刘德琮
- 作品数：9 被引量：29H指数：3
- 供职机构：上海市普陀区人民医院更多>>
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- 检测肌红蛋白的半定量金免疫层析法的研究被引量：6
- 2007年
- 目的建立一种半定量检测人血清肌红蛋白的金免疫层析方法,用于急性心肌梗死的快速检测。方法一株抗人肌红蛋白单克隆抗体标记胶体金,另一株抗人肌红蛋白单克隆抗体包被膜作为检测线,兔抗鼠IgG抗体包被膜作为对照线,建立半定量金免疫层析测定方法。结果本法测定结果分为3个半定量判定区段：〈70、70-150和〉150μg/L;与化学发光免疫测定对照检测83份血清标本,符合性良好。结论金免疫层析测定法具有半定量的特点,方法简便、快速、准确,适用于急性心肌梗死的早期检测。
- 郑佐娅曹丹如陈悦卢仁泉刘德琮朱晴晖陶义训
- 关键词：肌红蛋白金免疫层析法半定量测定
- B淋巴细胞的活化标志及其在慢性肾衰竭的临床意义被引量：1
- 2003年
- 目的 以CD2 3分子作为B淋巴细胞活化的标志 ,观察慢性肾衰 (CRF)维持性血液透析 (HD)患者B淋巴细胞激活状态。方法 以金黄色葡萄球菌CowanI株菌体 (SAC)与健康人外周血单个核细胞 (PBMC)数 5 0∶1的比例 ,以终浓度 5 0 μg/L的佛波醇酯 (PMA)分别培养PBMC 12h、2 4h和 5 0h ;用生物素链霉亲和素免疫细胞化学法 (BSA ICC)检测CD2 3 +细胞百分率 ;以速率散射比浊法检测SAC或PMA刺激 5 0h的上清液中IgG水平 ;以双抗体夹心ELASA检测血清可溶性CD2 3 (sCD2 3 )。结果 未经刺激的健康人和CRF HD患者PBMC中CD2 3 +细胞百分率分别为 ( 6.6± 0 .9) %和 ( 17.9± 3 .7) %差异有显著性 (P <0 .0 1)。健康人PBMC经SAC刺激12h、2 4h、5 0h后CD2 3 +细胞百分率分别为 ( 8.8± 1.7) %、( 13 .0± 1.6) %和 ( 16.2± 1.9) % ,与无药对照管比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;经PMA刺激 12h、2 4h后CD2 3 +细胞百分率分别为 ( 17.0± 2 .3 ) %、( 3 1.5± 2 .9) % ,与无药对照管比较差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1) ;经SAC或PMA刺激 5 0h培养上清液IgG含量分别为 ( 9.1± 4.6) g/L和 ( 14.6± 5 .7)g/L ,后者与无药对照管 ( 7.3± 3 .7g/L)差异有显著性 (P <0 .0 1)。健康人和CRF HD患者血清sCD2 3含量分别为 ( 1.8± 0 .
- 陆青许友山刘德琮朱晴晖
- 关键词：B淋巴细胞慢性肾衰竭
- 检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法的建立及初步应用
- 2006年
- 目的 建立检测细胞内细胞因子的生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法（BSA—ICC）并作临床初步应用。方法 从健康人外周血单个核细胞（PBMC）中富集CD4细胞，加入莫能霉素，用不同浓度的佛波醇酯（PMA）和钙离子载体（A23817）诱导CD4细胞不同时间，比较其胞内表达白细胞介素-2（IL-2）／白细胞介素-4（IL-4）的细胞百分率，确定最适诱生条件；用不同稀释度的IL-2McAb、IL-4McAb、不同浓度的生物素化羊抗鼠IgG（bio-SAMIgG）和辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素（HRP-SA）作棋盘配比试验，确认McAb、bio-SAMIgG和HRP—SA的最适浓度，根据上述结果建立了检测细胞内细胞因子的BSA—ICC法。