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绵羊胎儿成纤维细胞体外培养及转基因研究被引量：12: 2003年; 目的　用增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因转染体外培养绵羊胎儿成纤维细胞 ,探讨绿色荧光蛋白对绵羊胎儿成纤维细胞生物学特性的影响。方法　体外分离培养绵羊胎儿成纤维细胞 ,经脂质体介导EGFP基因转染第一代成纤维细胞 ,G4 18筛选 10～ 12d ,挑选转基因单克隆细胞 ,传代培养 ,进行细胞形态观察、生长曲线以及染色体核型分析 ,并进行了培养细胞性别鉴定。结果　整合有EGFP基因的绵羊胎儿成纤维细胞生物学行为与未转染外源基因的细胞无明显差别 ,根据荧光强度可直接反应外源基因的表达量。结论　EGFP基因作为体内报告基因可用于转基因细胞的研究 ,并将整合有EGFP基因的转基因细胞为克隆动物提供核供体奠定了基础。; 马玉珍扈廷茂王建国扈会平刘明秋; 关键词：绵羊成纤维细胞体外培养转基因克隆细胞增强型绿色荧光蛋白

人Endostatin基因的克隆及其在Hela细胞中的表达: 2007年; 利用RT-PCR克隆人Endostatin基因,分别构建到双顺反子表达载体pIRES2-EGFP和融合表达载体pEGFP-C1中.两个重组表达载体利用脂质体介导转染真核细胞Hela,48 h后可在荧光显微镜下观察到被转染细胞发出绿色荧光.传代10次后,绿色荧光仍持续表达,说明是稳定转染.以转染细胞的总DNA为模板PCR检测Endostatin基因已整合到细胞染色体上.利用兔抗人Endostatin抗体对已转染细胞进行免疫组化检测,显微镜下观察,转染的细胞显棕红色,表明Endostatin在转染细胞内稳定表达.本试验通过报告基因检测,DNA检测,免疫细胞化学检测三个水平证明Endostatin已整合到细胞的染色体上,为基因治疗以及联合治疗打下基础.; 陈明杰扈廷茂苏慧敏刘明秋; 关键词：ENDOSTATIN 脂质体转染免疫细胞化学 HELA

利用番茄U3snRNA基因上游启动区构建植物表达载体及对烟草的转化被引量：4: 2005年; 利用番茄U3snRNA基因上游启动区和ACC合成酶反义RNA-核酶嵌合基因DNA片段,构建含U3snRNA基因上游启动区-ACC合成酶的反义RNA-核酶嵌合序列的表达载体,重组于植物双元表达载体pGA643中,得到pGU3R.用三亲融合法导入农杆菌LBA4404中,采用叶盘法转化烟草,诱导再生小植株,获得了卡那霉素的抗性植株.提取抗性植株总DNA,通过PCR、PCRSouthern杂交检测并分别用启动区序列和ACC合成酶的反义RNA-核酶嵌合序列作探针,通过Southern杂交检测,已筛选出整合有外源基因的转化植株.为进一步研究U3snRNA上游启动区增强反义RNA-核酶基因的表达奠定了基础.; 李丽莉扈廷茂扈会平刘明秋苏慧敏; 关键词：烟草反义RNA 核酶

农杆菌介导人肝再生增强因子转化河套蜜瓜的研究: 2006年; 利用三亲融合法将含有人肝再生增强因子(hum an augm en ter of liver regeneration,hALR)的果实特异性表达载体pPZP-CAN导入农杆菌LBA 4404,转化河套蜜瓜子叶外植体,经诱导与筛选获得了抗性再生植株,PCR扩增、PCR-Sou thern和斑点杂交检测证明hALR已整合入河套蜜瓜再生植株基因组中.; 刘明秋张立全格根通拉嘎苗素平扈廷茂; 关键词：人肝再生增强因子河套蜜瓜子叶转基因果实特异性

