潘雪
- 作品数：66 被引量：368H指数：10
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 原核表达活性内源性血管生成抑制剂canstatin蛋白被引量：1
- 2006年
- 目的构建canstatin原核表达载体,表达重组人canstatin蛋白,并验证其生物学活性。方法利用BamH Ⅰ和HindⅢ从重组质粒pUCm-T／canstatin上切下canstatin基因,插入表达质粒 pET-22b(+)相应位点,转化E.coli BL21。异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,SDS- PAGE电泳分析蛋白表达情况。超声破碎菌体,Ni-NTA柱亲和层析纯化重组蛋白,PBS对其透析复性。鸡胚尿囊膜(CAM)实验验证目的蛋白抗血管生成活性。结果重组质粒pUCm-T／canstatin在 BamHⅠ和HindⅢ双酶切后,电泳证实切下目的基因canstatin cDNA,将其插入质粒pET-22b(+)相应位点,转化E.coli BL21后,琼脂板上生长出多个白色菌落。挑选7个白色菌落做BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切,所有菌落均切出分别对应原质粒与目的基因的2条特异性条带,证实均为阳性克隆。IPTG 诱导其中1个克隆表达蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明在相对分子质量24 000左右出现新的蛋白表达条带,诱导后1、2、3、4 h表达蛋白占菌体总蛋白百分比分别为18．2％、18．8％、23．0％和23．4％。Ni- NTA柱亲和层析后,在125、250mmol／L洗脱液中纯化出目的蛋白。CAM实验显示重组人canstatin 蛋白能抑制新生血管形成,且与剂量呈正相关。结论成功构建了canstatin原核表达载体,表达并纯化出有活性的重组人canstatin蛋白,为进一步研究其临床应用打下基础。
- 李兆申何小平屠振兴高军潘雪龚燕芳金晶
- 关键词：血管生成抑制剂
- 胰腺外分泌功能检查的临床应用被引量：6
- 2005年
- 胰腺外分泌功能检查是从生理角度研究和诊断胰腺疾病的方法,可分为直接胰腺外分泌功能试验和间接胰腺外分泌功能试验.目前有多种胰腺外分泌功能检查的方法应用于临床.临床医生需要选择合适的检查手段来诊断慢性胰腺炎及其他胰腺疾病,判断胰腺功能不全的程度及判断预后.在重度慢性胰腺炎中,几乎所有的胰腺分泌功能检测都是准确的,而在轻、中度慢性胰腺炎诊断中,多数间接胰腺功能检查的平均敏感性低于50%,并且这些检查多数都需要多重步骤,包括水解、吸收、新陈代谢和呼出,在许多情况下都可能出现假阳性.因此目前对于轻中度慢性胰腺炎诊断,传统的直接胰腺功能检测仍然是最实用的高敏感性试验.
- 潘雪李兆申
- 关键词：胰腺疾病预后
- 人canstatin基因克隆及其重组蛋白的表达和纯化被引量：1
- 2005年
- 目的克隆人血管能抑素canstatin基因,构建其原核表达载体,表达并纯化出canstatin蛋白。方法从人胎盘组织中提取总RNA,经RTPCR扩增出canstatin基因,克隆进质粒pUCmT,将测序正确的目的基因片段插入质粒pET22b(+)相应位点,转化E.coliBL21,IPTG诱导蛋白表达。超声破碎菌体,NiNTA柱亲和层析纯化重组蛋白。结果从人胎盘组织中提取总RNA,显示3条清晰条带,分别对应28S,18S,5S,分光光度计法测得总RNA浓度为1.8g/L;RTPCR扩增出与预期目的基因canstatin长度一致的cDNA片段;构建出克隆质粒pUCmT/canstatin,基因测序结果与GenBank公布的canstatin基因序列完全一致;构建出表达质粒pET22b(+)/canstatin,BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定证实构建正确;IPTG诱导蛋白表达,SDSPAGE电泳分析表明在相对分子质量24kD左右出现新的蛋白表达条带,诱导后1h、2h、3h、4h表达蛋白占菌体总蛋白的百分比分别为18.2%、18.8%、23.0%和23.4%;诱导3h的菌体超声破碎后,Ni柱亲和层析,125、250mmol/L咪唑洗脱液SDSPAGE电泳显示出清晰的单一条带。结论成功克隆出canstatin基因,成功构建了其原核表达载体,并且成功表达、纯化出canstatin蛋白,为进一步研究其临床应用打下基础。
