王秋华
- 作品数：2 被引量：57H指数：2
- 供职机构：浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 根癌土壤杆菌介导的丝状真菌转化被引量：30
- 2003年
- 最近研究表明,Agrobacteriumtumefaciens介导转化(ATMT)的方法,可以应用到丝状真菌中。本文将从ATMT的转化原理、转化特点、转化方法以及其在丝状真菌中的主要转化实例四个方面来着重介绍A.tumefaciens介导的丝状真菌转化的最新研究进展。并对其今后的应用前景提出了展望。
- 王政逸王秋华李德葆
- 关键词：插入突变同源重组
- 农杆菌介导的稻瘟病菌转化及致病缺陷突变体筛选被引量：28
- 2006年
- 在构建了两个含有潮霉素B磷酸转移酶基因双元载体的基础上,成功地实现了农杆菌介导的稻瘟病菌转化,转化效率达每1×106个分生孢子>300个转化子,并得到了4000多个转化子。通过继代培养和PCR检测,证明插入到稻瘟病菌基因组中的潮霉素抗性基因可稳定遗传。Southern杂交分析表明,大约有2/3转化子的T-DNA插入是单拷贝的。用大麦叶片离体接种的方法快速测定部分稻瘟病菌转化子的致病性,发现一个致病缺陷突变体:A1-412。该突变体不能侵入水稻叶片及擦伤的大麦或水稻叶片,说明A1-412突变体在寄主组织中扩展进程被阻断。进一步的表型分析发现A1-412突变体的产孢量显著下降,仅为野生菌株的7%,在疏水表面不能形成附着胞,部分分生孢子萌发也略有延迟。Southern杂交显示A1-412基因组中T-DNA插入是单拷贝的。上述结果表明,A1-412突变体表型的改变可能是由于T-DNA插入而使某一具有重要生物学功能的基因失活所致。
- 刘朋娟王政逸王秋华李德葆
- 关键词：稻瘟病菌根癌农杆菌介导转化插入突变
