曹忠健
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院生物工程学系更多>>
- 发文基金：广东省重大科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 腺病毒介导生长抑素2型受体对裸鼠人胰腺癌移植瘤抑制作用的研究被引量：3
- 2007年
- 目的构建表达生长抑素2型受体(SSTR2)的重组腺病毒,探讨其对裸鼠人胰腺癌移植瘤生长的影响及机制。方法2004-06-01—2005-12-10,在暨南大学生物工程学系采用位点特异性重组方法构建和包装携带人生长抑素2型受体和报告基因LacZ的重组腺病毒Ad-SSTR2和Ad-LacZ。建立裸鼠人胰腺癌移植瘤模型,分别于瘤内注射生理盐水(阴性对照组)、Ad-LacZ(报告基因对照组)和Ad-SSTR2(实验组),观察肿瘤大小和重量变化。通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)鉴定SSTR2在裸鼠肿瘤组织中的表达,Western blot测定信号传导通路蛋白ERK2和ras的表达情况。结果获得滴度分别为6.0×1012pfu/L和6.5×1012pfu/L的重组腺病毒Ad-SSTR2和Ad-LacZ。Ad-SSTR2转染裸鼠胰腺癌移植瘤后SSTR2 mRNA和蛋白都得到有效表达,实验组对移植瘤生长具有明显的抑制作用,抑制率为48.2%。与阴性对照组和报告基因对照组相比,实验组ERK2和ras蛋白的表达量明显减少(P<0.01)。结论腺病毒介导的生长抑素2型受体对裸鼠人胰腺癌移植瘤的生长具有抑制作用,其作用机制可能与信号传导通路蛋白ERK2和ras的表达下调有关,提示其有可能成为胰腺癌基因治疗的一种有效方法。
- 徐彬徐浩李月琴曹忠健张欣周天鸿
- 关键词：胰腺肿瘤腺病毒
- 编码hSSTR2基因的复制缺陷型腺病毒载体的构建和鉴定
- 背景与目的 生长抑素是一种在人体中广泛分布的激素，通过靶细胞膜上的生长抑素受体(somatostatin receptor，SSTR)介导，负性调节多种生理功能。SSTR共有5种亚型，其中2型受体被认为与肿瘤的关系最为密...
- 曹忠健
- 关键词：生长抑素受体腺病毒基因治疗胰腺肿瘤
- 文献传递
- 携带人生长抑素2型受体的腺病毒载体的构建和表达被引量：2
- 2006年
- 目的:构建表达SSTR2的重组腺病毒载体,用于胰腺癌的基因治疗。方法:构建重组腺病毒穿梭质粒pDC316-SSTR2,通过脂质体与腺病毒骨架质粒pBHG lox(delta)E1,3Cre共转染293细胞,经位点特异性重组获得重组腺病毒Ad-SSTR2。通过PCR鉴定Ad-SSTR2。经293细胞扩增,纯化制备高滴度病毒感染液。以病毒感染液感染人胰腺癌细胞capan-2,应用免疫印迹检测SSTR2蛋白的表达。结果:成功构建腺病毒穿梭质粒pDC316-SSTR2,与pBHG lox(delta)E1,3Cre共转染293细胞获得了重组腺病毒Ad-SSTR2,以Ad-SSTR2基因组DNA为模板同时扩增出了人SSTR2 cDNA基因片段和腺病毒骨架基因片段。Ad-SSTR2感染capan-2 48 h后,免疫印迹检测到SSTR2蛋白的表达。结论:表达人SSTR2的重组腺病毒载体构建成功,并在胰腺癌细胞中得到正确表达,为SSTR2基因治疗胰腺癌奠定了基础。
- 徐彬徐浩李月琴曹忠健张欣周天鸿
- 关键词：腺病毒科基因疗法
- 腺病毒介导生长抑素2型受体对胰腺癌基因治疗:体外和体内结果
- 目的:构建携带人生长抑素2型受体的腺病毒载体,观察其对裸鼠人胰腺癌移植瘤生长的影响,探讨放射性核素99mTc标记生长抑素的报告基因表达显像技术监测胰腺癌基因治疗的可行性。方法:采用位点特异性重组方法构建和包装携带人生长抑...
- 徐浩徐彬弓健李月琴曹忠健张欣周天鸿
- 文献传递
- 生长抑素2型受体在12株肿瘤细胞中的表达
- 2006年
- 目的研究多种肿瘤细胞是否广泛表达生长抑素2型受体(SSTR2),以期探讨生长抑素类似物应用于各种肿瘤治疗的可能性。方法分别提取肺癌、鼻咽癌、宫颈癌、肝癌、乳腺癌及胰腺癌6种肿瘤,共12株细胞的总RNA,用反转录PCR检测SSTR2 mRNA的表达,同时制备12株细胞的总蛋白样品,经免疫印迹检测SSTR2蛋白的表达。结果除1株肺癌细胞外,其余11株细胞都表达SSTR2 mRNA;有1株肺癌细胞,2株胰腺癌细胞不表达SSTR2蛋白。结论除胰腺癌外,生长抑素2型受体在多种肿瘤细胞中的表达有较大的普遍性。
- 徐彬徐浩李月琴曹忠健张欣初彦辉周天鸿
- 关键词：生长抑素2型受体肿瘤细胞基因表达免疫印迹
