李铭华
- 作品数：29 被引量：166H指数：8
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：中美新发和再发传染病合作项目国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 2006年河南省南阳市流行性乙型脑炎病毒的分离与分子特征分析被引量：3
- 2010年
- 目的在河南省南阳市采集蚊虫标本,进行西尼罗病毒基因检测,分离流行性乙型脑炎(乙脑)病毒并分析分离株的分子生物学特征。方法 2006年从南阳市采集蚊虫标本,将标本研磨处理后进行巢式PCR检测西尼罗病毒核酸,用细胞培养法对标本进行病毒分离,通过血清学与分子生物学方法鉴定新分离到的乙脑病毒,扩增分离株PrM和E基因区,使用生物学软件进行序列和系统发生分析。结果共采集蚊虫标本6231只,巢式PCR检测西尼罗病毒结果均为阴性。从标本中分离到7株病毒,经鉴定均为乙脑病毒。基因分型显示7株病毒均为基因Ⅰ型,新分离株在E基因之间的核苷酸同源性为98.5%～100%,氨基酸同源性为98.4%～100%。新分离株与P3株和SA14-14-2的E基因核苷酸同源性分别为87.7%～88.2%和87.3%～87.9%。新分离株与P3株相比存在10个共同氨基酸差异位点,但在决定毒力的关键位点不同于SA14-14-2。结论河南省南阳市2006年乙脑病毒流行株为基因Ⅰ型,毒株的毒力基因没有明显改变,所有标本均未检测到西尼罗病毒阳性。
- 付士红翟友刚郝宗宇张彦平王焕琴何英李铭华李幸乐唐晓燕曹玉玺高晓艳王环宇冯云梁国栋
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒西尼罗病毒E基因
- 我国山西、甘肃和江西三省虫媒病毒分离鉴定
- 虫媒病毒是指通过吸血节肢动物叮咬敏感的脊椎动物而传播疾病的一类病毒,目前国际上已经发现500余种虫媒病毒,其中有100多种与人畜疾病关系密切,感染后可表现为发热、出疹、关节炎、出血和脑膜脑炎,严重的可以引起死亡。许多新发...
- 李铭华
- 关键词：虫媒病毒版纳病毒乙脑病毒种系发生
- 文献传递
- 三峡库区仔猪血清流行性乙型脑炎病毒抗体调查被引量：9
- 2010年
- 目的掌握三峡库区监测哨点仔猪中流行性乙型脑炎(乙脑)病毒IgG抗体达到50%的时间段,为当地乙脑的防控提供理论依据。方法在三峡库区的湖北省秭归县、重庆市万州区、涪陵区和渝北区共4个监测点采集仔猪血清,采用酶联免疫吸附试验检测仔猪血清乙脑病毒IgG抗体,采用间接免疫荧光法检测仔猪血清乙脑病毒IgM抗体。应用SPSS12.0统计软件进行统计学分析。结果4个监测点中,重庆市万州区和渝北区仔猪在5月初感染乙脑病毒,5月中旬乙脑病毒IgG抗体阳性率达到50%以上;重庆市涪陵区、湖北省秭归县仔猪在5月下旬感染乙脑病毒,6月中旬达到50%以上。其中猪场中的仔猪乙脑病毒抗体阳性率高于散养猪(χ2=43.797,P<0.05)。结论三峡库区监测点仔猪乙脑病毒IgG抗体50%阳转时间出现在5月中旬到6月中旬之间。
- 姜红月付士红李培龙苏培学张秀华罗超向宇洪晓军李铭华毛德强李洪王环宇张静王子军王志玉梁国栋
- 关键词：三峡库区仔猪血清乙型脑炎病毒
- 2009年江西省新分离流行性乙型脑炎病毒株全基因组分子生物学特性研究被引量：2
- 2010年
