朱祖怀
- 作品数:6 被引量:99H指数:3
- 供职机构:上海市普陀区人民医院更多>>
- 发文基金:上海市普陀区卫生系统自主创新科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 2012年上海地区细菌耐药性监测被引量:51
- 2013年
- 目的了解2012年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法(K-B法)对上海地区29所医院的临床分离菌进行药敏试验,其中包括17所三级医院和12所二级医院。采用CLSI 2012年版标准判断结果。结果总计76 407株临床分离菌,革兰阳性菌占26.6%,革兰阴性菌占73.4%。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的平均检出率分别为52.1%和77.0%。MRSA和MRCNS在二级医院和三级医院的平均检出率分别为67.3%、82.9%和48.3%、76.1%。葡萄球菌属中未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。685株儿童非脑膜炎分离株中青霉素敏感、中介和耐药肺炎链球菌(PSSP、PISP和PRSP)的检出率分别为72.7%、13.7%和13.6%,75株成人分离株的检出率分别为92.0%、5.3%和2.7%。发现万古霉素耐药屎肠球菌26株、粪肠球菌3株。首次在二级医院中发现万古霉素耐药粪肠球菌2株、屎肠球菌4株。根据表型推测,多数万古霉素耐药肠球菌(VRE)为VanA基因型。大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中产ESBLs的检出率分别为60.1%、35.8%和38.9%。上述3种细菌中的ESBLs菌株的检出率在二级医院和三级医院的检出率分别为65.6%、32.5%、51.5%和58.7%、36.6%、32.8%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率分别为6.1%和4.1%。铜绿假单胞菌、不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为28.4%、23.2%和50.6%、55.1%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中有少数菌株对所有测试药物耐药的泛耐药株(替加环素和多黏菌素未测)。分离自尿液标本中的肠球菌属细菌和大肠埃希菌对磷霉素的耐药率低。结论细菌耐药性仍对临床构成严重威胁,尤其是二级医院中某些细菌的耐药率高于三级医院,应引起严重关注。
- 朱德妹汪复郭燕杨洋蒋晓飞王传清王爱敏刘瑛陈峰倪语星孙景勇王靖李虎汤瑾王坚镪应春妹汪雅萍张泓孔菁魏丽王金铎袁应华刘妍胡必杰黄声雷陈险峰殷杏刘庆中汤荣袁轶群武楠傅启华黄卫春
- 关键词:细菌耐药性抗菌药物药敏试验泛耐药菌
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a的真核表达及其在抗体鉴定中的应用
- 2012年
- 目的利用杆状病毒表达系统表达耐甲氧西林金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白2a(PBP2a)。方法用EcoRI和BamHI双酶切pGEMT-meeA重组质粒DNA,回收目的基因mecA,与pFastBacl质粒连接转化入含有穿梭载体bacmid的大肠埃希菌DHl0Bac中,筛选重组穿梭载体Bacmid-mecA并转染Sf9细胞,获取完整的重组杆状病毒。用免疫荧光(IFA),Westernblot法进行蛋白鉴定。结果成功地获得含mecA基因的重组杆状病毒。杆状病毒感染Sf9细胞形态变化明显,能够表达出与PBP2a多克隆抗体相结合的蛋白。结论利用Bac—to—Bac杆状病毒表达系统成功地表达了PBP2a蛋白。
- 邹玉涵朱祖怀闫佩毅朱元黄德魁朱晴晖金姝
- 关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白2A真核表达
- 2014年上海市细菌耐药性监测被引量:27
- 2016年
- 目的了解2014年上海市细菌耐药性监测情况。方法采用纸片扩散法(K-B法)或自动化仪器法对上海市40所医院的临床分离菌进行药敏试验。包括28所三级医院和12所二级医院,其中含3所儿童医院。采用CLSI 2014年版标准判断结果。结果总计102 113株临床分离菌,革兰阳性菌27 482株,占26.9%;革兰阴性菌74 631株,占73.1%。MRSA和MRCNS的检出率分别为47.4%和79.8%。MRSA、MRCNS在二级医院和三级医院的平均检出率分别为51.1%、79.9%和46.6%、79.8%。葡萄球菌属中未发现万古霉素和替考拉宁耐药株。845株儿童非脑膜炎分离株中青霉素敏感(PSSP)、中介(PISP)和耐药(PRSP)株的检出率分别为70.1%、14.6%和15.4%;167株成人分离株的PSSP、PISP和PRSP分别为97.6%、1.2%和1.2%。发现67株屎肠球菌和14株粪肠球菌耐万古霉素。根据PCR测序,多数万古霉素耐药肠球菌为van A和van M基因型。大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中ESBL的检出率分别为59.4%、35.9%和30.1%。上述ESBL菌株在二级医院和三级医院的检出率分别为61.6%、31.6%、35.0%和58.9%、36.9%、29.5%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率均为7.0%。鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌中有少数对所有测试药物耐药的广泛耐药株。分离自尿液标本中的肠球菌属和大肠埃希菌对磷霉素的耐药率低。结论细菌耐药性仍对临床构成严重威胁,临床需合理规范应用抗菌药物,避免耐药株的广泛传播。
