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田李: 作品数：17 被引量：89H指数：3; 供职机构：曲阜师范大学生命科学学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金山东省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>

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一种大丽轮枝菌基因敲除的方法: 本发明提供一种大丽轮枝菌基因敲除的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：构建用于同源重组的重组质粒，该重组质粒由载体和同源重组DNA片段组成，所述同源重组DNA片段含有用于替代待敲除基因的外源抗性基因和位于该外源抗性基因...; 戴小枫田李陈捷胤汪佳妮; 文献传递

膜泡运输蛋白VdSec22参与大丽轮枝菌胞外蛋白的分泌和致病性: 2015年; 【目的】验证大丽轮枝菌分泌途径中一个膜泡运输蛋白Vd Sec22的功能,为防治棉花黄萎病提供潜在的生物靶点。【方法】利用"正负双向筛选法"的方法,构建大丽轮枝菌Vd Sec22蛋白编码基因缺失的突变体菌株ΔQF。通过农杆菌介导的转化,将其编码基因Vd Sec22重新导入ΔQF构建了功能回补菌株CΔQF。以野生型菌株为对照,检测上述菌株分泌胞外蛋白(果胶酶、纤维素酶和毒素蛋白)的能力;采用蘸根接种的方法,检测上述菌株对棉花致病性的差异。同时通过定量PCR检测内质网分子伴侣表达量的方法,推断突变体菌株ΔQF中是否发生了内质网应激反应。【结果】成功构建了基因敲除突变体ΔQF和功能回补菌株CΔQF。突变体菌株ΔQF的果胶酶、纤维素酶、毒素蛋白的分泌能力和对棉花的致病性均较野生型减弱,并且产生了内质网应激反应。重新导入Vd Sec22基因可弥补突变体菌株ΔQF的上述缺陷。【结论】Vd Sec22是大丽轮枝菌的一个重要分泌途径蛋白,在大丽轮枝菌诸多胞外致病蛋白的分泌和棉花致病性中起重要作用。Vd Sec22可作为防治棉花黄萎病的潜在生物靶点。; 田李徐荣旗王转斌刘娜冯凤鹃曲志才; 关键词：大丽轮枝菌分泌蛋白分泌途径

核酸以及鉴定真菌菌株致病型的方法和试剂盒: 本发明提供了一种核酸，该核酸具有SEQ ID NO：1所示的序列，或者具有SEQ ID NO：1所示的序列中的特异性序列。本发明还提供了与如上所述的核酸互补的核酸。本发明还提供了一种鉴定真菌菌株致病型的方法，所述真菌菌株...; 戴小枫陈相永李蕾柳少燕王金龙陈捷胤田李; 文献传递

高效大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)基因敲除体系的构建被引量：8: 2011年; 【目的】为了深入研究大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)致病基因的功能,构建高效大丽轮枝菌基因敲除体系。【方法】融合PCR构建基因敲除载体;利用农杆菌介导法转化大丽轮枝菌;使用在T-DNA之间加入致死基因的双元载体,使T-DNA随机插入转化子在添加5-氟脱氧尿苷的培养基上不能存活,实现对随机插入转化子的"反向筛选"。【结果】对大丽轮枝菌腺嘌呤合成酶基因和几丁质合成酶基因进行基因敲除验证,基因敲除转化子在总转化子中的比例分别达到87%和44%。【结论】成功构建大丽轮枝菌高效基因敲除体系,为大丽轮枝菌致病基因的功能验证提供了技术平台。; 田李陈捷胤汪佳妮王金龙戴小枫; 关键词：大丽轮枝菌基因敲除融合PCR 农杆菌介导转化致死基因

从功能基因到生物学性状:大丽轮枝菌致病性形成的分子基础被引量：2: 2022年; 大丽轮枝菌为典型的土传维管束病原真菌,针对其致病相关基因的挖掘与功能解析一直是植物病理学研究的热点。大丽轮枝菌具有定殖维管束、"毒素"致萎、形成微菌核、种群分化多元化等特征,这些性状最终支撑或决定了病原对寄主的致病性基础。从进化角度来说,功能基因决定生物学性状。截至目前,在大丽轮枝菌中已鉴定出上百个功能基因;但针对其与病原的重要生物学性状和致病性之间的关系尚未系统阐述。为此,本文概述了大丽轮枝菌功能基因鉴定的发展历程,并以功能基因决定生物学性状为逻辑线条,重点梳理了功能基因与大丽轮枝菌重要生物学性状形成的关系,厘清了大丽轮枝菌致病性与决定重要生物学性状功能基因的关系。这些观点将为系统建立大丽轮枝菌重要生物学性状形成的功能基因网络,以及从功能基因决定生物学性状角度阐明大丽轮枝菌致病形成的分子基础提供理论支撑。; 田李李俊娇戴小枫张丹丹陈捷胤; 关键词：黄萎病大丽轮枝菌生物学性状功能基因

