刘春辉
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西省自然科学基金广西医疗卫生重点科研课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 负载CD133+肝癌细胞RNA树突状细胞疫苗的免疫活性被引量：2
- 2017年
- 目的探讨负载人肝细胞性肝癌(HCC)组织来源的CD133+肝癌细胞RNA树突状细胞(CD133+HCC RNA-DC)疫苗的免疫活性。方法采用酶消化法从人HCC组织中分离出肝癌细胞,利用流式细胞术分选出CD133+肝癌细胞,制备负载CD133+肝癌细胞RNA树突状细胞疫苗,最后用流式细胞术检测DC的表型,ELISA法测定DC分泌IL-12水平,采用混合淋巴细胞反应法检测DC在体外刺激自体淋巴细胞增殖的能力。结果 CD133+肝癌细胞RNA树突状细胞的HLA-ABC、HLA-DR、CD86、CD80、CD83表达水平分别是(96.52±2.02)%、(92.17±3.04)%、(94.25±3.28)%、(55.14±1.67)%、(40.53±2.31)%,与肝癌细胞RNA树突状细胞和成熟DC比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。CD133+肝癌细胞RNA-DC、肝癌细胞RNA-DC、成熟DC和未成熟DC分泌IL-12的量分别为(421.50±3.12)、(418.20±1.10)、(324.20±2.19)和(102.47±4.60)pg/ml,前两者之间差异无统计学意义(P=0.14),前两者均高于后两者,差异有统计学意义(P<0.05)。CD133+肝癌细胞RNA-DC与肝癌细胞RNA-DC刺激自体T淋巴细胞增殖能力分别均强于成熟DC和无DC刺激的自体T淋巴细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CD133+肝癌细胞RNA树突状细胞疫苗具有成熟表型,能够在体外有效刺激自体T淋巴细胞增殖。
- 易平张志明林家耀任远欧阳高雄刘春辉冯钟煦吕庆杰刘剑勇
- 关键词：CD133肝细胞性肝癌RNA树突状细胞疫苗
- 真核表达载体pEGFP-GPC3的构建及表达被引量：1
- 2012年
- 目的:构建磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)真核表达载体pEGFP-GPC3,并在小鼠树突状细胞(DC)表达。方法:将质粒pCMV-SPORT6-GPC3和载体pEGFP-N1分别进行双酶切获得目的基因GPC3片段和空载体,回收纯化后用T4连接酶将两者连接并转化E.coli DH5α菌株,用EcoR I、BamH I双酶切鉴定后通过脂质体法转染到DC中,然后进行荧光检测和Western blot分析。结果:构建的真核表达载体pEGFP-GPC3,转染DC后,荧光显微镜下可见转染的DC中有EGFP-GPC3融合蛋白的表达,Western blot分析发现有相对分子质量(Mr)大小约为67 000的蛋白条带。结论:成功地构建了真核表达载体pEGFP-GPC3并在转染DC后能在其中表达,为进一步研究GPC3基因的功能提供实验基础。
- 刘春辉张志明刘剑勇
- 关键词：GPC3EGFP真核表达
- 重组质粒pEGFP—GPC3的抗小鼠肝癌研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨pEGFP—GPC3转染小鼠骨髓来源树突状细胞（DC）是否能诱导小鼠产生特异性抗肝癌免疫以达到抗肝癌目的。方法建立荷瘤小鼠模型，随机分A、B、C三组，分别予腹腔注射pEGFP—GPC3转染的DC、pEGFP—N1转染的DC及生理盐水，提取各组小鼠脾淋巴细胞（脾LC）检测细胞毒性T淋巴细胞（CTL）活性，观察瘤体内淋巴细胞浸润及肿瘤细胞坏死情况并计算抑瘤率。结果A组小鼠脾LC对小鼠H22肝癌细胞（H22细胞）的杀伤率相比差异明显高于其对小鼠C127乳腺癌细胞（C127细胞）的杀伤率（t=17．365，P〈0．01）；B组小鼠脾LC对H22细胞及C127细胞的杀伤率无统计学意义（t=0．654，P〉0．05）；C组小鼠脾Lc对H22细胞及C127细胞的杀伤率无统计学意义（t=1．291，P〉0．05）；A、B、C组对H22细胞杀伤率分别比较，A〉B〉C（F=587．658，P〈0．01）。A组瘤体石蜡病理切片淋巴细胞浸润情况明显高于B组和C组（，=1．075，P〈0．01）。以C组为对照组，A、B组抑瘤率比较：A组〉B组。结论重组质粒pEGFP—GPC3转染的DC能显著提高小鼠机体对H22肝癌细胞的特异性免疫。
- 吕庆杰刘剑勇赵荫农刘春辉张志明冯钟煦崔英梁新强唐凯
- 关键词：GPC3重组质粒树突状细胞