- 郭燕杨洋朱德妹胡付品汪复蒋晓飞吉强周军王传清王爱敏应春妹高晶方毅庞立峰袁轶群叶琴胡必杰黄声雷魏丽王金铎王靖李虎陈险峰殷杏汤瑾刘庆中汤荣张泓王春孙康德虞中敏瞿跃红周华敏吴琼傅启华黄卫春李敏
- 关键词:细菌耐药性监测药敏试验广泛耐药
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a的原核表达及多克隆抗体的制备被引量:3
- 2012年
- 目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)的原核表达,及PBP2a多克隆抗体的制备。方法根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了1对寡核苷酸引物,应用PCR法从MRSA基因组中获得编码PBP2a全长的DNA,将此目的基因片段克隆至pET32a(+)载体,转化E.coliBL21(DE3);经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,利用Ni2+亲和层析技术纯化目的蛋白;用目的蛋白免疫小鼠3~8次后,收获血清并鉴定。结果成功构建了PBP2a原核表达载体,并获得了高效表达;利用纯化的蛋白制备了理想的多克隆抗体。结论利用分子克隆技术,获得了高纯度的PBP2a蛋白并制备了多克隆抗体,为其进一步研究奠定了基础。
- 金姝朱祖怀闫佩毅邹玉涵朱元黄德魁朱晴晖
- 关键词:原核表达
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白的低温诱导表达纯化及免疫原性的鉴定被引量:1
- 2014年
- 目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)PBP2a的原核表达及其免疫源性的鉴定。方法根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,将mecA基因的70~2006bp克隆至pET28a载体,转化E.coliBL21(DE3);经IPTG低温诱导表达后,利用镍琼脂糖凝胶亲和层析技术纯化目的蛋白;用抗PBP2a抗体鉴定纯化蛋白的免疫源性。结果成功构建了不合跨膜区的PBP2a原核表达载体,在低温诱导条件下获取的蛋白纯化后无杂蛋白;该蛋白能与商品化抗PBP2a单克隆抗体结合。结论利用分子克隆技术,获得了高纯度的不合跨膜区的PBP2a蛋白,且该蛋白具有免疫源性,为进一步制备抗PBP2a单克隆抗体奠定了基础。
- 金姝邹玉涵朱祖怀闫佩毅黄德魁郑佐娅
- 关键词:葡萄球菌金黄色原核表达
- 2013年上海市细菌耐药性监测被引量:24
- 2014年
- 目的了解2013年上海市细菌耐药性监测结果。方法采用纸片扩散法或自动化仪器法对上海市40所医院的临床分离菌进行药敏试验。其中包括28所三级医院和12所二级医院,采用CLSI 2013年版标准判断结果。结果总计98 185株临床分离菌,革兰阳性菌26 655株,占27.1%,革兰阴性菌71 530株,占72.9%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(金葡菌)(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为50.8%和77.6%。在二级医院和三级医院MRSA、MRCNS的平均检出率分别为55.1%、80.6%和49.8%、77.0%。葡萄球菌属中未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。726株儿童肺炎链球菌非脑膜炎分离株中青霉素敏感、中介和耐药(PSSP、PISP和PRSP)的检出率分别为56.7%、15.6%和27.7%,107株成人分离株为91.6%、2.8%和5.6%。发现35株屎肠球菌和17株粪肠球菌对万古霉素耐药(VRE)。根据表型推测,多数VRE为VanA基因型。大肠埃希菌、克雷伯菌属和奇异变形杆菌中产ESBLs菌株的检出率分别为61.3%、37.1%和39.5%。上述3种细菌中产ESBLs菌株的检出率在二级医院和三级医院的检出率分别为63.0%、31.6%、56.3%和60.7%、38.7%、33.5%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,对亚胺培南和美罗培南的总耐药率分别为5.8%和6.6%。铜绿假单胞菌和不动杆菌属对亚胺培南、美罗培南耐药率分别为25.3%、24.3%和52.6%、56.0%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中有少数菌株为对所有测试药物耐药的广泛耐药株。分离自尿液标本中的肠球菌属和大肠埃希菌对磷霉素的耐药率低。结论细菌耐药性仍对临床抗感染治疗构成严重威胁,尤其是二级医院中某些细菌的耐药率高于三级医院,应引起高度关注。
- 胡付品朱德妹汪复郭燕杨洋蒋晓飞王靖李虎陈险峰殷杏王传清王爱敏应春妹高晶方毅庞立峰袁轶群武楠魏丽王金铎胡必杰黄声雷李娜臧先林孙康德虞中敏汤瑾王坚镪瞿跃红周华敏刘庆中汤荣傅启华
- 关键词:细菌耐药性监测药物敏感性试验多重耐药广泛耐药万古霉素耐药肠球菌超广谱Β内酰胺酶