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柽柳rd22基因的序列分析及耐盐性研究被引量：5: 2010年; 【目的】验证从抗逆植物柽柳中克隆得到的rd22基因的耐盐能力。【方法】采用根癌农杆菌介导法,对烟草进行rd22基因的遗传转化,将分子检测为阳性的6个转基因烟草株系和非转基因对照烟草的组培苗进行盐胁迫（NaCl浓度分别设为0（CK）,110,220和330 mmol/L）试验,通过观察相对电导率、SOD活性和相对生长量的变化,研究rd22基因的耐盐能力。【结果】生物信息学分析表明,来自柽柳的rd22基因属于BURP蛋白家族。分子检测证明,该rd22基因已整合到烟草基因组中,并在mRNA水平上有不同程度的表达。相对电导率和SOD活性分析表明,随着盐胁迫浓度的增加,各转基因烟草株系的相对电导率均呈上升趋势,且均小于对照烟草,在盐胁迫浓度达到330mmol/L时,非转基因对照烟草的相对电导率高达16.49%,而各转基因烟草的相对电导率最大为14.91%。各转基因烟草株系的SOD活性也随着盐胁迫浓度的增加均呈上升趋势,且均大于对照烟草,在盐胁迫浓度达到330 mmol/L时,转基因烟草SOD活性是对照烟草的1.10~1.39倍。相对生长量分析表明,盐胁迫浓度达到110,220,330mmol/L时,各转基因烟草株系相对生长量均高于对照株系,非转基因烟草的相对生长量分别为59.92%,36.99%和12.72%,转基因烟草的相对生长量平均为67.00%,44.05%和17.47%。【结论】rd22基因的导入,提高了转基因烟草的耐盐性。; 李慧玉林士杰王珊刘菲菲姜静; 关键词：柽柳生物信息学耐盐性

四倍体与二倍体白桦的光合特性比较被引量：22: 2011年; 以4年生四倍体白桦和二倍体白桦为试材,对其光合作用日变化、光响应曲线、CO2响应曲线和叶绿素荧光参数进行测定。结果表明:①四倍体和二倍体白桦均有光合作用"午休"现象,四倍体的全天最大净光合速率极显著高于二倍体(P<0.01),较二倍体提高了24.81%。②光饱和点、光补偿点和羧化效率等指标在两者之间的差异也极显著(P<0.01),四倍体较二倍体分别提高了9.41%、20.00%和25.19%。③四倍体叶绿素荧光参数中的PSⅡ中心非环式电子传递量子产额显著高于二倍体(P<0.05),较二倍体提高了13.28%,其他参数在两者之间差异不明显(P>0.05)。上述结果表明四倍体白桦的光合作用强于二倍体。; 杜琳李永存穆怀志张添咏刘菲菲黄海娇刘桂丰; 关键词：白桦光合作用

Expression analysis of ThGLP, a new germin-like protein gene, in Tamarix hispida被引量：9: 2010年; Germin and Germin-like protein （GLP） have various proposed roles in plant developmental stages and stress- related processes. A novel GLP cDNA clone was isolated from a cDNA library of Tamarix hispida. ThGLP, coded 225aa, possesses conserved motif of plant germin and Germin-like protein. ThGLP belongs to true germin subfamily through phylogenetic analyses. Gene expression profiles in roots and leaves were evaluated using real-time quantitative RT-PCR. The results show that the gene was highly induced by drought, salt, low temperature, CdCl2 and abscisic acid treatments. Our results demonstrate that the ThGLP gene is expressed in leaves and roots, is involved in different abiotic stress re-sponses and controlled by an ABA-dependent signaling pathway.; 李慧玉姜静王珊刘菲菲

