王建
- 作品数:379 被引量:843H指数:12
- 供职机构:上海市动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金:上海市科技兴农重点攻关项目上海市科技兴农推广项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生环境科学与工程生物学更多>>
- 牛白血病前病毒Taqman荧光PCR检测方法的建立被引量:1
- 2014年
- 设计并合成荧光引物,建立了Taqman荧光PCR体系,可快速检测全血样品中的牛白血病前病毒DNA。所建立的荧光PCR体系可特异检测牛白血病病毒核酸,而对牛病毒性腹泻-粘膜病毒(BVDV )、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV )以及羊胎肾细胞(FLK )、牛布鲁氏菌扩增均呈阴性反应,对pBST-pol重组质粒的检测敏感性可达0.32拷贝。重复性实验的Ct值变异系数介于0.67%~1.16%之间,稳定性实验的Ct值变异系数为3.14%。采用建立的Taqman荧光PCR体系和OIE推荐的套式PCR对94份临床样品进行检测,两者定性符合率达到97.87%。
- 李凯航鞠厚斌杨显超宁昆王建
- 关键词:引物
- 绵羊感染伪狂犬病的病理学观察与病毒分离鉴定
- 为了确诊1例疑似绵羊伪狂犬病病例,以上海郊区某羊场发病绵羊的病料为研究对象进行了病理学观察、病毒分离和鉴定。病理组织学变化显示,发病羊大脑组织神经元发生广泛性变性、坏死并伴有嗜神经现象,神经元周围出现胶质细胞增生。病料接...
- 齐新永王建刘佩红刘建周锦萍鞠厚斌葛菲菲张维谊徐峰沈莉萍宁昆
- 马立克病病毒gB主要抗原决定簇融合基因的真核表达
- 2007年
- 为了合成由HA表位和串联的马立克病病毒(MDV)gB主要抗原决定簇基因所构成的融合蛋白基因,并在真核中表达,选取了MDV GA株gB 250位~460位氨基酸为目的片段,应用基因重组技术,通过一个由柔性氨基酸组成的linker,使该基因片段在体外串联,并在串联片段的前端加上HA表位,末端加上终止密码子,以形成完整的阅读框;通过测序分析证明,引入的HA表位序列以及融合基因的阅读框完全正确.将融合基因克隆入真核载体pIRES中,从而获得真核表达质粒pCMV-HAgB(L),利用脂质体将该表达质粒转染CHO细胞,通过间接免疫荧光(IFA)和RT-PCR鉴定,发现该融合基因可以在真核细胞中正确表达,为开发新型的马立克病疫苗奠定了基础.
- 葛菲菲刘佩红王建周锦萍沈莉萍徐锋孙泉云
- 关键词:真核表达马立克病病毒抗原决定簇
- 上海地区猪圆环病毒2型全基因组的克隆与序列分析
- 本研究参照国外发表的猪圆环病毒2型(PCV-2)全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,从上海地区临床病料中提取PCV-2基因组DNA,并进行PCR全基因扩增.回收PCR产物,将其插入pMD 18-T载体,并对筛选出的阳...
- 刘健鞠厚斌张维谊杨德全王建刘佩红周锦萍
- 上海地区鸽Ⅰ型副黏病毒F基因遗传进化及生物信息学分析
- 2024年
- 【目的】了解上海地区鸽Ⅰ型副黏病毒(PPMV-1)流行毒株F基因遗传变异情况,分析F蛋白生物信息学特征,为PPMV-1的防控提供技术支持。【方法】应用RT-PCR方法扩增分离株F基因,测序并进行遗传进化分析,并通过生物信息学在线软件对F蛋白结构功能进行预测分析。【结果】分离株F基因编码区全长为1662 bp,编码553个氨基酸,F蛋白裂解位点序列为112R-R-Q-K-R-F117,符合强毒株序列结构特征。系统进化树分析结果显示,分离株属于新城疫病毒(NDV)ClassⅡ群Ⅵ.2.1.1.2.2亚型,与疫苗株La Sota和Mukteswar处于不同进化分支,与国内分离株Pi/SH/CH/0617/2013和pigeon/Ningxia/2068/2016同属Ⅵ.2.1.1.2.2分支。生物信息学分析结果表明,F蛋白为亲水性蛋白,分子质量约为59.03 ku,理论等电点(PI)为7.87,半衰期为30 h,不稳定系数为35.06,脂肪系数为109.73。F蛋白主要分布在细胞质膜和内质网中,具有跨膜结构和信号肽,包含6个潜在的N-糖基化位点、13个半胱氨酸残基、103个O-糖基化位点,以及67个磷酸化位点。二级结构中α-螺旋、无规则卷曲、延伸链、β-转角分别占46.11%、31.46%、18.08%及4.34%,三级结构预测结果与二级结构相一致。B细胞抗原位点预测结果显示,F蛋白含有11个抗原表位(氨基酸数目≥7)。【结论】本研究分离获得的PPMV-1分离株属于NDV ClassⅡ群Ⅵ.2.1.1.2.2亚型,其F蛋白具有较好的抗原表位,可作为PPMV-1疫苗研制和抗病毒治疗的靶蛋白。研究结果为有效防控PPMV-1感染提供了一定的参考依据,同时也为进一步研发新型疫苗奠定了基础。
- 刘健周锦萍沈莉萍桂亚萍葛菲菲王晓旭杨显超刘佩红王建
- 关键词:F基因遗传进化生物信息学
- 一种染色缸及染色装置
- 本实用新型公开了一种染色缸及染色装置,所述染色缸包括缸体和缸盖,所述缸体包括缸口、缸身和缸底,所述缸口为圆形结构,缸底为矩形结构,所述缸口和缸底通过缸身连接,所述缸口的外壁设有外螺纹,所述缸盖为圆形缸盖,缸盖的内壁设有与...
- 齐新永张维谊王建周锦萍沈莉萍徐锋宁昆王晓旭陶田谷晟
- 上海地区犬类主要疫病血清学调查
- 2006年
- 李凯航薛霞鞠龚讷沈莉萍徐锋王建孙泉云
- 关键词:血清学调查疫病犬类人畜共患病抗体水平人口密集
- 一种测定土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱检测方法
- 本发明公开了一种测定土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱检测方法,涉及环境污染治理技术领域,包括以下步骤:S1、土壤样品筛分;S2、土壤样品提取;S3、土壤样品净化;S4、土壤样品浓缩;S5、HPLC分析:将步骤S4中装有土...
- 王建高彦征林家宝张帅
- 猪唾液样品收集装置
- 本实用新型涉及一种猪唾液样品收集装置,包括棉绳挤压袋、唾液收集管和密封盖,所述棉绳挤压袋由软挤压袋和软挤压袋内嵌螺套一体成型,并通过内嵌螺套与密封盖或唾液收集管连接;所述软挤压袋上端设有换气孔,换气孔与软挤压袋内部相通,...
- 邓波刘佩红周锦萍杨显超王建张维谊鞠厚斌李凯航葛杰杨德全吴秀娟陶军
- 文献传递
- 一种利用降解菌群复配体系降解多环芳烃的改进方法
- 本发明公开了一种利用降解菌群复配体系降解多环芳烃的改进方法,包括以下步骤:先向有机污染水中投加降解菌群,反应24h;然后再添加预复配体,继续反应至总时长为72h,降解菌群与预复配体形成复配体系,避免了预复配体对降解菌群的...
- 高彦征汤磊王建凌婉婷