青海枸杞多糖对黑色素瘤A375细胞株生物学行为影响研究 马文宇 王刚 郭砚 冶娟 朱世文 王永 哈筱梅 李生存 吴邓婷 王丽雯 陈晓昱 该课题立足青海实际,采用细胞培养工作模型,观察不同浓度青海产枸杞多糖干预后A375细胞增殖抑制率、细胞形态变化,检测其凋亡指数、黏附抑制率和侵袭抑制率的改变等实验观察其对黑素瘤A375细胞侵袭转移的作用,探讨青海产枸杞多...关键词:关键词:枸杞多糖 肿瘤治疗 中药治疗 不同剂量雷公藤多苷对寻常型银屑病样小鼠血清炎性因子的影响 被引量:6 2021年 目的观察不同剂量雷公藤多苷对寻常型银屑病样小鼠血清炎性因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和核转录因子-κB(NF-κB)的影响,并探讨其最佳治疗剂量。方法2019年2—11月,将40只BALB/c雄性小鼠采用随机数字表法分为五组(n=8):对照组、模型组,低、中、高剂量组给药组。小鼠建模后给药组采用不同剂量雷公藤多苷灌胃,浓度为10 mg·kg^(-1)·d^(-1)、20 mg·kg^(-1)·d^(-1)和40 mg·kg^(-1)·d^(-1),持续灌胃14 d。收集小鼠病变皮肤组织,对超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平进行测定。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清IL-6、IL-17、IL-23和TNF-α水平,Western blotting法检测小鼠血清NF-κB水平。细胞处理后流式细胞术检测各组细胞周期。结果病变皮肤均质化后SOD活性、GSH和MDA水平测定结果显示,模型组小鼠的GSH水平(8.94±0.95)U/mgprot和SOD活性(21.37±3.76)U/mgprot低于对照组(30.93±1.91)U/mgprot、(44.35±4.09)U/mgprot,(P=0.002、0.007),给药组小鼠的GSH水平和SOD活性高于模型组,其中中剂量组最高,为(36.03±1.34)U/mgprot、(42.45±2.43)U/mgprot,P<0.001、P=0.003,低剂量组最低为(26.86±2.03)U/mgprot、(30.39±2.04)U/mgprot,均P<0.05;而MDA测定结果相反,模型组小鼠MDA水平高于对照组,(74.64±2.29)nmol/mgprot比(40.51±2.34)nmol/mgprot,P<0.001,经过药物治疗后降低(P<0.001)。ELISA结果显示,与对照组相比,模型组小鼠血清中IL-6、IL-17、IL-23和TNF-α表达水平升高为(4.93±0.09)pg/mg、(9.05±0.20)pg/mg、(5.23±0.17)pg/mg、(11.51±1.23)pg/mg,均P<0.05;低剂量组小鼠IL-17和TNF-α的表达水平与模型组相比差异无统计学意义(均P>0.05),中剂量组(2.76±0.23)pg/mg、(6.12±0.27)pg/mg、(3.19±0.21)pg/mg、(8.21±0.44)pg/mg和高剂量组(3.72±0.09)pg/mg、(6.02±0.25)pg/mg、(3.37±0.41)pg/mg、(8.44±0.38)pg/mg小鼠血清炎性因子下降, 宋颖 朱世文 王晓馨关键词:雷公藤属 白细胞介素类 核转录因子-ΚB 黑果枸杞多糖对中波紫外线诱导HaCaT细胞光损伤的保护作用 2017年 目的 探讨黑果枸杞多糖对HaCaT细胞光损伤的预防作用及机制。方法 采用超声辅助水提法提取柴达木黑果枸杞中的多糖成分。体外培养的HaCaT细胞分为3组,对照组:正常培养,不做其他处理;中波紫外线(UVB)组:30 mJ/cm2 UVB照射;实验组:30 mJ/cm2 UVB照射前6 h加入2 g/L黑果枸杞多糖溶液。照射1 h后继续培养12 h,倒置显微镜观察细胞形态,MTS法测定细胞增殖,流式细胞仪测定细胞凋亡率,酶标法检测细胞丙二醛和谷胱甘肽过氧化物酶含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力,ELISA法检测上清液和细胞中白细胞介素1(IL?1)和肿瘤坏死因子α(TNF?