- 目的对2009年分离自江西省蚊虫标本的流行性乙型脑炎(乙脑)病毒JX0939株进行全基因组序列测定,分析其基因组特征。方法使用针对乙脑病毒全基因组测序引物进行PCR扩增基因组片段,PCR产物直接测序,拼接后获得全基因组序列。利用生物信息学软件进行核苷酸序列及氨基酸序列分析和病毒的系统进化分析。结果新分离乙脑病毒JX0939株基因组全长10965个核苷酸,从97位到10392位,共10296个核苷酸编码一个开放阅读框,编码3432个氨基酸。与GenBank中登录的所有59株乙脑病毒全基因组序列比较发现,其核苷酸总体差异率为1%～17%,氨基酸总体差异率为0.1～5%。与目前使用的减毒活疫苗株SA-14-14-2株相比较,只有88%的核苷酸同源性,全基因组共存在1237个核苷酸差异,83个氨基酸差异。提取GenBank登录的及本实验室测定的不同省份的乙脑病毒全基因组序列,进行全基因组序列系统进化分析显示JX0939株属于基因1型乙脑病毒。结论新分离的乙脑病毒JX0939株属于基因1型,与2007年中国分离株SH17M-07进化关系最接近,与疫苗株SA-14-14-2相比关键位点氨基酸未见变异。
- 王力华李铭华付士红姜红月陈维欣唐松戴新平应彩霞詹漫华施勇梁国栋
- 关键词：乙型脑炎病毒全基因组系统进化分析
- 2007年山西省部分地区虫媒病毒调查被引量：4
- 2009年
- 目的调查山西省部分地区的虫媒病毒，在当地采集蚊虫标本进行病毒的分离与鉴定。方法2007年7月和8月在当地采集蚊虫标本，通过组织细胞培养进行病毒分离，利用分子生物学和生物信息学技术对病毒分离物进行鉴定与分析。结果分离到10株病毒分离物，鉴定结果显示分离株SX0765、SX0766、SX0767、SX0771、SX0789、SX0790、SX0793、SX0794、SX0795、SX0796均为版纳病毒；此外，分离株SX0771和SX0794还同时存在辽宁病毒基因。进一步分析显示版纳病毒新分离株与此前在北京、云南和辽宁分离到的病毒株之间存在明显差异，同源性在89．7％～94．1％之间。结论在山西省分离到10株版纳病毒和两株辽宁病毒，版纳病毒与我国其他地区分离株有明显差异，在进化上相对独立。
- 李铭华孟维珊付士红程景侠赵俊英孔祥盛代培芳梁国栋
- 关键词：虫媒病毒种系发生
- 西藏林芝地区蚊媒初步调查研究被引量：21
- 2010年
- 目的确定西藏林芝地区墨脱县及米林县流行性乙型脑炎(乙脑)传播媒介三带喙库蚊存在与否,为制定针对性防制措施提供依据;了解林芝地区的媒介蚊虫种类、数量及其分布状况。方法采用诱蚊灯法、人帐诱法和人工捕捉法进行调查。结果在墨脱县发现三带喙库蚊,且该蚊密度相对比较高;墨脱县的优势蚊种为三带喙库蚊和多斑按蚊。米林县未发现三带喙库蚊分布,该地区的优势蚊种为米塞按蚊。结论西藏林芝地区墨脱县存在乙脑的传播媒介,该蚊种为该地区的新纪录;且该蚊种尚未扩散至米林县。
- 郭玉红刘起勇尹遵栋王静林李艺星达瓦李贵昌王君宁桂军罗会明李铭华顿珠多吉.崔科王环宇梁国栋冶秀敏胡松林徐慧梅卓玛央金桑丹拉姆白菊
- 关键词：流行性乙型脑炎三带喙库蚊
- 青海省凶小库蚊辽宁病毒的分离鉴定被引量：4
- 2014年
- 目的对青海省蚊虫标本中新分离的QH07130病毒株进行系统鉴定分析。方法采用血清学和分子生物学方法对QH07130病毒进行鉴定,并对该病毒进行系统进化特征分析。结果 QH07130病毒株对C6/36细胞产生明显细胞病变;间接免疫荧光试验显示,QH07130病毒株与辽宁病毒(LNV)单克隆抗体呈现阳性反应。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,QH07130病毒为12条带双链RNA病毒,与LNV的6-5-1带型一致。该病毒第10节段序列测定全长为844 bp,与LNV SX0771和NE9712株核苷酸同源性分别为99.5%和98.0%;系统进化分析显示,QH07130病毒位于LNV进化分支内,并且与LNV SX0771和NE9712株的进化关系最近,确认QH07130病毒为LNV。结论青海省蚊虫中存在LNV传播,这是首次在位于青藏高原的青海省分离到该病毒。
