林映莹
- 作品数:31 被引量:35H指数:3
- 供职机构:海南医学院更多>>
- 发文基金:海南省自然科学基金国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 细菌化肿瘤细胞疫苗及其制备方法
- 本发明公布了一种细菌化肿瘤细胞疫苗及其制备方法。将对数生长期细菌裂解获得细菌裂解物;将过量的含有氨基的化合物溶液和细菌裂解物溶液混匀,在1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)的作用下,细菌蛋白上的羧基与乙二...
- 谭光宏黄风迎张立明吕卓璇林映莹
- 文献传递
- 弓形虫ROP18基因原核表达载体的构建及表达被引量:10
- 2013年
- 目的采用PCR方法从刚地弓形虫RH株基因组DNA中扩增弓形虫ROP18基因,构建原核表达载体pET-ROP18,并检测融合蛋白ROP18的免疫反应原性。方法采用PCR技术扩增弓形虫ROP18基因,将其插入原核表达载体pET-28a中,构建原核表达质粒pET-ROP18,PCR和双酶切鉴定正确的重组质粒pET-ROP18转入大肠埃希菌BL21中,在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下表达融合蛋白,诱导产物裂解后进行SDS-PAGE电泳,观察重组蛋白的诱导表达情况,Western blot分析重组蛋白的反应原性。结果以弓形虫基因组DNA为模板,PCR扩增出约1.6kb的ROP18基因片段。将其定向插入原核表达载体pET-28a,构建原核表达质粒pET-ROP18,经PCR和双酶切鉴定后测序,显示重组质粒包含ROP18蛋白基因读码框内的完整序列,能完整表达ROP18抗原蛋白。重组质粒转化菌经IPTG诱导后表达分子质量单位约63ku的融合蛋白,以37℃1mmol/L IPTG诱导4h表达量最大。Western blot分析重组蛋白能被鼠抗弓形虫血清识别。结论成功构建了原核表达载pET-ROP18,重组蛋白ROP18具有免疫反应原性。
- 赵焕阁韦祎黄用豪梁丽娟林映莹谭光宏
- 关键词:弓形虫原核表达
- 小型化Endoglin抗体与阿霉素的偶联物及其制备方法
- 本发明提供小型化Endoglin抗体与阿霉素的偶联物及其制备方法,偶联物为Fab-ADM;Fab与ADM的分子比为1∶2。制备方法包括(1)、选用N-羟基琥珀酰亚胺基-间-(N-马来酰亚胺基)苯甲酸酯(MBS)作为交联剂...
- 王华谭光宏黄风迎周松林黄用豪郭峻莉赵焕阁林映莹
- 文献传递
- 打破免疫耐受生物治疗肿瘤和哮喘研究
- 谭光宏黄风迎蒋洁王华黄用豪赵焕阁周松林林映莹郑少江
- 该项目属于免疫生物治疗领域。免疫系统对肿瘤细胞抗原分子和哮喘炎症分子呈免疫耐受状态。打破免疫系统对这些治疗靶分子的免疫耐受就可治疗肿瘤和哮喘。主要内容和结果:利用Ag43细菌表面展示技术制备Ag43嵌合重组蛋白疫苗打破治...
- 关键词:
- 关键词:肿瘤治疗哮喘免疫生物治疗
- 鱼泡草总黄酮治疗特应性皮炎的研究
- 2015年
- 目的研究海南鱼泡草总黄酮(total flavonoids of Jussiaea repens,TFJ)对小鼠慢性皮炎的治疗作用。方法用不同浓度二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzene,DNCB)反复刺激昆明小鼠皮肤致敏后,灌胃给药不同剂量的TFJ。再通过H&E染色检测皮肤组织病理学变化,ELISA检测血清总Ig E和IL-2含量变化,RT-PCR检测皮肤细胞因子Eotaxin-1/CCL11和LARC/CCL20的m RNA表达。结果通过TFJ和氢化可的松治疗后,TFJ能减轻鼠耳肿胀度,减少肥大细胞数及浸润炎症细胞数,并且能降低小鼠血清中升高的Ig E水平、升高血清中降低的IL-2水平,同时降低趋化因子配体基因Eotaxin-1/CCL11和LARC/CCL20的m RNA表达。结论 TFJ能有效抑制小鼠慢性皮炎。
- 周松林赵焕阁林映莹黄用豪
- 关键词:特应性皮炎小鼠
- 小鼠VCAM-1真核表达质粒的构建及表达被引量:1
- 2007年