- 何小平李兆申屠振兴高军潘雪龚燕芳金晶
- 关键词：基因克隆蛋白纯化
- 奥曲肽预防ERCP术后胰腺炎及高淀粉酶血症的多中心随机对照临床研究被引量：65
- 2004年
- 目的 探讨奥曲肽预防ERCP术后胰腺炎和高淀粉酶血症的临床疗效和安全性。方法 研究在国内12个中心同时进行,拟行ERCP诊断和治疗的患者进入研究,并随机分为2组。奥曲肽组:0.3 mg奥曲肽加入500 ml生理盐水中,于ERCP术前1 h开始静脉滴注并持续6 h,输注停止后6 h和12 h再分别给予奥曲肽0.1 mg皮下注射各1次。对照组则给予安慰剂(生理盐水)行静脉滴注,但不进行皮下注射。结果 共有961例ERCP患者入选,其中129例患者不符合要求而被剔除,最后832例患者纳入统计,其中奥曲肽组414例,对照组418例。急性胰腺炎总的发生率为3.85％,其中奥曲肽组为2.42％(10/414),对照组为5.26％(22/418)(P=0.026)。高淀粉酶血症总发生率为14.9％,奥曲肽组为12.32％(51/414),对照组为17.46％(73/418)(P=0.041);两组基础数据如年龄、操作过程(诊断和治疗)、造影剂的使用量、胰胆管显影次数等基本相似(P>0.05),未发生与奥曲肽相关的不良反应。结论 奥曲肽对ERCP术后胰腺炎和高淀粉酶血症均有预防作用。
- 李兆申张文俊潘雪龚彪智发朝郭学刚李培明范志宁孙文生沈云志麻树人谢渭芬陈旻湖李延青
- 关键词：奥曲肽ERCP高淀粉酶血症胰腺炎术后
- 胰腺癌中血管形成因子和细胞黏附分子的表达研究
- 目的:探讨CD34和血管内皮生长因子(VEGF)、细胞间黏附分子(ICAM-1)在胰腺癌(Pancreatic adenocarcinoma PAC)组织、慢性胰腺炎组织(Chronic Pancreatitis CP)...
- 潘雪
- 文献传递
- 慢性胰腺炎致胰性脑病一例
- 2002年
- 临床资料女性,33岁,住院号:447329,2月前无明显诱因出现上腹疼痛,无放射痛,进食后明显加重,无恶心、呕吐,无腹泻,无寒战、发热.查血淀粉酶1 000 U/L,对症治疗后症状消失,进食后又出现上腹疼痛,并向后背部放射.CT示慢性胰腺炎,胰管扩张.为进一步治疗于2002年7月24日收入我科.作者单位:200433 上海。
- 卞琦潘雪
- 关键词：并发症症状病例慢性胰腺炎胰性脑病
- 慢性胰腺炎患者粪弹力蛋白酶检测的临床价值
- 目的:探讨粪弹力蛋白酶(E1)试验对慢性胰腺炎患者胰腺外分泌功能检测的临床应用价值。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对55例慢性胰腺炎、25例非胰腺消化系疾病患者进行了El的检测,并同时与尿BT-PABA检测...
- 李兆申潘雪许国铭方裕强龚燕芳
- 文献传递
- 非甾体抗炎药致消化性溃疡出血的特征及开支分析
- 2002年
- 李军婷李兆申徐晓蓉潘雪苏暾
- 关键词：非甾体抗炎药药物不良反应消化性溃疡出血病例
- CD/5-FC系统对胰腺癌裸鼠移植瘤的抗血管形成作用的初步探讨
- 本研究应用腺病毒为载体将CD基因原位转导入裸鼠胰腺癌组织中,并予腹腔注射前药5-FC,观察CD/5-FC系统有否抗胰腺癌血管形成作用。构建含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase,CD)基因的腺病毒穿...
- 潘雪
- 文献传递
- 腺病毒介导自杀基因治疗胰腺癌实验研究
- 自杀基因治疗是一种应用于人类肿瘤的新的化疗措施,本研究将CD基因转入胰腺癌组织中,通过CD基因转换作用使前药特异杀伤肿瘤组织细胞,以探索有效的胰腺癌辅助治疗手段。构建含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(cytosine deamin...
- 潘雪
- 文献传递