微注射MT-hGH基因入雄原核后兔受精卵体外发育的研究被引量：1: 1990年; 将MT-hGH基因用微注射的方法,注入兔原核卵的雄原核中,微注射的受精卵和不经微注射对照的受精卵,经体外培养9h,21h,33h,53h,77h和125h,对其活力,发育速率和发育阶段进行观察。其结果是对照组和注射组的存活率随着体外培养时间的延长而下降,对照组受精卵体外培养9h存活率为99.2％,到125h下降至68.64％;注射组受精卵体外培养9h存活率为98.2％到125h下降至62.1％,体外培养9h和体外培养125h,胚胎存活率差异极显著(P<0.01)。在相同的时间内对照组胚胎存活率略高于微注射组,两者差异不显著。体外培养胚胎的发育速率对照组和微注射组均低于体内发育,而体外培养对照组胚胎发育速率与微注射组比较无显著差异,前者略高于后者。将注射MT-hGH基因体外培养发育正常的胚胎,移入8只同步假孕受体输卵管中,3只受体妇娠期满产仔5只,目前4只仔兔生长良好,其月令体重相当于对照仔兔1.3倍。注入外源基因整合情况有待检测后另文发表。; 张肇英王达珍扈廷茂郭继彤刘明秋李雪峰卢美霞; 关键词：基因显微注射体外发育胚胎移植

生命科学实践教学创新体系的建设被引量：18: 2009年; 内蒙古大学生命科学本科基础实验教学中心不断加强本科生实践能力的培养,更新实践教学理念,改革实践教学课程体系,创新实践教学内容。实验教学与理论教学相对独立并有机结合,开展分阶段分层次的实验教学;发挥现有学科优势,开设具有特色的实验教学内容,打造精品实验课程;加强实习基地建设,专业实习优势与特色明显,成为实践教学在实验室的延伸;利用"国家基础科学人才培养基金项目"对本科生进行综合科研训练,进一步挖掘学生创新潜力,着力培养学生的科研能力和创新精神;不断加强实践教学平台硬件条件建设,完善实践教学平台管理体系,为实践教学提供坚实基础。; 赵吉侯鑫刘明秋王迎春; 关键词：生命科学实践教学

河套蜜瓜花粉管通道法转化hALR基因被引量：1: 2009年; 为利用河套蜜瓜为生物反应器生产可用于治疗肝病的蛋白因子,以人胎肝mRNA为模板,经RT-PCR扩增获得了471 bp cDNA片段。克隆到pMD18-T载体,命名为pMD-ALR,测序分析结果与GenBank中报道的hALR编码序列完全相同。酶切回收hALR片段,插入到含有甜瓜果实黄瓜素(Cucumisin)基因启动子的果实特异性表达载体pPZP-CGN中,构建了hALR甜瓜果实特异性表达载体pPZP-CAN。花粉管通道法转化试验大田自花授粉花63朵,收获T0代果实27颗,结实率为42.9%。提取T0代种子无菌苗DNA,经PCR、PCR-southern和斑点杂交检测有13株呈阳性。; 张立全哈斯阿古拉扈廷茂刘明秋; 关键词：人肝再生增强因子果实特异性花粉管通道法河套蜜瓜

真核生物多顺反子表达载体的构建及在Hela细胞中的表达: 2009年; 利用DNA重组技术将抗肿瘤血管生成的内皮抑素基因endostatin插入含有FHIT(抗肿瘤人脆性组氨酸三联体基因)和EGFP的pIRES2-FHIT-EGFP载体中构建了真核多顺反子表达载体pES-IRES-FHIT-IRES-EGFP,用脂质体法转染Hela细胞后,用G418筛选出稳定转染的细胞.经RT-PCR、RT-PCR southern blot、northern blot和免疫细胞化学分析,结果证明单顺反子和三顺反子在RNA水平都得到表达.在蛋白表达水平上,荧光观察和免疫细胞化学分析结果显示Endostatin、FHIT和EGFP在Hela细胞中均得到表达,为基因药物和肿瘤多基因治疗奠定了基础.; 苗素平苗素生扈廷茂刘明秋; 关键词：多顺反子 IRES FHIT EGFP

根瘤农杆菌介导的抗虫转基因烟草的初步研究被引量：2: 1999年; 王永胜扈廷茂刘明秋孔威; 关键词：转基因烟草农杆菌介导转基因植株根瘤表达质粒大豆胰蛋白酶抑制剂

生命科学实验教学示范中心建设的探索与实践被引量：7: 2009年; 介绍了内蒙古大学生命科学学院创建国家级生命科学实验教学示范中心的实践体会。阐述了该中心的建设思路与建设规划，总结了该中心在建设过程中的实践与探索。; 刘明秋赵吉朱瑞英牛一丁; 关键词：生物科学实验教学示范中心实验教学改革

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刘明秋

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