真菌中DNA重复序列诱导点突变的研究进展: 2014年; 1987年,由Selker等在粗糙脉孢菌中首次发现重复序列诱导点突变(repeat-induced point mutation,RIP).在重复序列诱导点突变过程中,搜寻前减数分裂组织单倍体核中DNA的重复序列,然后发生众多的碱基C到T的突变,产生富碱基T+A片段,从而使重复序列中的G-C碱基对发生转换突变成为A-T碱基对.此外,发生RIP的序列多集中在着丝粒区域,主要是转座子甲基化后的遗迹.移动转座子是真核生物基因组进化的主要驱动力.对于真菌,重复序列诱导点突变(RIP)在减数分裂过程中通过突变多拷贝DNA,能最大限度地减少转座子的影响,因此对RIP的研究在一定程度上能有助于了解基因组进化的真谛.综述了重复序列诱导点突变的产生机制,以及真菌中重复序列诱导点突变的研究进展.; 冯凤鹃曲志才田李王转斌; 关键词：真菌 DNA序列

新一代测序技术的发展和应用被引量：33: 2015年; DNA测序技术是人类探索生命秘密的重要研究手段。自第一代的Sanger测序技术诞生以来,DNA测序技术经历了三代变革,产生了第二代到第四代测序技术,统称为新一代测序技术。目前,新一代测序技术的数据产出能力呈指数增长,而且这一技术本身也从依赖DNA聚合酶的生化反应转变为面向物理学中纳米技术的新领域。新一代测序对生命科学领域具有里程碑意义,引领了科学研究模式革新和研究思维的转变。科研人员可利用新一代测序技术对基因组、转录组和表观组等诸多领域展深入的研究。分析了新一代测序技术的特点,并对其未来的发展方向以及应用进行了展望。; 田李张颖赵云峰; 关键词：纳米孔

Rab GTPase家族蛋白Sec 4调控大丽轮枝菌致病性功能分析: 大丽轮枝菌是引起多种农作物黄萎病的土传性病原真菌,严重威胁农业生产安全。胞外分泌蛋白调控在病原侵染寄主过程中扮演重要角色,其中Rab GTPase家族蛋白Sec 4是蛋白分泌晚期的重要调控因子,参与了蛋白的膜泡运输,但在...; 黄彩敏宋爽爽刘燕孙维霞田李; 关键词：大丽轮枝菌蛋白定量; 文献传递

大丽轮枝菌基因敲除体系的建立及分泌蛋白初步分析: 大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)是引起棉花黄萎病的病原菌,在世界范围内造成重大经济损失。已有研究表明大丽轮枝菌的分泌蛋白即毒素蛋白是造成棉花黄萎、落叶和减产的主要因素之一。因此构建大丽轮枝菌基因敲除...; 田李; 关键词：大丽轮枝菌基因敲除分泌蛋白棉花黄萎病致病机理

拮抗细菌KRS022的鉴定及对大丽轮枝菌的抑制效果被引量：2: 2023年; 【目的】明确拮抗细菌KRS022的分类地位及对多种病原真菌的抑制作用,重点研究对作物黄萎病的防治效果及其对病原大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)的抑制效果,为抗大丽轮枝菌生防制剂的研发提供资源。【方法】通过形态学、生理生化试验及16S rDNA与gyrB基因序列串联分析确定KRS022的分类地位;采用对峙培养法和对扣熏蒸法测试KRS022对多种真菌的抑制作用;采用发酵菌液平板法、涂布法以及对扣熏蒸法明确KRS022对大丽轮枝菌的平板抑制效果;通过无细胞上清共培养法与对扣熏蒸法明确KRS022对大丽轮枝菌孢子萌发及菌丝形态的影响;通过盆栽试验及大丽轮枝菌生物量测定明确KRS022对棉花和烟草黄萎病的防治效果;利用RT-qPCR法检测KRS022激发植物免疫相关基因的表达特性。【结果】拮抗菌株KRS022为革兰氏阴性细菌,鉴定为产碱假单胞菌(Pseudomonas alcaligenes)。该菌株具有解磷、解钾、固氮功能,可产生嗜铁素,具有蛋白酶、淀粉酶、过氧化氢酶活性,属于好氧产碱型细菌,100μg·mL^(-1)氨苄青霉素可作为该菌株的天然抗性筛选条件。KRS022对多种病原真菌(大丽轮枝菌、尖镰孢、禾谷镰孢、稻瘟病菌、灰葡萄孢、胶孢炭疽菌、果生炭疽菌)均具有不同程度的抑菌活性,对峙和对扣培养对大丽轮枝菌Vd991的抑制率分别达75.19%和99.78%。发酵菌液平板法、涂布法以及对扣熏蒸法对大丽轮枝菌的抑制率分别为96.21%、99.72%和99.44%,均能显著抑制Vd991菌丝生长;KRS022无细胞上清液与大丽轮枝菌分生孢子共培养完全抑制孢子萌发,对扣熏蒸后Vd991菌丝发生膨大、变粗。室内盆栽试验结果表明KRS022能够显著抑制棉花和烟草黄萎病的发生,并发现对植株具有促生作用,与清水处理的烟草盆栽相比,施用KRS022菌液的烟草盆栽的叶维度及单叶面积增幅分别达65.7%和146.4%;施用KRS022菌液后大丽轮枝菌在�; 罗万珍王丹齐宏玥王彤刘政田李戴小枫陈捷胤麦合木提江·米吉提; 关键词：黄萎病大丽轮枝菌生物防治植物免疫

田李

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