α)水平。结果 与对照组相比,UVB组细胞形态模糊不清,出现死亡漂浮现象;实验组细胞肿胀,但形态尚清楚。MTS结果显示,3组间细胞增殖吸光度值差异有统计学意义(F = 48.88,P 〈 0.01),其中UVB组(1.72 ± 0.12)显著低于对照组(2.34 ± 0.11),实验组(2.11 ± 0.10)又显著高于UVB组,差异均有统计学意义(P 〈 0. 05)。UVB组细胞凋亡率(82.41% ± 2.49%)显著高于对照组(3.98% ± 0.19%)和实验组(22.79% ± 0.97%),实验组细胞凋亡率明显高于对照组,各组间比较差异均有统计学意义(均P 〈 0.05)。UVB组与对照组比较,丙二醛含量明显上升,SOD活性、谷胱甘肽过氧化物酶含量、CAT活性明显下降(均P 〈 0.05)。同时,UVB组较对照组上清液中IL?1和TNF?α含量及细胞中TNF?α含量均明显升高(均P 〈 0.05),但细胞中IL?1差异无统计学意义(P 〉 0. 05)。结论 黑果枸杞多糖对HaCaT细胞的光损伤有保护作用,其保护机制可能与减少细胞炎症物质的合成和分泌及减少自由基有关。 任立汆 加杨娥 燕华玲 王永 郭砚 哈筱梅 朱世文 王刚关键词:角蛋白细胞 紫外线 氧化性应激 白细胞介素1 恶性黑素瘤细胞miR-508-3p与叉头框转录因子C1的关系及对增殖、迁移和侵袭的影响 2020年 目的探讨miR-508-3p与叉头框转录因子C1(forkhead box C1,FOXC1)的关系及其在恶性黑素瘤中的表达和作用机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测mi R-508-3p和FOXC1在HEM正常黑素细胞及A375恶性黑素瘤细胞中的表达;将体外培养的A375细胞分为mimics NC组、mi R-508-3p mimics组、inhibitor NC组和mi R-508-3p inhibitor组,RT-qPCR检测其沉默效果及对FOXC1 mRNA水平的影响;免疫印迹法(Western blot)分别检测FOXC1蛋白的表达量;MTT法检测A375细胞的增殖能力;Transwell实验检测转染后A375细胞侵袭及迁移能力的变化;荧光素酶报告基因技术检测FOXC1是否为mi R-508-3p的直接靶基因。结果与人正常黑素细胞相比,A375细胞中mi R-508-3p表达明显降低,而FOXC1表达明显升高;与inhibitor NC组相比,转染mi R-508-3p inhibitors的A375细胞中mi R-508-3p的表达明显下调,FOXC1 mRNA和蛋白表达、细胞的增殖、侵袭及迁移能力明显升高;与mimics NC组相比,转染mi R-508-3p mimics的A375细胞中mi R-508-3p的表达明显升高,FOXC1 mRNA和蛋白表达、细胞的增殖、侵袭及迁移能力明显降低;mi R-508-3p mimics可降低野生型FOXC1 3’-UTR的荧光素酶报告基因相对活性。结论 mi R-508-3p通过负向调控FOXC1抑制恶性黑素瘤的增殖、迁移和侵袭。 朱世文 王刚 罗文娟 王丽雯 王倩关键词:增殖 复方甘草酸苷联合ALA-PDT治疗中、重度痤疮44例临床观察 被引量:8 2016年 目的评价复方甘草酸苷联合5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗中、重度痤疮的疗效及安全性。方法将入选的85例中、重度痤疮患者按就诊顺序随机分为两组,治疗组44例,对照组41例。对照组予ALA-PDT照射20 min,1次/周;治疗组同时予复方甘草酸苷3片,3次/d,两组患者疗程均为8周。结果治疗8周后,治疗组有效率为90.91%,对照组有效率为73.17%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗结束后3个月时,治疗组复发率4.54%,对照组复发率19.51%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者的不良反应发生率比较,差异无统计意义(P>0.05)。