徐帆洪
- 作品数:57 被引量:77H指数:5
- 供职机构:上海生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划上海市“科技创新行动计划”更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 高表达α1b干扰素(INF-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化
- 目的在构建高表达INF-alb重组大肠杆菌工程菌的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺。方法采用高密度培养技术(HCDC)和柱层析技术。结果发酵密度A可达70,表达量为菌体总蛋白的30%左右。经破菌、离心、离子交换和...
- 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇
- 关键词:重组大肠杆菌高密度发酵纯化
- 文献传递
- 干扰素α1b突变体的高效表达、纯化及生物学活性研究
- 目的:构建高效表达的干扰素α1b突变体菌株和开发其纯化工艺,研究干扰素α1b突变体的抗细胞增殖活性和促NK细胞杀伤活性.
方法:用PCR定点突变技术将重组干扰素α1b第86位的半胱氨酸突变为天冬氨酸,得到干扰素...
- 徐帆洪陈仰权童葵塘
- 关键词:蛋白纯化纯化工艺肿瘤细胞
- 文献传递
- 一种重组人干扰素-α1b复合物及其制备方法
- 一种mPEG修饰重组人干扰素-α1b复合物及其制备方法,属肽或蛋白质的修饰复合物及其制备的技术领域。该复合物由重组人干扰素-α1b蛋白质和mPEG衍生物mPEG-SPA组成,两者通过前者的游离氨基与后者的羟基琥珀酰亚胺活...
- 吴自荣徐帆洪杨宇峰马相虎黄静路煜马明浩吴腾捷
- 文献传递
- 高效表达干扰素α1b(IFN-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化被引量:2
- 2003年
- 目的在构建高效表达IFN-α1b重组大肠杆菌工程菌的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺.方法采用高密度培养方法(HCDC)和柱层析纯化技术.结果发酵密度A600可达70,表达量为菌体总蛋白的30%左右.经破菌、离心、离子交换和分子筛凝胶过滤得到IFN-α1b纯品,FPLC测定纯度为100%,活性为4.99×107U/ml,比活为2.5×107U/mg,均符合2000版<中国生物制品规程>要求.结论已建立了适用于规模化生产的发酵纯化工艺.
- 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇
- 关键词:干扰素工程菌高密度发酵纯化
- 一种全新基因工程多肽结合疫苗-G17-DTA嵌合蛋白的表达纯化
- 本文将两个胃泌素释放肽G17替代白喉毒素的A亚单位中的一段线状环路,简称(G17-DTA),并成功地在大肠杆菌中表达。该嵌合蛋白在经尿素变性复性后,呈较好的均一性且与野生型DTA相近。该嵌合蛋白免疫小鼠后能激发小鼠对G1...
- 吴丽娜徐帆洪瞿爱东
- 关键词:嵌合蛋白表达纯化
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- 百日咳毒素S1亚单位截短片段在大肠杆菌中的表达纯化与初步应用
- 目的:克隆百日咳毒素S1亚单位C端截短片段S146,构建表达蘑组子,在大肠杆菌中表达并纯化目的蛋白,利用其自制抗体进行包被初步建立特异性检测百日咳毒素的双抗体夹心ELISA方法。
方法: PCR扩增得到S146...
- 杨瑜朱为应通峰徐帆洪黄帼英瞿爱东
- 关键词:百日咳毒素基因克隆ELISAPCR扩增生物制品
- 文献传递
- 一种全新基因工程多肽结合疫苗-G17-DTA嵌合蛋白的表达纯化
- 本文将两个胃泌素释放肽G17替代白喉毒素的A亚单位中的一段线状环路,简称(G17-DTA),并成功地在大肠杆菌中表达。该嵌合蛋自在经尿素变性复性后,呈较好的均一性且与野生型DTA相近。该嵌合蛋白免疫小鼠后能激发小鼠对G1...
- 吴丽娜徐帆洪瞿爱东
- 关键词:胃泌素嵌合蛋白基因工程白喉毒素
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- 白喉毒素的定向突变研究及其在E.Coli中的表达
- 本文在大肠杆菌中表达了白喉毒素(DT)全长片段。利用阴离子交换柱和分子筛进行纯化,得到了较纯的DT片段。并利用定点突变的方法,在DT的A片段的活性位点区域进行单点突变及双点突变,将纯化后的突变体蛋白用与野生型同样的方法进...
- 吴丽娜徐帆洪马颖杰冯洁金于兰瞿爱东
- 关键词:白喉毒素定点突变VERO细胞毒性实验
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- 甲醇酵母分泌表达重组人干扰素α1b纯化工艺的建立被引量:2
- 2004年
- 建立适合大规模、低成本生产重组人干扰素α1b(Recombinanthumaninterferon α1b ,rhIFN α1b)的纯化工艺。采用高效分泌表达rhIFN α1b的甲醇酵母工程菌发酵 ,收集离心后的上清液 ,超滤脱盐 ,经离子交换柱和分子筛柱层析纯化。纯化的rhIFN α1b的纯度为 98%以上 ,比活性 2 .4× 10 7IU/mg ,活性回收率 14 % ,相对分子质量 1980 0和等电点 5 .0。经检测 ,rhIFN α1b蛋白N 端 15个氨基酸序列与正常对照完全符合。该纯化工艺简便 ,时程短 ,重复性好 。
- 吴腾捷徐帆洪孙九如路煜叶凡史晓明刘桂珍郭盛淇
- 关键词:甲醇酵母纯化工艺
- 乙脑病毒SA14-14-2减毒疫苗株的生物学和基因稳定性研究
- 目的:研究乙脑病毒SA14-14-2减毒疫苗株在实验室传代过程中的生物学和基因稳定性,为疫苗的安全性和免疫效果以及疫苗生产控制病毒的有效代次提供科学依据。
方法:将SA14-14-2减毒株在原代地鼠肾细胞(PH...
- 许乐燕徐闻青徐帆洪王兵张秀娟
- 关键词:乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株生物学
- 文献传递