姚旭东
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：天津医科大学第二医院泌尿外科研究所更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人衰变加速因子基因在猪血管内皮细胞中的表达被引量：2
- 2002年
- 目的 通过转基因方法使猪的血管内皮细胞表达人DAF蛋白 ,抑制猪供人移植超急性排斥反应。方法 体外培养猪腹主动脉内皮细胞 ,用透射电镜方法进行鉴定。脂质体转染法将含有人DAF基因的真核表达载体PSFFV DAF转染进猪的血管内皮细胞 ,经G418筛选 (浓度为10 0mg/L) 12d ,获得具有抗性的克隆 ,进而增殖 ,传代 ,保种。通过流式细胞仪检测转染细胞DAF的表达情况。结果 转染了基因的细胞与未转染基因的细胞在流式细胞仪检测中其莹光强度分别为 82 .18和 1.69。转染的细胞 5代后其荧光强度为 71.96。结论 转染了人DAF基因的细胞荧光强度明显高于对照组。导入的外源基因在细胞内能高效、稳定地表达 ,为转基因猪的建立奠定一定的基础。
- 李胜芝姚旭东王广有马腾骧
- 关键词：基因转移衰变加速因子血管内皮细胞动物实验
- 异种器官移植用血管内皮细胞特异表达人DAF重组基因载体的构建被引量：2
- 2001年
- PCR插入法将人 ICAM-2启动子、人 DAF-intron1和 DAFc DNA克隆到 p GEM-7zf质粒中 ,进行序列测定及分析 .成功构建异种器官移植用血管内皮细胞特异表达人 DAF重组基因 .提供了人 DAF重组基因用于转基因动物的研究 .
- 张泽马腾骧姚旭东李胜芝王广有
- 关键词：衰变加速因子第一内含子器官移植DAF
- 人CD59重组基因在猪血管内皮细胞中的表达被引量：3
- 2004年
- 目的 通过转基因技术使猪的血管内皮细胞表达人CD5 9蛋白。方法 体外培养猪血管内皮细胞 ,脂质体转染法将pcDNA3 ICAM 2 Enhancer CD5 9cDNA、pcDNA3 ICAM 2 CD5 9cDNA及 pcDNA3 CMV CD5 9cDNA转染猪的血管内皮细胞 ,以未转染的猪血管内皮细胞为阴性对照 ,人的红细胞为阳性对照 ,经G418筛选 (浓度为 10 0mg/L)获得具有抗性的克隆 ,通过流式细胞仪检测转染细胞的表达情况。结果 pcDNA3 ICAM 2 Enhancer CD5 9cDNA重组质粒阳性表达强度为 61.4% ,对照组为 1.7% ,在成纤维细胞中为 8.2 %。不带增强子质粒为 3 8.3 %。结论 以人细胞间黏附因子Ⅱ (ICAM 2 )为启动子并带增强子的CD5
- 李胜芝姚旭东王广有马腾骧张泽张玥
- 关键词：内皮细胞基因表达CD59基因脂质体转染法
