刘广鹏
- 作品数:74 被引量:176H指数:8
- 供职机构:上海市第十人民医院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 应用酶联免疫法检测组织工程骨牛血清白蛋白残余量的实验研究被引量:2
- 2013年
- 目的检测常规体外构建的组织工程骨中牛血清白蛋白残余量,并探讨减少其残留量的方法。方法体外分离培养人骨髓基质干细胞,取第2代细胞(P2)接种于完全脱钙骨支架材料并成骨诱导培养2周,体外构建组织工程骨。成骨诱导液为含10%胎牛血清的条件培养液,并于检测前1天更换为无血清的条件培养液。待测组织工程骨先经1:100(v:v)生理盐水浸洗3次,然后加入磷酸盐缓冲液(PBS),37℃振荡浸提24h,获取浸提液。同法获取未接种细胞的单纯支架材料的浸提液作为对照组。采用酶联免疫法检测样品浸提液中牛血清白蛋白的残余量,比较两者牛血清白蛋白残余量的差异。结果经生理盐水洗涤3次后,洗涤液中的牛血清白蛋白含量明显降低。酶联免疫法测定的组织工程骨与单纯支架材料的牛血清白蛋白残余量分别为(15.57±5.82)ng和(14.85±5.06)ng,单位重量的牛血清白蛋白残余量分别为(0.254±0.088)ng/mg和(0.306±0.079)ng/mg,两组相比均无显著性差异(P>0.05,n=10)。结论酶联免疫法适用于组织工程骨中牛血清白蛋白残余量的检测。因为支架材料较细胞更易吸附牛血清白蛋白,现有条件下构建的组织工程骨牛血清白蛋白残余量仍然较高,需要继续探索降低其残余含量的新方法。
- 邹文焘刘广鹏孙剑崔磊
- 关键词:血清白蛋白酶联免疫吸附测定组织工程骨
- 玻璃化冻存骨髓基质干细胞的实验研究被引量:1
- 2009年
- 目的:骨髓基质干细胞(BMSCs)是构建组织工程化骨主要的种子细胞,实现BMSCs的深低温保存对骨组织工程具有重要意义。目前,玻璃化冻存是最有发展前景的冻存方法,因此希望通过改进玻璃化液和预处理条件来提高BMSCs的玻璃化冻存效果。方法:采用不同组成及浓度的玻璃化液在不同的预处理条件下对第2(P2)代成骨诱导的犬骨髓基质干细胞(cBMSCs)进行玻璃化冻存实验,通过复苏后的细胞存活率来选择一种理想的玻璃化液及适合的预处理条件,并在此基础上再与常规冻存的实验结果进行比较,同时考虑冻存过程对细胞成骨活性的影响。结果:将VS226作为玻璃化液,在0℃/5min的预处理条件下玻璃化冻存P2代成骨诱导的cBMSCs,与常规冻存后的细胞存活率相比无统计学差异,且冻存过程对此细胞的成骨能力没有影响。结论:采用VS226来玻璃化冻存BMSCs,可实现为骨组织工程提供大量种子细胞的目的。
- 尹宏宇孙剑刘广鹏崔磊曹谊林
- 关键词:深低温保存玻璃化冻存骨组织工程骨髓基质干细胞
- 硫酸镁在软组织肿胀疾病中的应用及其含有硫酸镁的眼膜贴
- 本发明涉及硫酸镁在软组织肿胀疾病中的应用。本发明还提供一种消肿贴膜及其应用。其优点表现在:本发明采用硫酸镁溶液湿敷来缓解面部美容整形术后水肿,安全有效、经济方便,也可适用于其他外科术后消肿和/或外伤后软组织肿胀的处理。本...
- 刘广鹏陈烯
- 文献传递
- 术后眼座暴露取出一期自体皮肤脂肪游离的临床研究
- 叶信海刘广鹏谭健许益聘
- Q开关翠绿宝石激光和强脉冲光治疗面部雀斑的疗效和安全性被引量:3
- 2013年
- 目的比较Q开关翠绿宝石激光(Q-switched Alexandrite Laser,QSAL)和OPT(Optimal Pulse Technology)强脉冲光治疗面部雀斑的临床疗效和安全性。方法将100例单纯面部雀斑患者随机分为QSAL组50例,OPT组50例。QSAL组以Q755nm激光仪治疗1次,OPT组以OPT治疗2次,每次间隔4周。治疗结束后第4、12、24周判定临床疗效,第4周统计PIH发生率以判定安全性,24周进行满意度评价。结果 QSAL组患者治疗后第4周,治愈率82%,显效率14%,进步为4%;治疗后第12周,治愈率84%,显效率14%,进步为2%;治疗后第24周,治愈率86%,显效率14%。OPT组治疗1次后第4周治愈率30%,显效率60%,进步为10%;经过2次OPT治疗后第12周治愈率70%,显效率24%,进步为6%;2次治疗后第24周治愈率70%,显效率24%,进步为6%。患者对治疗的满意度评价,QSAL组非常满意率和满意率分别为78%和20%,轻度满意率2%。OPT组非常满意率和满意率分别为80%和20%。QSAL组有2例患者于术后2~4周开始患处出现炎症后色素沉着(Postinflammatory Hyperpigmentation,PIH),占总例数的4%,于6~24个月内消退;OPT组无PIH的病例出现。结论 Q开关翠绿宝石激光和强脉冲光(OPT)均能很好地治疗雀斑,QSAL组激光治疗效果优于OPT组,而OPT的安全性优于QSAL。
