于对照组(P<0.01),而虾青素各组DNA损伤显著低于模型组(P<0.01),且随着虾青素剂量的增加,细胞拖尾率和OTM逐渐减少。与对照组相比,模型组粒细胞和骨髓有核细胞计数显著降低(P<0.01),而虾青素各组粒细胞和中、高剂量组骨髓有核细胞显著高于模型组(P<0.01)。结论虾青素对于辐射诱导的氧化损伤具有保护作用。
- 赵巍蒋学君陈晨崔杰杨沫张遵真
- 关键词：虾青素彗星实验抗氧化
- Nrf2信号通路在亚砷酸钠诱导支气管上皮细胞恶性转化中的作用被引量：4
- 2016年
- 目的构建亚砷酸钠(NaAsO_2)诱导人支气管上皮(HBE)细胞恶性转化的模型,探讨核转录因子-E2类相关因子2(Nrf2)信号通路在恶性转化过程中的作用。方法以2.5μmol/L NaAsO_2染毒HBE细胞,以四氮唑盐比色(MTT)法、克隆形成和划痕侵袭等实验鉴定细胞恶性转化;蛋白免疫印迹实验检测恶性转化过程中细胞内Nrf2及其下游靶基因醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)的表达水平。结果随NaAsO_2染毒代数的增加,HBE细胞逐渐表现增殖失控,染毒25代(As-HBE-T25)和50代(As-HBE-T50)的克隆形成率分别为1.33%和4.47%,侵袭能力为正常HBE的2.04倍和4.17倍;同时,细胞浆和细胞核中的Nrf2表达水平均下降,As-HBE-T25细胞浆和细胞核中的Nrf2表达水平分别为正常HBE的0.83倍和0.81倍,As-HBE-T50为0.42倍和0.63倍;NQO1在As-HBE-T25和As-HBE-T50中的表达为正常HBE的0.84倍和0.59倍,HO-1则为0.75倍和0.48倍(P<0.05)。结论 NaAsO_2慢性染毒诱导了人支气管上皮细胞恶性转化,可能的机制为NaAsO_2持续抑制Nrf2信号通路,使NQO1和HO-1表达水平降低,从而引起细胞恶性增殖。
- 谷仕艳陈承志蒋学君张遵真
- 关键词：恶性转化
- 苯并[a]芘对大鼠学习记忆及海马神经元影响被引量：9
- 2011年
- 目的探讨苯并[a]芘(BaP)对大鼠学习记忆及海马神经元的影响。方法将50只SD大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、BaP低(2.5 mg/kg)、中(5 mg/kg)、高(10 mg/kg)剂量组,腹腔注射染毒,每天1次,持续30d;用Morris水迷宫测试学习记忆,电镜观察海马神经元超微结构。结果空白对照组、溶剂对照组和BaP低、中、高剂量组穿越平台次数分别为(12.03±2.43)、(11.35±2.68)、(9.75±1.78)、(7.63±1.67)、(4.38±1.46)次,在平台象限停留时间分别为(46.34±11.56)、(48.12±13.22)、(32.35±7.68)、(26.13±5.34)、(16.14±3.15)s,差异均有统计学意义(P<0.05);随染毒剂量的增加,BaP低、中、高剂量组大鼠的平均逃避潜伏期和第1次寻找平台的潜伏期均延长,平均有效策略百分比、穿越平台的次数均减少,在平台象限停留时间均缩短,差异均有统计学意义(P<0.05);电镜观察结果显示,BaP低剂量组海马神经元胞体浓缩变性,核膜皱缩变形;中剂量组出现线粒体肿胀;高剂量组出现高尔基扩张。结论 BaP亚慢性染毒对大鼠具有一定的神经行为毒性。
