吕庆亮 作品数:10 被引量:76 H指数:6 供职机构: 潍坊医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
姜黄素抑制肺癌细胞血管拟态形成机制探讨 被引量:35 2015年 目的观察姜黄素对肺癌细胞A549血管拟态生成及细胞内Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达的影响,探讨姜黄素抑制肿瘤血管形成的机制。方法体外培养A549细胞株,0、2.5、5、10、20和40μmol/L姜黄素处理细胞24h,应用MTT法检测姜黄素对细胞增殖的影响,体外血管生成拟态实验检测各组细胞形成血管拟态能力,RT-PCR法检测细胞内β-catenin基因mRNA的转录水平;选取Wnt/β-catenin特异性抑制剂XAV939,蛋白质印迹法检测对照组、姜黄素组和XAV939组血管生成基因VE-cadherin蛋白的表达。结果姜黄素对肺癌A549细胞株有抑制作用,并呈剂量依赖性,IC50值约为17.5μmol/L。与对照组相比,姜黄素含药组血管拟态形成数目减少,呈剂量依赖性;随着姜黄素浓度增加,β-catenin基因mRNA表达水平显著降低,差异有统计学意义,P值均<0.05。蛋白质印迹法结果示,与对照组相比,姜黄素组VE-cadherin蛋白表达减少,P=0.047;与XAV939组相比差异无统计学意义,P=0.087。结论姜黄素可抑制肺癌细胞的血管拟态形成能力,其机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活性实现的,这将为临床治疗肺癌提供新的思路。 汪丛丛 庄静 冯福彬 魏峻玉 孙月 吕庆亮 韩海娥 孙长岗关键词:姜黄素 肺癌 血管生成拟态 WNT/Β-CATENIN 信号通路 天花粉蛋白介导入肺癌A549细胞Caspase-3表达及相关JNK信号通路的研究 被引量:6 2014年 目的:探讨JNK信号通路在天花粉蛋白(TCS)诱导肺癌A549细胞凋亡信号分子caspase-3表达的作用及相关调节机制。方法:不同浓度的TCS处理人肺癌A549细胞,MTT法检测细胞增殖活性,免疫印迹分析JNK、p-JNK的表达。选取JNK特异性抑制剂(SP600125),按随机数字表法分为对照组、SP组、25μMTCS组、50μMTCS组以及TCS+SP组,PCR法检测各组细胞Caspase-3 mRNA的表达。结果:TCS对人肺癌A549细胞株的生长抑制作用明显,呈时间和剂量依赖性。随着天花粉蛋白浓度的升高,磷酸化JNK表达水平明显高于对照组(P<0.05);而JNK表达水平与天花粉蛋白药物浓度无明显变化(P>0.05)。胞内Caspase-3 mRNA的表达量随TCS浓度增加呈上升趋势,各组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。预先加入JNK特异性抑制剂,Caspase-3表达量相较于对照组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TCS可能通过抑制JNK通路的活化调控肺癌A549细胞caspase-3mRNA表达,从而诱导细胞凋亡。 庄静 汪丛丛 吕庆亮 刘泽旺 秦宝宁 曹晓靖 孙长岗关键词:天花粉蛋白 肺癌 JNK信号通路 CASPASE-3 天花粉蛋白对肺癌A549细胞凋亡及细胞骨架微管结构改变的研究 被引量:6 2014年 目的:探讨天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)对肺癌A549细胞株抑制增殖作用及诱导凋亡效应。方法:用不同剂量的TCS处理肺癌A549细胞,采用MTT法检测TCS对细胞增殖的抑制作用,透射电镜观察细胞骨架微管的变化,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率。结果:TCS使肺癌A549细胞呈凋亡型改变,细胞活性下降,且随着浓度的升高、时间的延长抑制率相应升高。结论:药理剂量的TCS可抑制肺癌A549细胞的增殖和分化,并通过细胞骨架的变化影响A549细胞的功能。 庄静 孙长岗 汪丛丛 冯福彬 吕庆亮 王华庆 吴勉华关键词:天花粉蛋白 肺癌 凋亡 细胞骨架 大黄虫丸对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖凋亡及PI3K/AKT信号传导通路的影响 被引量:10 2015年 目的观察大黄虫丸对慢性粒细胞性白血病K562细胞抑制增殖、诱导凋亡及对PI3K/AKT表达的影响,进而探讨其治疗慢性粒细胞性白血病的作用机制。