王晓利
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：郑州市科技局科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 5-氨基酮戊酸光动力疗法对瘢痕成纤维细胞的作用研究被引量：9
- 2017年
- 目的研究5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)对瘢痕成纤维细胞的作用及其机制,为临床运用ALA-PDT治疗瘢痕疙瘩提供理论依据。方法取人瘢痕成纤维细胞原代培养,并将生长状态无明显差异的瘢痕成纤维细胞随机分为空白对照组、磷酸盐缓冲液(PBS)组以及6个不同浓度的5-氨基酮戊酸(ALA)培养液组。每组给予635 nm发光二极管(LED)激光器照射。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测ALA-PDT对瘢痕成纤维细胞增殖的影响,并应用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和Western blot检测各组瘢痕成纤维细胞中胶原蛋白Ⅲ(CollagenⅢ)m RNA水平和蛋白表达水平。结果与空白对照组及PBS组比较,CCK-8结果表明,ALA-PDT能抑制瘢痕成纤维细胞生长,其抑制作用随着ALA浓度增加逐渐增强,当ALA浓度为0.500 mmol/L时抑制作用最明显。RT-PCR和Western blot结果表明,随着ALA浓度增大,CollagenⅢm RNA水平和蛋白表达水平逐渐下降,当ALA溶液浓度达到0.500 mmol/L时下降至最低值。结论 ALA-PDT能有效抑制瘢痕成纤维细胞增殖,抑制作用在ALA浓度为0.500 mmol/L时最强。ALA-PDT可能是通过抑制瘢痕成纤维细胞中CollagenⅢ的合成,进而抑制瘢痕疙瘩的形成。
- 朱志娟王琪影王晓利宋凤敏
- 关键词：瘢痕成纤维细胞
- RNA干扰沉默Ras同源类似物C对恶性黑色素瘤细胞侵袭转移的影响被引量：1
- 2013年
- 目的 观察靶向Ras同源类似物C（RhoC）的短发卡RNA（shRNA）质粒载体构建及RhoC基因沉默对人恶性黑色素瘤A375细胞侵袭、转移能力的影响.方法 构建3条质粒载体pGPU6/Neo-RhoC shRNA1、shRNA2和shRNA3,利用脂质体LlpofectamlneTM 2000转染A375细胞,Western blot检测转染后RhoC蛋白表达,并将最佳靶向序列质粒转染A375细胞,应用细胞黏附实验和Transwell小室细胞侵袭实验分别检测细胞黏附能力及侵袭能力.结果 构建的3条质粒载体pGPU6/Neo-RhoC shRNA1、shRNA2和shRNA3转染A375细胞后,RhoC蛋白表达水平分别为0.284 ±0.041、0.136±0.022和0.213 ±0.032,pGPU6/Neo-RhoC shRNA2为最佳靶向序列质粒；将pGPU6/Neo-RhoC shRNA2转染A375细胞,细胞对层粘连蛋白和纤维粘连蛋白的黏附能力、细胞穿膜细胞分别为0.473±0.085、0.324±0.023和50.000±14.526,较空白对照组和阴性对照组明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 利用RNAi技术成功构建pGPU6/Neo-RhoC shRNA质粒载体可显著下调体外培养的A375细胞RhoC蛋白的表达,且RhoC基因沉默后细胞的侵袭转移能力明显受到抑制.
- 王琪影王晓利刘林嶓
- 关键词：人黑色素瘤细胞RNA干扰