柽柳cDNA文库的构建及ThAQP基因的表达被引量：4: 2010年; 【目的】构建NaCl胁迫下柽柳根部cDNA文库,在盐胁迫下检测柽柳水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)基因的表达,探讨AQPs与柽柳耐盐性的关系。【方法】以0.4mol/LNaCl胁迫处理的刚毛柽柳(Tamarix hispida)根部组织为试材,分别构建未经盐胁迫及胁迫24,48h的cDNA文库,并测定文库滴度。对从文库中获得的EST序列进行拼接,获得刚毛柽柳AQP(ThAQP)的单一序列,对其进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR方法,研究ThAQP基因在盐胁迫后的刚毛柽柳根和叶中的表达情况。【结果】构建的NaCl胁迫0,24,48h3个文库的初始滴度分别为1.0×106,1.4×106和1.2×106pfu/mL,插入片段的平均长度分别为0.8,0.9和0.85kb,平均重组率为98.2%。文库克隆随机测序获得了刚毛柽柳的7条ThAQP基因单一序列,这7条ThAQP基因分别与水通道蛋白的4个亚家族成员基因具有很高的同源性。在根和叶中,这7条ThAQP基因表达对盐胁迫的响应不同,在根部ThAQP1～ThAQP4相对表达量增多,而其他基因的相对表达量变化不明显;在叶部,ThAQP7在胁迫24h时相对表达量出现小幅度上升,而其他6条ThAQP的相对表达量则明显下降。【结论】ThAQP基因可能与柽柳抵御盐胁迫有关。; 李慧玉刘桂丰刘菲菲王珊; 关键词：柽柳 CDNA文库 NACL胁迫水通道蛋白

白桦BpSOC1基因的克隆及时序表达分析被引量：10: 2011年; 根据NCBI中已注册的近缘树种的SOC1同源基因序列设计引物,采用RT-PCR技术在4年生白桦茎尖中分离得到1条SOC1-like cDNA序列,命名为BpSOC1。该序列编码区长660 bp,编码220个氨基酸,蛋白质相对分子质量为25 367.77 D,理论等电点为9.32。蛋白结构预测分析表明,BpSOC1具有典型的MADS-box结构域和K-box结构域,同时具有多处DNA结合位点、糖基化位点和磷酸化作用位点,属于MADS家族转录因子。系统发育分析表明,BpSOC1属于MADS-box家族的SOC1/TM3亚家族。采用实时定量PCR技术研究不同树龄白桦BpSOC1从5月初至9月在茎尖的时序表达规律,结果显示:BpSOC1无论在2年生苗期的营养生长阶段还是进入3、4年生的生殖生长阶段均有表达,表达高峰均在7月初和9月初。但2年生苗期的BpSOC1表达量最高的7月初和9月初间无显著差异,而进入生殖生长期后9月初的BpSOC1表达量显著高于7月初的表达量,表明Bp-SOC1既参与白桦的营养生长,又参与生殖生长。; 刘菲菲李慧玉王姗刘桂丰; 关键词：白桦基因克隆

白桦开花调控相关基因FLC、LFY和SOC1的克隆及表达分析被引量：1: 2014年; 为研究LFY、FLC及SOC1开花调控关键节点基因在白桦花时调控中的作用,从白桦转录组数据中获得了LFY和FLC的全长cDNA序列,分别命名为BpLFY和BpFLC。获得的BpLFY基因编码区长1215bp,编码405个氨基酸,分子量为45.3 kD。BpFLC基因cDNA编码区长627 bp,编码209个氨基酸,分子量为11.4 kD,这2个基因分别属于FLO-LFY和MADS超家族。对3个基因的启动子进行分析,发现3个基因启动子区均含有2个花粉特异表达的顺式作用元件。通过实时定量PCR对BpLFY、BpFLC及BpSOC1在白桦茎尖、叶片、雄花序和叶腋中表达模式的分析结果表明,BpSOC1和BpFLC在白桦各个组织部位均表达,而BpLFY只在雄花序和发育中的腋芽中表达,且在叶片中BpFLC可抑制BpSOC1的表达。; 王子佳姜静刘桂丰刘菲菲李慧玉; 关键词：白桦 FLC LFY 启动子分析基因表达

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刘菲菲

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