结论复方甘草酸苷联合ALA-PDT治疗中、重度痤疮疗效优于单用ALA-PDT治疗,且复发率低,值得临床推广应用。 朱世文关键词:痤疮 5-氨基酮戊酸 ALA-PDT 复方甘草酸苷 多形性日光疹患者负性情绪与神经生长因子和P物质水平的相关性 被引量:4 2012年 目的探讨多形性日光疹(PLE)患者焦虑和抑郁负性情绪与血清神经生长因子(NGF)和P物质(SP)水平的关系。方法应用焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)对多形性日光疹患者进行问卷测评,双抗夹心酶联免疫吸附法测定其血清中NGF和SP水平,并与正常人作比较。结果 PLE患者焦虑和抑郁评分高于正常人,且与血清NGF和SP水平呈正相关。结论 PLE患者焦虑和抑郁负性情绪对病情影响与血清NGF和SP水平变化可能有关联。 王刚 燕华玲 冶娟 王永 李生存 哈筱梅 朱世文 马文宇 郭砚关键词:多形性日光疹 抑郁 神经生长因子 P物质 多形日光疹患者负性情绪与p物质、神经生长因子相关性研究 燕华玲 王刚 冶娟 马文宇 郭砚 王永 武秀卿 哈筱梅 李生存 朱世文 周婧雅 张晓 项目采用焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)对多形日光疹(PLE)患者进行问卷测评;并用双抗夹心酶联免疫吸附法测定其血清NGF、p物质水平,同时与正常对照组比较。结果显示:PLE患者焦虑和抑郁评分高于对照组,血...关键词:关键词:神经内分泌免疫 酶联免疫吸附法测定 藏雪莲水提取物对UVB引起的HaCaT细胞光老化作用影响的实验研究 郭砚 燕华玲 冶娟 马文宇 哈筱梅 李生存 朱世文 王刚 苑乐 该项目采用细胞培养、酶联免疫及免疫荧光染色检测等方法,对UVB诱导的人永生化角质细胞(HaCat)细胞的氧化损伤作用进行了研究,初步探讨了藏雪莲提取物对UVB诱导HaCat损伤的保护作用机制。证实藏雪莲水提取物、多糖和黄...关键词: 朗格汉斯细胞在多形性日光疹皮损中的表达及超微结构 燕华玲 苏一平 王永 蔺小倩 郭砚 马文宇 李生存 冶娟 朱世文 哈筱梅 郭新建 张易青 该课题应用免疫组化技术对23例经临床和组织病理确诊为多形性日光疹患者(PLE)皮损进行了研究,并以15名面颈部正常皮肤组织作为对照组。结果显示PLE组皮损中朗格汉斯细胞数量多于对照组,体积变大,树突较多而长。该研究成果对...关键词:关键词:多形性日光疹 朗格汉斯细胞 组织病理 黑枸杞水提物对中波紫外线辐射人永生化角质形成细胞抗氧化的作用 被引量:5 2017年 目的探讨黑枸杞水提物是否对中波紫外线(UVB)辐射后人永生化角质形成细胞(Ha Ca T)的氧化损伤具有保护作用。方法以Ha Ca T细胞为研究对象,设置空白对照组、UVB照射组、UVB+低剂量水提物组、UVB+中剂量水提物组、UVB+高剂量水提物组。黑枸杞水提物提前12h加入培养基中,辐照后20h收集细胞。倒置显微镜观察细胞形态,MTS检测细胞增殖活力(A值),酶生化法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力、过氧化氢酶(CAT)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量和丙二醛(MDA)含量。结果 UVB照射后Ha Ca T细胞形态明显改变,A值、SOD活力、CAT活力、GSH-Px含量降低,MDA含量升高(P<0.05);低剂量水提物干预后差异无统计学意义(P>0.05),中剂量和高剂量水提物干预后A值(吸光度)、SOD活力、CAT活力、GSH-Px含量升高,MDA含量降低(P<0.05),且中剂量组和高剂量水提物组组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论低剂量黑枸杞水提物不能抑制UVB对Ha Ca T细胞的氧化损伤,中剂量、高剂量可减轻UVB对Ha Ca T细胞的氧化损伤,且在一定的浓度范围内呈剂量依赖性。 加杨娥 任立汆 燕华玲 冶娟 王永 郭砚 哈筱梅 朱世文 王刚关键词:HACAT细胞 UVB