用所建方法检测20名健康献血员、16例妇科良性疾病和18例妇科恶性肿瘤患者CD4细胞中表达IL-2／IL-4细胞的百分率。结果 诱导CD4细胞胞内表达IL-2和IL-4的细胞最高百分率的PMA和A23817浓度分别为100μg/L和2．0μmol／L，诱导高峰时间分别为5和7h，BSA-ICC法中所用IL-2McAb、IL-4McAb最适稀释度分别为1：20和1：40，bio—SAMIgG和HRP-SA浓度分别为10～15μg/ml和15μg/ml。20名健康献血员、16例妇科良性疾病和18例妇科恶性肿瘤患者CD4细胞中分泌IL-2的细胞百分率分别为（45．90±4．39）％、（37．28±2．67）％和（25．19±3．49）％，分泌IL-4的细胞百分率分别为（10．5±1．50）％、（9．94±1．06）％和（16．13±2．50）％，IL-2^＋CD4^＋／IL-4^＋CD4^＋比值分别为3．65±0．94、3．55±0．76和1．27±0．26。结论 所建方法可用于T辅助（Th）细胞亚型的测定，从而判断Th细胞的极化状态。妇科恶性肿瘤患者Th细胞功能失衡极化，呈Th2反应，可能与恶性肿瘤的发生有关。
- 朱晴晖陆青刘德琮
- 关键词：细胞内细胞因子生物素-链霉亲和素免疫细胞化学法妇科恶性肿瘤
- 重症脑血管病患者血浆阿片肽的变化及其临床意义
- 2004年
- 目的探讨血浆阿片肽与重症脑血管病患者关系及大剂量盐酸纳络酮对阿片肽的影响和临床疗效.方法选择重症脑出血患者78例和脑梗死患者70例随机分成纳络酮组和常规药物组,治疗前后分别测定血浆β-内啡肽、强啡肽的含量并进行神经系统功能缺损评分.结果β-内啡肽值在发病后显著升高(P＜0.01),治疗后均有下降,纳络酮组显著于常规药物组(P＜0.01);强啡肽值在脑出血组有类似变化(P＜0.05),但在脑梗死组中无变化(P＞0.05).纳络酮组的疗效明显优于常规药物组,24小时内用药疗效优于24小时后(P＜0.05).结论两种阿片肽均参与重症脑血管病病理生理过程,并有相异的作用;大剂量纳络酮早期应用有催醒,促进神经功能恢复,减少致残率的作用.
- 林琳周维智朱咏新刘晓红刘德琮
- 关键词：Β-内啡肽强啡肽盐酸纳络酮脑出血脑梗死
- 一种简便的固相单抗富集CD4^+细胞方法被引量：1
- 2002年
- 目的 探索建立一种富集CD4 + 细胞的方法 ,藉以提高免疫细胞化学法计数Th1/Th2细胞的准确性。方法 取 2 1份健康人外周抗凝血 ,无菌条件下分离单个核细胞 (PBMC) ,用CD4McAb包被 2 4孔细胞培养板 ,加入PBMC ,温育后吸弃未结合细胞 ,继而吸打使结合于板上的细胞脱落 ,收集细胞 (阳性选择 ) ;用CD8McAb、CD16McAb、WuBMcAb包被 2 4孔细胞培养板 ,加入PBMC ,温育后吸取未结合细胞 (阴性选择 )。用生物素 链霉亲和素免疫细胞化学法检测富集前及用两种选择方法富集所得细胞中CD4 + 细胞 ,计算百分率、活细胞率和CD4 + 细胞回收率。结果 富集前 2 1份样品的PBMC中CD4 + 细胞百分率 4 3.7%± 3.1% ,经阳性选择和阴性选择后CD4 + 细胞百分率分别为 90 .9%± 2 .8%和 76 .2 %± 2 .5 % ,经卡方检验 ,x2 >x20 .0 0 1,差异有非常显著性 ,阳性选择富集的CD4 + 细胞纯度显著高于阴性选择。经阳性选择和阴性选择后 ,CD4 + 细胞回收率分别为 6 4 .3%± 4 .9%和 6 9.7%± 5 .2 % ,经卡方检验 ,x2 >x20 .0 0 1,差异有非常显著性 ,阴性选择法的细胞回收率明显高于阳性选择法。富集后活细胞率保持在 95 %以上。结论 所建立的固相单抗方法可有效富集CD4 + 细胞并保持很高的活细胞率 ,其中阳性选择是首选方法 ;CD4 + 细?