- 陈承志汤艳蒋学君涂白杰
- 关键词：苯并[A]芘学习记忆能力MORRIS水迷宫海马
- 外源性还原型谷胱甘肽对亚砷酸钠诱导遗传毒性及氧化应激的保护作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨外源性还原型谷胱甘肽（GSH）能否拮抗亚砷酸钠（NaAsO2）诱导的遗传毒性及氧化损伤。方法以人肺腺癌A549细胞为研究对象，按处理方式分为对照组、单独NaAsO2或GSH处理组及不同浓度GSH和NaAsO2联合组，观察GSH处理对细胞存活、氧化应激水平、DNA单链断裂及染色体损伤的影响。结果NaAsO2单独染毒处理可导致细胞存活率、集落形成率、SOD酶活性和GSH含量低于对照组，而ROS水平、彗星率、Oliver尾距和微核细胞率较对照组增加（P〈0．05）。GsH浓度为0．5—5mmol／L时，联合处理组与单独NaAsO2处理组比较上述各项检测指标差异无显著性；而当GSH剂量为10和20mmol／L时，NaAsO2处理产生的毒性作用虽有所改善，却仍显著低于对照组（P〈0．05）；随着GSH剂量水平的增加，在GSH为40或50mmol／L时，细胞存活、集落形成、氧化应激水平及DNA和染色体损伤情况与对照组比较差异已无显著性。结论外源性添加高浓度的GSH能够显著减弱NaAsO2的细胞毒性，减轻DNA、染色体损伤及氧化应激水平。
- 陈承志蒋学君张遵真
- 关键词：亚砷酸钠谷胱甘肽DNA损伤染色体断裂氧化应激
- 白藜芦醇与三氧化二砷联合处理诱导肺腺癌细胞凋亡及其机制探讨被引量：6
- 2016年
- 目的探讨白藜芦醇(RES)与三氧化二砷(As2O3)联合处理诱导肺癌细胞凋亡的作用及机制。方法以人肺腺癌A549细胞为研究对象,按处理方式分为对照组、单独RES或As2O3处理组及二者联合组,观察RES和As2O3联合处理对细胞存活率、集落形成率、活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、线粒体膜电位、细胞凋亡等的影响;同时,加入谷胱甘肽合成酶抑制剂L-丁硫氨酸亚砜胺(L-BSO),观察RES是否通过GSH耗竭导致细胞内ROS蓄积,进而增强As2O3诱导的细胞凋亡。结果RES单独作用于细胞时,在浓度大于20μmol/L时,A549细胞存活率随浓度的增加而下降。与As2O3单独处理相比,加入60μmol/L RES组的集落形成率、细胞凋亡率、ROS水平、GSH含量、线粒体膜电位的变化及细胞色素c和Cas-3水平的差异均有统计学意义(P<0.05)。经谷胱甘肽合成酶抑制剂BSO预处理后,RES和As2O3诱导的细胞凋亡由30.0%增加至77.7%,同时细胞内GSH含量锐减而ROS大量蓄积。结论 RES与As2O3联合处理与RES和As2O3单独处理相比,可诱导更多的A549细胞凋亡,其机制可能是RES和As2O3联合处理可降低GSH含量,诱导ROS产生与蓄积,使线粒体膜电位下降和细胞色素c释放入细胞质,活化Cas-3,最终诱导细胞凋亡。
- 谷仕艳陈承志蒋学君张遵真
- 关键词：白藜芦醇三氧化二砷凋亡线粒体途径
- Nrf2信号通路在亚砷酸钠诱导支气管上皮细胞恶性转化中的作用
- 目的 探讨核转录因子-E2类相关因子2(Nrf2)信号通路在亚砷酸钠(NaAsO2)诱导人支气管上皮(HBE)细胞恶性转化过程中的作用.方法 以2.5 μmol/L NaAsO2染毒HBE细胞50代,观察细胞恶性表型并检...