- 目的:构建小鼠血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)基因真核表达质粒,了解该质粒是否能在真核细胞中有效表达。方法:以小鼠胚肝组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠VCAM-1全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的cDNA片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcDNA-mVCAM,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体转染技术转染CHO细胞,用Western Blot鉴定该质粒是否能够在真核细胞中表达相应的目的蛋白质。结果:成功扩增了小鼠VCAM-1全长基因cDNA,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA-mVCAM,West-ern Blot方法证实该质粒能在CHO真核细胞中正确表达目的蛋白。结论:成功构建了小鼠VCAM-1基因的真核表达质粒载体,为进一步研究VCAM-1的新功能和免疫治疗奠定了基础。
- 谭光宏宿静梅黄风迎王华黄用豪林映莹
- 关键词:血管细胞粘附分子-1真核表达质粒基因工程
- FITC标记葡聚糖粘附定量测定肿瘤组织血管密度被引量:3
- 2007年
- 目的:测定肿瘤组织异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran)粘附水平是否可作为肿瘤血管密度的量化指标。方法:用endolgin疫苗免疫小鼠后,在同一只小鼠上同时建立小鼠Meth A纤维肉瘤模型和藻酸盐包被肿瘤细胞试验模型,2周后将FITC-dextran注射入小鼠体内,然后手术完整摘取肿瘤组织和藻酸盐颗粒,取部分肿瘤组织进行免疫组化检测血管密度的同时,将其他组织和藻酸盐颗粒匀桨并离心,取上清检测荧光强度,分析二者之间是否存在直线相关关系。结果:免疫组化和肉眼观察显示2种测定方法均有明显的血管生成效应,用FITC-dextran粘附测定肿瘤组织血管相对密度和藻酸盐包被试验均能较好地量化测定抗血管生成效果,直线相关分析表示二者的疫苗免疫实验组FITC-dextran的测定值之间呈明显的正性相关关系(r=0.962,P<0.01)。结论:和藻酸盐包被试验相比,FITC-dextran测定肿瘤组织血管相对密度是一种简单有效的量化测定肿瘤组织血管生成水平的方法。
- 谭光宏黄风迎王华黄用豪林映莹黎岳南
- 关键词:肿瘤血管动物模型
- 一种硫化钌纳米点及其制备方法
- 本发明公开了一种硫化钌纳米点及其制备方法,属于无机纳米材料制备领域。其制备方法包括:1)制备二乙基二硫代氨基甲酸钌;2)将二乙基二硫代氨基甲酸钌用乙醇溶解制成1%-5%g/mL的溶液,加入其溶液体积1-3倍的油酸,搅拌混...
- 吕卓璇张立明黄风迎谭光宏周松林赵焕阁林映莹
- 文献传递
- 伯氏疟原虫抗原基因高效植物表达载体的构建
- 2010年
- 目的构建果实特异启动子驱动的含伯氏疟原虫裂殖子表面蛋白PbMSP4/5(Plasmodium berghei merozoitesurface protein4/5)基因的植物表达载体,并进一步提高抗原基因的表达量和免疫原性,为研制有效的转基因植物疟疾疫苗打下基础。方法分别以提取的番茄和伯氏疟原虫Anka株的基因组DNA为模板,扩增番茄果实特异表达启动子E8的核心序列(约1.11Kb)及PbMSP4/5基因(704bp),并通过重叠区扩增基因拼接法(Gene splicing by overlap extension,SOE)PCR将二者拼接,拼接后的序列为EM,并合成霍乱毒素B亚基基因CTB,共同构建重组质粒pCAMBIA1302-EM-CTB,电击法转化根癌农杆菌GV3103。结果重组质粒经酶切鉴定证明已成功转化。结论实验成功构建了以番茄果实特异启动子驱动PbMSP4/5基因、以CTB为黏膜免疫佐剂的高效植物表达载体。
- 王华谭光宏黄风迎黄用豪周松林赵焕阁林映莹
- 关键词:疟疾CTB
- 不同纯度的有机溶剂对2株肿瘤细胞的抑制作用被引量:1
- 2015年
- 目的给脂溶性的抗肿瘤药物筛选高溶解性、低细胞毒性的有机溶剂。方法采用MTT法,按照不同纯度,对8种能溶于水的有机溶剂,测试其对黑色素瘤B16、人胃癌细胞SGC-7901两种细胞株的细胞毒性。结果不同有机溶剂对不同细胞株的抑制皆不同,甲醇与丙酮对两种细胞株的毒性相对都较弱,纯度越高的有机溶剂对细胞毒害越小。结论光谱纯的甲醇与丙酮是脂溶性抗肿瘤药物有效的有机溶剂。
- 周松林林映莹赵焕阁黄用豪
- 关键词:MTT细胞毒性有机溶剂纯度