方法制备大黄虫丸含药血清,应用MTT法检测对K562细胞增殖的影响,细胞克隆形成实验检测对细胞克隆形成的影响,用Annexin V FITC/PI法检测对细胞凋亡和细胞周期的影响,免疫印迹法检测PI3K/AKT信号通路重要蛋白Akt及其磷酸化形式p-Akt的蛋白水平。相关实验数据用SPSS17.0统计软件进行统计学处理。结果大黄虫丸含药血清能显著抑制白血病K562细胞的增殖,且呈浓度、时间依赖性;能抑制K562细胞克隆的形成;能诱导K562细胞的凋亡,且将细胞阻滞于G0/G1期,呈浓度依赖性。随着浓度升高,p-Akt/Akt值呈降低趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大黄虫丸能够体外抑制K562细胞增殖和诱导其凋亡,可能通过抑制PI3K/AKT信号通路激活实现。 秦宝宁 滕文静 刘瑞娟 周超 张利华 曹晓靖 刘泽旺 汪丛丛 吕庆亮 孙长岗关键词:大黄(庶虫)虫丸 K562细胞 细胞增殖 PI3K/AKT信号通路 化痰散结方对MCF-7/ADM裸鼠移植瘤逆转耐药机理研究 被引量:7 2014年 目的探究化痰散结方对乳腺癌MCF-7/ADM移植瘤的逆转耐药机制。方法制备荷瘤小鼠模型;设立生理盐水空白对照组、阿霉素组、阿霉素+维拉帕米组、阿霉素+中药低中高剂量组,观察肿瘤组织内阿霉素蓄积情况,用流式细胞仪(FCM)检测各组移植瘤耐药细胞P糖蛋白(P-gp)表达情况。结果中药组及维拉帕米组均能减轻瘤重,提高抑瘤率,与生理盐水组及阿霉素组比较均有统计学意义(P<0.05),中药组及维拉帕米组均能够降低P-gp含量、提高细胞内阿霉素浓度,其中高剂量中药组对细胞内阿霉素、P-gp的影响较维拉帕米组差异有显著性(P<0.05)。结论化痰散结方能逆转阿霉素耐药,增减肿瘤组织中阿霉素含量,并呈剂量依赖性,同时降低P-gp的表达。 冯福彬 庄静 韩海娥 吕庆亮 孙长岗关键词:化痰散结方 MCF-7 ADM 耐药 裸鼠 天花粉蛋白诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡机制的研究 2014年 目的探讨天花粉蛋白(TCS)诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及与凋亡相关蛋白bcl-2表达相关性。方法利用CCK-8检测不同浓度TCS对MDA-MB-231细胞生长抑制作用;通过流式细胞仪(FCM)测定天花粉蛋白作用后MDA-MB-231细胞周期及细胞凋亡变化情况;利用流式细胞仪观察不同浓度天花粉蛋白作用于MDA-MB-231后bcl-2蛋白表达情况。结果随着TCS浓度升高、作用时间延长,人乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长受到明显抑制,且存在剂量效应和时间效应关系;TCS在一定浓度范围内能诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡,使细胞阻滞于G1期,并使细胞中bcl-2蛋白表达下降。结论 TCS能通过促进细胞凋亡来抑制人乳腺癌MDA-MB-231的生长,bcl-2表达下降可能是TCS诱导人乳腺癌MDA-MB-231凋亡的分子机制之一。 韩海娥 孙长岗 冯福彬 武君 汪丛丛 吕庆亮关键词:天花粉蛋白 MDA-MB-231 BCL-2蛋白 姜黄素胶囊联合放疗治疗非小细胞肺癌脑转移29例 被引量:7 2015年 目的:探讨姜黄素对NSCLC脑转移治疗效果及对血清VEGF、TNF-α的影响。方法:随机将59例NSCLC脑转移患者分为两组,两组均以适形颅内放疗为基础治疗,观察组自治疗前7天予姜黄素胶囊,比较两组的临床有效率、血清VEGF、TNF-α水平及治疗前后KPS变化、中位生存时间。结果:观察组有效率(37.93%)优于对照组(30%),但两组之间差异无统计学意义(P>0.05);观察组血清TNF-α和VEGF水平较前均下降,但后者差异无统计学意义(P>0.05);KPS评分、中位生存期,对照组均高于对照组,且两指标变化差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:姜黄素可控制NSCLC脑转移的临床症状,且有较好的远期疗效,其可能与阻断肿瘤血管生成、控制瘤灶周围炎症等有关。 