刘怀然
- 作品数：93 被引量：253H指数：8
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学建筑科学更多>>
- 2005年～2006年黑龙江省部分地区健康野鸟NDVF基因分子特征
- 将2005年～2006年分离自黑龙江省扎龙自然保护区和哈尔滨周边地区健康野鸟体内的14株新城疫病毒(NDV),通过鸡胚成纤维细胞(CEF)克隆纯化后,每株病毒选择3～4个病毒克隆用于F基因部分核苷酸片段扩增、PCR产物序...
- 刘怀然李东伟刘培欣刘胜旺华育平孔宪刚
- 关键词：新城疫病毒基因型
- 文献传递
- 兔出血症病毒VP60蛋白的原核表达及检测方法初步应用
- VP60是兔出血症病毒(RHDV)的主要结构蛋白,也是免疫原性蛋白,与诱导抗病毒免疫反应直接相关,因而也是检测用首选抗原.本实验在原核系统pPRoEXTMHta中表达了VP60基因,经SDS-PAGE电泳中可见表达带.W...
- 刘怀然胡迎东陈洪岩李昌文关云涛曲连东
- 关键词：兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因原核表达诊断试剂
- 文献传递
- 独立通风笼具环境指标监测系统关键技术与产品研制
- 2021年
- 根据小鼠独立通风笼具(IVC)的使用实际需求,对小鼠IVC环境指标监测系统关键技术和产品进行研究和开发。提出了小鼠IVC环境指标监测系统的整体构架、功能模块的划分、主要功能模块的组成和原理等。本次研发的产品可实时准确地远程监测IVC内的各项环境参数,提升了监测的可靠性与安全性。
- 张宁张宁王伟李昌文李昌文刘怀然唐胜武司昌德司昌德
- 关键词：环境指标监测系统温度相对湿度
- 新城疫流行病学变化及综合防制进展概况
- 新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性、致死性传染病,被国际动物卫生组织(OIE)列为危害禽类的两种A类传染病之一。尽管世界各国对ND采取了严格的防控措施...
- 刘怀然孔宪刚
- 关键词：综合防制组织嗜性
- 文献传递
- 一株新城疫病毒野鸟分离株的生物学特性研究
- 2018年
- 野鸟是新城疫病毒(NDV)重要的自然宿主,在NDV的传播和进化中起着重要作用。Mallard/CH/HLJ127/06是2006年分离自黑龙江省野鸟的一株NDV。本研究对其进行了全基因组序列测定、遗传进化分析、抗原相关性分析;并测定了病毒株毒力指标及致病性特点。结果显示Mallard/CH/HLJ127/06属于class II中的基因VII型病毒株。F蛋白裂解位点为^(112)RRQKRF^(117)。抗原相关性分析表明Mallard/CH/HLJ127/06与基因VII型代表性病毒株之间没有显著的抗原性差异。致病指数MDT (最小致死剂量病毒致死鸡胚的平均时间)值为68 h,ICPI (脑内接种致病指数)值为1.975。致病性试验结果显示,SPF鸡感染Mallard/CH/HLJ127/06后表现明显的临床症状,在感染鸡的脑、气管、肺脏、腺胃、盲肠扁桃体、肾脏和肝脏中均能够检测到病毒的RNA。本研究为进一步研究野鸟在NDV流行病学中的作用及对我国新城疫的防控提供了依据。
- 梁甜甜孙军峰韩宗玺刘胜旺刘怀然
- 关键词：野鸟新城疫病毒生物学特性
- 2011年冬季我国禽群及其环境中新城疫病毒分子流行病学特征
- 引言我国应用以疫苗为主的综合防控措施,控制了新城疫的规模性流行,但其散发的流行病学趋势一直在变化。NDV分子流行病学研究分析、预测病毒变异趋势,为新城疫综合防治提供基础数据。材料与方法188份病毒尿囊液由国家禽流感参考实...
- 刘怀然赵晨辰刘培欣孔宪刚
- 鸽Ⅰ型副粘病毒的分离鉴定及其F基因、HN基因的序列分析
- 利用RT-PCR技术,将从江苏省分离到的2株鸽源NDV的融合蛋白(F)和血凝素神经氨酸酶(HN)基因重要功能区片断进行扩增和序列分析,发现F蛋白多肽裂解位点的氨基酸序列为112K-R-Q-K-R-F117,符合NDV强毒...
- 陈钟鸣刘怀然孙敏华戴鼎震张志成方光远孔宪刚
- 关键词：新城疫病毒F基因HN基因基因型
- 文献传递
- 应用间接ELISA方法检测兔轮状病毒抗体的初步研究被引量：3
- 2003年
- 目的 建立间接ELISA方法对兔轮状病毒抗体进行检测。方法 确定抗原和阴、阳性参考血清的最佳工作浓度 ;进行特异性、敏感性以及中间试验。结果 抗原的最佳工作浓度为 1∶12 0 0 0倍 ;参考血清的最佳工作浓度为 1∶2 0 0倍 ;本次实验建立的ELISA方法具有很好的敏感性和特异性 ;中间实验表明 ,LaRV在兔群中具有很高的感染率。结论 本次试验成功地建立了用于兔轮状病毒抗体检测的ELISA方法。
- 李昌文刘怀然关云涛王云峰夏长友张坦陈洪岩
- 关键词：ELISA法抗原血清
- 兔出血症病毒单克隆抗体的制备及鉴定
- 目的利用杂交瘤技术制备抗兔出血症病毒(RHDV)单克隆抗体,为RHDV检测方法建立及相关研究奠定基础。方法自病料中经蔗糖密度梯度离心法纯化病毒,免疫BALB／c小鼠,以杂交瘤技术制备抗RHDV单克隆抗体,用昆虫细胞表达重...
- 刘怀然秦海斌刘家森司昌德韩凌霞姜骞曲连东
- 关键词：兔出血症病毒单克隆抗体
- 文献传递
- 鸽Ⅰ型副黏病毒的分离鉴定及其F基因、HN基因的序列分析被引量：2
- 2010年
- 利用RT-PCR技术,将从江苏省分离到的2株鸽源NDV的融合蛋白(F)和血凝素神经氨酸酶(HN)基因重要功能区片段进行扩增和序列分析,发现F蛋白多肽裂解位点的氨基酸序列为112K-R-Q-K-R-F117,符合NDV强毒株序列特点。F基因分型及同源性比较显示,分离到的2株鸽源NDVPG-CH-JS-1-05,PG-CH-JS-1-06属基因Ⅵ型。与国内参考毒株YN-P1F基因推导的氨基酸序列同源性最高为96.4%,与LaSota的同源性为84.1%～84.2%,与F48E9的同源性为86.0%～86.2%;与国外参考毒株Warwick66的同源性为92.7%～93.3%;HN基因氨基酸序列同源性比较显示,与PB9601的同源性最低,只有3.4%～3.7%,与LaSota的同源性也较低,为88.5%～88.7%。而与国外参考毒株IT-227-82的氨基酸序列同源性为95.4%～95.6%,与Pigen-NY-US-1984的同源性为94.8%～94.9%,与248VB的同源性为92.5%～92.7%,说明与国外鸽源NDV分离毒株的遗传距离较近。
- 陈钟鸣刘怀然孙敏华戴鼎霞张志成方光远孔宪刚
- 关键词：新城疫病毒F基因HN基因基因型