- 林和敏刘广鹏周胜杰叶信海
- 关键词:强脉冲光雀斑安全性
- 低温保存对人骨髓基质干细胞在脱钙骨上体外增殖及成骨能力的影响被引量:5
- 2006年
- 目的研究低温保存对人骨髓基质干细胞(BMSCs)在脱钙骨(DBM)上生长特性及成骨能力的影响。方法取3例志愿者骨髓(3~5mL),密度梯度离心、差速贴壁法获得BMSCs。第3代BMSCs在-196℃下保存24h,37℃复苏,测定细胞成活率。低温保存前、后的BMSCs分别用成骨诱导液诱导培养,至90%融合时,收集细胞接种在DBM支架上,并测定细胞在DBM上的粘附率。DiI荧光染料标记BMSCs,例置相差显微镜、荧光显微镜和SEM观察低温保存前、后的BMSCs在DBM上的生长及基质分泌情况,MTT法测定细胞在DBM上的增殖活性。通过测定碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素(OCN)含量观察细胞在DBM上的成骨能力。结果复苏细胞的存活率为(90.24±0.02)%。低温保存前、后的BMSCs在DBM上的粘附率分别为(97.25±1.17)%和(97.00±1.09)%。倒置相差显微镜及SEM观察显示低温保存前、后的BMSCs在DBM上粘附、生长良好,有大量细胞外基质分泌、沉积。低温保存前、后的BMSCs在DBM上MTT吸光度值和ALP活性的检测结果差异无显著性意义(P>0.05);体外培养12d时,MTT吸光度值及ALP活性同时达到峰值。低温保存前、后的BMSCs在DBM上分泌OCN的量差异无显著性意义(P>0.05),OCN含量随着培养时间延长而不断上升,在观察期(16d)内未出现平台期。结论低温保存对人BMSCs在DBM上的体外增殖、粘附及成骨能力影响差异无显著性意义,低温保存的人BMSCs可作为组织工程骨的种子细胞。
- 刘广鹏舒朝锋尹烁李宇琳崔磊曹谊林
- 关键词:骨髓基质干细胞脱钙骨
- 软骨生长板基因调控机制的研究进展被引量:1
- 2006年
- 刘广鹏崔磊曹谊林
- 关键词:生长板纤维细胞生长因子基因调控机制软骨内成骨新骨生成全身因素
- Percoll法分离犬骨髓单个核细胞与体外成骨诱导培养的实验研究被引量:8
- 2007年
- 目的建立犬骨髓单个核细胞(Bone marrow mononuclear cells,BMNCs)的分离培养、体外扩增和成骨诱导方法,为骨缺损的修复提供理想的骨组织工程种子细胞。方法用1.063g/ml percoll液分离2.5ml Beagle犬骨髓,利用细胞贴壁筛选法进行分离、培养、扩增和成骨诱导。结果采用1.063g/ml percoll液可获得纯度较高的BMNCs,接种细胞生长良好,平均倍增周期为1d,经成骨诱导培养后可定向分化为成骨细胞。结论采用1.063g/ml percoll液能够较好的进行Beagle犬BMNCs的分离培养和体外扩增,分离得到的细胞具备骨髓基质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的特性。
- 尹宏宇刘广鹏崔磊曹谊林吕长胜
- 关键词:单个核细胞骨髓细胞培养
- 邻近旋转皮瓣整复下睑瘢痕性外翻的临床研究
- 烧伤或感染后导致疤痕性外翻畸形临床上较为常见,这类畸形虽然有影响美观,但是更为重要的是会影响眼表的功能及外形,进而导致视力下降甚至失明。故治疗有一定的迫切性,治疗方法有改形、植皮、皮瓣及复合组织再造,其中皮瓣最为常用和有...
- 叶信海刘广鹏刘晓强管宇峰谭健
- 关键词:旋转皮瓣瘢痕性
- 文献传递
- 猪脂肪干细胞体外多向分化潜能的实验研究被引量:4
- 2007年
- 目的探讨猪脂肪干细胞(Adipose-Derived Stem Cells,ADSCs)在体外是否具有多向分化潜能。方法从猪项背部皮下脂肪组织中获取ADSCs,经过体外培养扩增至第2代分别进行成软骨细胞、成骨细胞和成脂肪细胞诱导分化,通过免疫荧光和RT-PCR对其相关表型进行检测。结果猪ADSCs在体外成软骨诱导分化2周后有特异软骨基质Ⅱ型胶原和Aggrecan表达,RT-PCR检测显示有Ⅱ型胶原、Aggrecan和Sox-9mRNA的表达;体外成骨诱导分化2周后有与成骨相关的OPN、OCN和ONN表达;体外成脂肪诱导2周后,经油红染色显示细胞内有脂滴形成。结论猪ADSCs在体外具有向成软骨细胞、成骨细胞和成脂肪细胞分化的潜能。
- 伍耀豪崔磊尹烁刘广鹏孙剑
- 关键词:多向分化