李琴
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:南昌大学生命科学学院生物科学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江西省重点科技攻关项目江西省研究生创新基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学经济管理更多>>
- 鲫鱼PKZ Zα结构域与d(GC)、d(TA)重组质粒的结合被引量:1
- 2009年
- Zα是能够特异性识别并结合左旋DNA(Z-DNA)的蛋白结构域,首先在人ADAR1中鉴定,随后又在ZBP-1(DLM-1)和E3L等蛋白质中发现了该结构域.鲫鱼PKZ是首次报道的具有Zα结构域的鱼类eIF2α激酶.为深入了解鲫鱼PKZZα的功能,原核表达并亲和层析纯化了3种多肽,即野生型PZα(Zα1Zα2)、替换型P(Zα1)2(Zα1Zα1)和点突变型(PZαK34A、PZαS35A、PZαR39A、PZαP57A).同时,构建了含有d(GC)6、d(GC)13、d(TA)13特殊插入序列的3种重组质粒,用于体外模拟Z-DNA.凝胶阻滞实验分析了3种多肽分别与重组质粒的亲和性.结果表明,PZα和P(Zα1)2能够与d(GC)重组质粒结合,并且随着多肽含量的增加,阻滞效应越明显.与野生型PZα相比,替换型P(Zα1)2结合d(GC)重组质粒的能力更强.PZα和P(Zα1)2还能微弱地与d(TA)13重组质粒结合.点突变型多肽都不能与重组质粒结合,暗示鲫鱼PKZZα结构域中这4个氨基酸残基在结合核酸分子的过程中非常关键.该文结果有利于进一步揭示鱼类PKZZα结构域与Z-DNA结合的分子机理.
- 杨攀吴初新李琴夏玉洁胡成钰
- 关键词:鲫鱼重组质粒
- 体外表达鲫鱼PKR-like(PKZ)Zα多肽与d(GC)、d(TA)重组质粒亲和性分析
- 为分析鲫鱼PKR-like Zα结构域与d(GC)、d(TA)重组质粒的亲和性以及了解Zα结构域中参与核酸结合的关键氨基酸残基。本文体外表达了3种多肽,分别为野生P(Zα1Zα2)、替换型P(Zα1Zα1)和4个点突变体...
- 杨攀吴初新李琴夏玉洁胡成钰
- 关键词:鲫鱼
- 文献传递
- 草鱼胶原凝集素基因的克隆及其功能分析被引量:1
- 2010年
- 从草鱼Ctenopharyngodon idella肝肾cDNA文库中克隆得到胶原凝集素基因。草鱼胶原凝集素全长cDNA为1128bp,其中5′非编码区229bp,3′非翻译区104bp,最大开放阅读框为795bp,编码264个氨基酸。系统进化分析表明草鱼胶原凝集素与斑马鱼的亲缘关系最近。根据草鱼胶原凝集素序列特征,克隆了包含糖基识别域(CRD)的cDNA,并进行原核表达、纯化获得其重组蛋白PCRD。进行PCRD与6种细菌的凝集和糖抑制实验,结果表明半乳糖、葡萄糖、甘露糖和麦芽糖4种糖都会使PCRD与嗜水气单胞菌的凝集明显下降甚至极大地干扰凝集;麦芽糖使金黄色葡萄球菌的凝集明显下降,而肽聚糖和甘露糖会使凝集受到抑制;此外,PCRD的凝集反应不依赖Ca2+。
- 李琴马梅生胡成钰
- 关键词:草鱼