- 谷仕艳陈承志蒋学君张遵真
- 关键词：恶性转化
- 亚砷酸钠和三氧化二砷对人正常肝细胞增殖与凋亡效应的影响被引量：8
- 2014年
- 目的研究亚砷酸钠和三氧化二砷对人正常肝细胞L02增殖与凋亡效应的影响。方法分别采用亚砷酸钠和三氧化二砷处理人正常肝细胞L02,比色实验和集落形成实验检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,试剂盒法测定细胞内活性氧水平和谷胱甘肽含量,微核实验评价细胞染色体损伤。结果随着亚砷酸钠或三氧化二砷染毒浓度的增加,L02细胞的存活率、集落形成率和谷胱甘肽含量均下降,而集落形成抑制率、凋亡率、活性氧水平和微核率均增加,此外细胞周期都被阻滞在G2/M期。结论亚砷酸钠和三氧化二砷均能诱导人正常肝细胞L02活性氧增加和谷胱甘肽含量下降,继而引起细胞染色体损伤、细胞凋亡、细胞周期阻滞和细胞生长抑制,提示氧化应激是亚砷酸钠和三氧化二砷"致癌"与"治癌"共同的分子机制。
- 胡亚男赵巍陈承志蒋学君张遵真
- 关键词：亚砷酸钠三氧化二砷凋亡氧化应激染色体损伤
- 苯并[a]芘在大鼠脑组织中分布动态观察
- 2010年
- 目的观察[14C]标记苯并[a]芘在大鼠脑内的分布。方法将100只SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组尾静脉注射[14C]标记苯并[a]芘3.7×105Bq/kg,对照组注射等量生理盐水;在注射后1,6,12,24和48 h用光镜放射自显影法观察苯并[a]芘在脑内的分布情况。结果与对照组比较,实验组大鼠脑组织注药后1 h即有苯并[a]芘银粒出现,随着时间的增加,银粒数也逐渐增加,24 h达高峰,48 h明显减少,注射后1,6,12,24,48 h银粒数分别为(17.68±1.79),(22.67±2.15),(25.79±2.55),(32.33±2.78),(18.01±1.68)粒,差异有统计学意义(F=69.67,P<0.01);银粒在脑中分布不均匀,注药后1 h主要集中在海马,6 h主要集中于大脑皮层,12 h则分布于纹状体;各时相脑组织中神经元银粒数明显高于神经胶质细胞(P<0.05)。结论苯并[a]芘在各脑区的分布不均匀,24 h达到高峰,神经元细胞可能是苯并[a]芘靶细胞。
- 汤艳陈承志蒋学君涂白杰
- 关键词：苯并[A]芘脑组织
- PARP-1抑制剂4-氨基-1,8-萘二胺增加阿霉素对小鼠胚胎成纤维细胞敏感性的研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究抑制聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1[PARP-1]活性能否增加阿霉素(ADM)的细胞敏感性。方法以小鼠胚胎成纤维细胞为研究对象,将细胞按是否经PARP-1抑制剂4-氨基-1,8-萘二胺(4-AN)处理分为处理组和对照组,比较两组细胞经ADM染毒后细胞存活情况和DNA单链断裂及染色体损伤的差异。结果 4-AN处理组细胞的阿霉素半数抑制浓度(1.09±0.15μg/ml)低于对照组(2.19±0.22μg/ml),差异有显著性(P=0.002);在0.025～0.2μg/ml时,群体倍增时间较对照组长(P<0.05),0.05～0.2μg/ml时,集落形成率较对照组低(P<0.05)。单细胞凝胶电泳及微核实验结果显示,当ADM浓度范围为0.02～0.5μg/ml时,4-AN处理组细胞的拖尾率、尾长、Olive尾矩3个指标值均大于对照组(P<0.05),在ADM为0.01～0.2μg/ml时,4-AN处理组细胞的微核细胞率和细胞微核率均比对照组高(P<0.05)。结论抑制PARP-1活性能显著增加阿霉素的细胞敏感性,其机制与DNA损伤修复有关。
- 蒋学君刘蜀坤邓雯文赵巍吴媚张遵真
- 关键词：阿霉素