- 朱晴晖陆青刘德琮
- 关键词：阴性选择
- 快速检测血清HCG的半定量金免疫渗滤法的建立
- 2008年
- 目的建立一种伴有质控点的金免疫渗滤法（GIFA），用于半定量检测血清人绒毛膜促性腺激素（HCG）。方法应用2株抗HCG单克隆抗体，其中一株包被在固相膜上，另一株与胶体金结合，组成金免疫渗滤试剂。膜上另包被2种浓度的HCG，用于测定时的定量质控。结果该方法经HCG标准液测定，结果判定可分为〈50、50-300、〉300 IU／L3个半定量区；94例经化学发光免疫分析系统定量测定HCG浓度的临床血清标本用于本法的比对测定，结果符合性良好。结论该方法具有半定量和内质控的特点，结果可靠，适用于妊娠的早期诊断，方法简便、快速，特别适合中、小医院和门诊部使用。
- 曹丹如陈悦刘德琮朱晴晖陶义训
- 关键词：半定量血清人绒毛膜促性腺激素
- 慢性病贫血的铁代谢研究被引量：14
- 2008年
- 目的:探讨慢性病贫血(ACD)的铁代谢,有利于临床医师提高对该病的诊治水平。方法:对21例ACD和15例缺铁性贫血(IDA)患者进行Hb、血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、血清铁蛋白(SF)、可溶性转铁蛋白受体(sTfR)、骨髓涂片铁染色、EPO、白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-浕(TNF-浕)进行检测,并对结果进行分析。结果:①SI、TIBC、SF和骨髓涂片铁染色对区别ACD和单纯性IDA有很大帮助,2组数据比较差异有统计学意义,P<0.05;②ACD组中存在缺铁(占19.01);③ACD组和IDA组的sTfR水平分别为(2.41±1.20)mg/L和(6.38±3.24)mg/L,2组比较差异有统计学意义,P<0.05;④ACD组EPO水平低于IDA组,而IL-6、IL-8、TNF-浕水平高于IDA组,2组间数据比较除IL-1外,其他细胞因子差异有统计学意义,P<0.05。结论:sTfR是一种新的铁参数,有助于临床医师对ACD与IDA鉴别及合理用药,初步结果显示一些细胞因子在ACD疾病的致病因素中占重要地位。
- 张文龙王曼萍张骥杨昕李莉刘德琮闫杰
- 关键词：贫血慢性病铁代谢
- 快速检测尿微量白蛋白的半定量金免疫渗滤法的研究被引量：6
- 2004年
- 目的 建立一种伴有质控点的金免疫渗滤法 ,用于半定量检测人尿中的微量白蛋白。方法 应用自制的 2株抗人白蛋白单克隆抗体 ,其中一株包被在固相膜上 ,另一株与胶体金结合 ,组成金免疫渗滤试剂。膜上另包被 2种浓度的人白蛋白 ,用于测定时的定量质控。结果 本法经人白蛋白标准液测定 ,结果判定可分为 <30、30～ 10 0、10 0～ 2 0 0、>2 0 0mg/L 4个半定量区 ;12 6例经散射免疫浊度定量测定白蛋白浓度的临床尿标本用于本法的对比测定 ,结果符合性良好。结论 本法具有半定量和质控的特点 ,结果可靠 ,适用于糖尿病、高血压等并发肾病的早期诊断 ,方法简便、快速 ,特别适合中、小医院和门诊部使用。
- 曹丹如张锦锋刘德琮朱晴晖陶义训
- 关键词：尿微量白蛋白质控半定量检测包被胶体金
- 快速检测甲胎蛋白的半定量金免疫渗滤法的研究被引量：1
- 2005年
- 目的 建立一种伴有质控点的金免疫渗滤法(GIFA),用于半定量检测血清甲胎蛋白(AFP).方法 应用2株抗AFP单克隆抗体,其中一株包被在固相膜上,另一株与胶体金结合,组成金免疫渗滤试剂.膜上另包被2种浓度的AFP,用于测定时的定量质控.结果 本法经AFP标准液测定,结果 判定可分为＜30、30～200、＞200 μg/L 3个半定量区;119例经化学发光免疫分析系统定量测定AFP浓度的临床血清标本用于本法的对比测定,结果 符合性良好.结论 本法具有半定量和内质控的特点,结果可靠,适用于原发性肝细胞癌的早期诊断,方法 简便、快速,特别适合中、小医院和门诊部使用.
- 曹丹如郑佐娅张锦锋刘德琮朱晴晖陶义训
- 关键词：血清甲胎蛋白免疫分析系统半定量检测血清标本标准液
