张长生
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 林可霉素生物合成研究进展被引量：2
- 1998年
- 迄今,放线菌共分为八大家族,大约四十个属,它们的形态学、趋向性及遗传性状各不相同.原核生物链霉菌是放线菌目中一个具有重要意义的属,在生长期结束后链霉菌常会合成种类繁多的次级代谢产物.除了色素和气味物质外尚有抗病毒剂、抗生素以及细胞刺激物,这些物质在医药、畜牧及农业中都具有重大应用价值.商业化的抗生素中75%是由链霉菌生产的.林可霉素(lincomycin,又称洁霉素)及其氯化衍生物克林霉素(clindamycin)是一类迄今仍具有重要临床意义的抗生素,对革兰阳性菌(如厌氧细菌、好氧链球菌以及产青霉素酶的金葡球菌)以及革兰阴性菌均有效.林可霉素在临床上多用于治疗化脓性炎症和感染以及骨质炎症.也可作为抗疟疾药物.克林霉素具有巨大的药用价值,因为它是临床上少数几个抗革兰阴性厌氧菌的药物.
- 张惠展张长生周军
- 关键词：林可霉素生物合成
- 链霉菌RNA聚合酶的异质性和启动子的多样性被引量：2
- 1997年
- <正>链霉菌是革兰阳性好氧土壤细菌,其生活周期涉及到一个复杂的形态分化过程,包括孢子发芽、营养菌丝生成、气生菌丝形成和孢子生长.链霉菌的基因组大约为8×10~6~1×10~7个碱基对,相当于大肠杆菌的2倍多,其DNA含有异常高的GC比(约为73%),并有证据表明,染色体的线性形式在链霉菌中很普遍.在链霉菌中,从形态分化到次级代谢过程无不为一个复杂的、常常是相互偶联的多层次调控系统所支配.这些调控层次包括:启动子和RNA鄹合酶的多样性,阻遏作用,活化作用,感受器/响应器调控系统,ppGpp系统,调控tRNA系统,以及被誉为细菌激素的丁羧内酯类化合物系统.许多异源基因,包括人的白细胞介素2(IL-2),牛的生长激素,大肠杆菌木糖异构酶基因等,都可在链霉菌中获得表达.高活性启动子的存在往往是外源基因表达的关键.因而,了解有关链霉菌启动子结构与基因表达的关系,对于构建链霉菌分泌表达载体相当重要.
- 张长生张惠展
- 关键词：链霉菌RNA聚合酶启动子多样性
- 林可链霉菌噬菌体φSL60启动子的克隆与鉴定
- 张长生
- 关键词：卡那霉素抗性亚克隆
- 林可霉素生物合成基因lmbH的回转化被引量：1
- 1999年
- 以ｐＩＪ７０２或ｐＩＪ４８６为载体构建了３个含有ｌｍｂＨ基因的重组质粒ｐＥＳＳ７０１、ｐＥＳＳ７０４和ｐＥＳＳ７０８，分别回转化林可霉素产生菌（Ｓ．ｌｉｎｃｏｌｎｅｎｓｉｓ）Ｂ４８，并随机挑选了６００个回转化克隆进行摇瓶初筛，以抑菌圈直径作为衡量林可霉素产量的标准。结果发现，每一种重组方案均得到了一个产量明显高于产生菌对照的回转化同源整合菌株，即６号（ｐＥＳＥ７０１）、８１号（ｐＥＳＥ７０４）和２４４号（ｐＥＳＥ７０８），折算成效价的提高率分别为７１．９％，１１０．６％和５３．６％。
- 张长生张惠展姚峰丁建忠
- 关键词：林可霉素生物合成
- 林可链霉菌噬菌体φSL60启动子的克隆与鉴定被引量：1
- 1998年
- 以启动子探针质粒ｐＩＪ４８６为载体，变铅青链霉菌（Ｓ．ｌｉｖｉｄａｎｓ）ＴＫ２３作受体，克隆了林可链霉菌噬菌体ＳＬ６０ＤＮＡ上的启动子活性片段。以ｐＵＣ１８为载体构建ＳＬ６０ＤＮＡ之ＫｐｎＩ片段的基因文库，从中筛选出两个片段，分别克隆于ｐＩＪ４８６中获得ｐＵＩＳ２９和ｐＵＩＳ１９８，在ＭＭ培养基上，两者的转化子对卡那霉素的抗性均仅为１０ｍｇ／Ｌ。噬菌体ＳＬ６０ＤＮＡ的ＢｇｌＩ片段直接克隆入ｐＩＪ４８６的ＢａｍＨＩ位点，获得重组质粒ｐＭＭＳ１，其转化子的卡那霉素抗性在ＭＭ培养基上可达２５０ｍｇ／Ｌ。分析表明ｐＭＭＳ１上的插入片段约为９２０ｂｐ，含有一个ＳｓｔＩ位点，四个ＭｂｏＩ位点。该片段用ＭｂｏＩ部分酶解缩小到６００ｂｐ，亚克隆入ｐＩＪ４８６中得到重组质粒ｐＭＳＢ１４，其转化子对卡那酶素的抗性水平提高到３００ｍｇ／Ｌ。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳显示，ｐＭＳＢ１４中的ｎｅｏ基因可以表达出氨基糖苷磷酸转移酶（ＡＰＨＩ蛋白）。这些结果表明ｐＭＳＢ１４中的插入片段可能具有较强的启动子活性。
- 张长生张惠展丁建忠
- 关键词：链霉菌启动子噬菌体克隆