- 李文娟李铭华王静林吕志曹玉玺王志玉梁国栋
- 关键词：进化分析
- 江西省流行性乙型脑炎病毒的分离与鉴定被引量：4
- 2012年
- 目的调查江西省的虫媒病毒分布状况,在当地采集蚊虫标本进行病毒分离与鉴定。方法 2008-2009年夏季在江西省共选择8个标本采集点,使用诱蚊灯采集蚊虫标本,通过组织培养法分离病毒,并对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定;利用生物信息学技术对新分离病毒的序列进行分析,完成同源性和系统发生分析。结果 2008年采集到3属3种共计11916只蚊虫标本;2009年采集到4属5种共计5905只蚊虫标本;共分离到4株病毒,经鉴定均为流行性乙型脑炎(乙脑)病毒;新分离乙脑病毒与基因Ⅰ型乙脑病毒的同源性最高,系统进化结果显示,4株乙脑病毒均属于基因Ⅰ型。结论在江西省分离到基因Ⅰ型乙脑病毒,与上海市和浙江省分离株进化关系较近。
- 李铭华付士红姜红月陈维欣唐松施勇梁国栋
- 关键词：虫媒病毒流行性乙型脑炎病毒种系发生
- 云南省文山中越边境地区虫媒病毒调查被引量：6
- 2009年
- 目的 对云南省文山县、河口县等中越边境地区开展虫媒病毒调查，以期了解当地蚊虫携带虫媒病毒情况。方法2007年9月在当地5个采集点共采集蚊虫8326只，包括库蚊6091只，中华按蚊1334只，刺扰伊蚊848只，阿蚊53只，并保存于液氮。经消毒、研磨、离心等处理后进行组织培养细胞接种，分离病毒和对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定，以软件进行病毒的核苷酸序列比对和系统发生分析。结果从库蚊分离到4株对C6／36细胞致病变的病毒分离物，其他蚊种没有分离到病毒分离物。鉴定结果表明，标本WS0704-2与版纳病毒抗体反应，PCR鉴定为版纳病毒，该病毒基因组第12片段的进化关系同中国其他版纳病毒有明显差异，位于一条独立的进化枝中，在进化上相对独立。标本WS0704—1、WS0708—1、WS0708-2为浓核病毒。结论云南省文山中越边境地区存在多种蚊虫媒介并携带版纳病毒等虫媒病毒。
- 周涛张海林李铭华王静林付士红冯云梁国栋
- 关键词：虫媒病毒
- 我国新分离乙脑病毒02-76株的全基因序列特征被引量：11
- 2006年
- 目的对我国新分离乙脑病毒02-76株进行全基因序列测定和分析，了解乙脑病毒基因组结构及毒力特性。方法设计乙脑病毒全基因组扩增引物，RT-PCR扩增片段，PCR产物直接测序，拼接后获得全基因序列。通过Clustal X（1．8）、DNASTAR、GENEDOC（3．2）等生物学软件进行核苷酸序列及氨基酸序列分析和病毒的系统进化分析。结果新分离乙脑病毒02．76株全基因组全长10977个核苷酸，从96位到10391位，共10296个核苷酸编码一个开放阅读框，编码3432个氨基酸。与我国1949年分离的Beijing-1株相比较共存在248个核苷酸差异，16个氨基酸差异。与GenBank中选择的29株乙脑病毒全基因序列比较发现，其核苷酸总体差异率为0．6％-15．1％，氨基酸总体差异率为0．2％-4．6％。通过PrM／C区段、E区段、3’NTR区段及全基因序列进行系统进化分析均显示该毒株属于基因3型乙脑病毒。结论新分离的乙脑病毒02-76株属于基因3型，与中国分离株SA-14进化关系最接近。
- 王环宇潘晓玲付士红王雷李铭华Ichiro Kurane梁国栋
- 关键词：脑炎病毒基因种系发生