汪丛丛 庄静 吕庆亮 滕文静 秦宝宁 孙长岗关键词:姜黄素 非小细胞肺癌 脑转移 血管内皮生长因子 肿瘤坏死因子 大黄虫丸对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2 2015年 目的从细胞增殖和凋亡角度探讨大黄虫丸治疗慢性粒细胞白血病的可能机理。方法 16只裸鼠随机分为空白组和中药高、中、低剂量组,每组4只。中药高、中、低剂量组分别给予浓度为1.97、0.9、0.45 g/ml的大黄虫丸溶液灌胃,每组0.2 ml/(10 g·d),每日1次,连续7天,空白组给予等量生理盐水。停药次日,分离血清制备大黄虫丸含药血清。应用MTT法检测大黄虫丸含药血清对慢性粒细胞白血病系K562细胞增殖的影响,细胞克隆形成实验检测对细胞克隆形成的影响,用Annexin V FITC/PI法检测对细胞凋亡和细胞周期的影响。结果中药高剂量组在72 h时生长抑制率明显高于中药中、低剂量组(P<0.01)。中药各剂量组克隆形成率较空白组明显下降(P<0.01),中药中、高剂量组克隆形成率明显低于中药低剂量组(P<0.01)。中药高剂量组细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及合计凋亡率均较中药低、中剂量组升高明显(P<0.05或P<0.01)。中药低、中、高剂量组G0/G1期细胞显著高于空白组,G2/M期细胞下降(P<0.01),并且以中药高剂量组明显。结论大黄虫丸能抑制K562细胞增殖和诱导其凋亡,将其阻滞于G0/G1期,并且高剂量的大黄虫丸效果最好。 秦宝宁 滕文静 周超 曹晓静 刘泽旺 汪丛丛 吕庆亮 孙长岗关键词:大黄[庶虫]虫丸 慢性粒细胞白血病 K562细胞 细胞增殖 细胞凋亡 肺积1号方对荷瘤小鼠淋巴细胞亚群的影响 被引量:1 2014年 目的:观察肺积1号方对肺癌小鼠淋巴细胞亚群的影响,探讨肺积1号方抗肿瘤机理。方法:建立肺癌小鼠模型,将小鼠随机分为健康对照组、荷瘤对照组、中药组、环磷酰胺组,给药14 d后,测定瘤指数、肿瘤抑制率、胸腺指数、脾指数以及T细胞亚群变化,分离脾淋巴细胞观察其对Lewis肺癌细胞生长抑制作用。结果:中药组和环磷酰胺组均明显抑制肿瘤生长,中药组T细胞亚群得以纠正,与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);环磷酰胺组与荷瘤对照组均存在免疫失衡;中药组脾脏淋巴细胞抗肿瘤细胞能力较荷瘤对照组、环磷酰胺组强。结论:中药肺积1号可通过提高机体免疫力以抗肿瘤。 吕庆亮 孙长岗 庄静 孙伟国 姚淑贞 汪丛丛 曹玉梅关键词:中药 肺癌 免疫 淋巴细胞亚群 天花粉蛋白对肺癌A549细胞JNK、Bcl-2蛋白表达的影响 被引量:9 2014年 目的观察天花粉蛋白(TCS)对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响,并探讨其可能作用机制。方法取对数生长期的人肺腺癌A549细胞,调整细胞浓度至2×104/ml,接种于96孔培养板中预培养24 h后加入TCS注射液,使每组含TCS最终浓度分别为:0.04、0.08、0.12、0.16mg/ml,每个剂量分别设4个复孔,并设正常细胞组作对照,细胞共育24h。分别于24、48、72h光镜下观测凋亡细胞计数,计算凋亡指数。选用JNK特异抑制剂SP600125,实验分为空白对照组、SP600125组(20nmol/L,100μl)、TCS组(0.12mg/ml,100μl)、TCS加SP600125组(100μl),采用Western blot法检测各组JNK、Bcl-2蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,除0.08mg/ml组24h外,0.08mg/ml组、0.12mg/ml组、0.16mg/ml组各时间点凋亡指数均明显升高(P<0.05或P<0.01);与本组24h比较,0.04mg/ml组48h和0.08mg/ml组、0.12mg/ml组、0.16mg/ml组32h、48h凋亡指数均明显升高(P<0.05)。与SP600125组比较,TCS组、TCS加SP600125组JNK蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05);与TCS组比较,TCS加SP600125组JNK蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。结论 TCS可能通过JNK信号转导通路的激活诱导肺腺癌A549细胞Bcl-2的表达下降,从而导致细胞凋亡。 庄静 孙伟国 汪丛丛 刘瑞娟 吕庆亮 曹晓靖 孙长岗关键词:天花粉蛋白 肺癌 JNK BCL-2