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晚期糖基化终末产物受体-核因子κB 信号通路在脂多糖致新生大鼠急性肺损伤的作用被引量：6: 2015年; 目的：探讨晚期糖基化终末产物受体-核因子κB（RAGE-NF-κB）信号通路在脂多糖（LPS）致新生大鼠急性肺损伤（ALI）中的作用。方法32只 SD 新生大鼠完全随机化分为4组，每组8只。（1）LPS 组：腹腔注射9 g/ L 盐水0.2 mL，1 h 后腹腔注射3 mg/ kg LPS；（2）硼替佐米组：腹腔注射0.2 mg/ kg 硼替佐米，1 h 后腹腔注射3 mg/ kg LPS；（3）抗 RAGE 单抗组：腹腔注射15 mg/ kg 抗 RAGE 单抗，1 h 后腹腔注射3 mg/ kg LPS；（4）对照组：在相应的时间点腹腔注射相同容积的9 g/ L 盐水。观察大鼠一般情况，24 h 后麻醉后处死全部动物，酶联免疫吸附法检测血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平；Western blot 检测肺组织 RAGE 及 NF-κB 蛋白的表达；反转录-聚合酶链反应法检测肺组织 RAGE mRNA 及 NF-κB mRNA 的表达；HE 染色观察肺组织病理变化。结果1.血清及 BALF 中 TNF-α水平：4组 TNF-α水平总体差异存在统计学意义（F =150.70，P ﹤0.001；F =165.83，P ﹤0.001）；LPS 组血清及 BALF 中 TNF-α水平最高；与 LPS 组相比，2个预处理组 TNF-α水平均明显下降（P 均﹤0.05）。2.与 LPS 组相比，2个预处理组 RAGE、NF-κB 蛋白均明显下降。3. RAGE mRNA、NF-κB mRNA 表达：4组 RAGE mRNA、NF-κB mRNA 水平总体差异存在统计学意义（F =175.14， P ﹤0.05；F =188.65，P ﹤0.05）。与 LPS 组相比，2个预处理组 RAGE mRNA、NF-κB mRNA 均明显下降（P 均﹤0.05）。4.肺组织病理评分：4组病理评分总体差异存在统计学意义（F =106.01，P ﹤0.001）；LPS 组评分最高，损伤最严重；与 LPS 组相比，2个预处理组评分较低，差异均有统计学意义（P 均﹤0.05）。结论 RAGE-NF-κB 信号途径参与 LPS 诱导的 ALI，抗 RAGE 单抗、硼替佐米对 LPS 诱导的 ALI 有保护作用。; 俞敏唐云赵赛田兆方; 关键词：脂多糖晚期糖基化终末产物受体核因子-ΚB 急性肺损伤

急性肺损伤时损伤标志物的研究进展被引量：17: 2014年; 急性肺损伤(ALI)/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是指心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性的、进行性的呼吸衰竭。ALI阶段若未给予有效的治疗干预则可能进展为ARDS,由于ARDS发病机制复杂,治疗效果不佳,其病死率仍然居高不下。目前ALI仍然缺乏有效的治疗方法,因而针对ALI发病机制及早期诊断方法的研究显得尤为重要。本文将就ALI时损伤标志物的相关研究进行综述,为ALI的早期诊断及以后的相关研究打下基础。; 俞敏田兆方; 关键词：急性肺损伤急性呼吸窘迫综合征生物标志物细胞因子

支气管肺发育不良患儿血清sRAGE检测的临床价值被引量：2: 2014年; 目的 :研究新生儿支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(soluble Receptor for advanced glycation end products,sRAGE)检测的意义。方法:选取新生儿重症监护病房住院BPD患儿45例(轻、中、重组分别为10、16、19例),在病程的不同时期以ELISA法检测血清中sRAGE水平,同时选取匹配非BPD患儿作为对照组。结果:与对照组相比,BPD组血清sRAGE水平明显增高;BPD组中,sRAGE在轻、中、重组间差异也有显著性(F=149.97,P<0.01)。结论:血清sRAGE可作为BPD的诊断和病情轻重评估的敏感指标。; 胡剑赵赛杨丽娟程怀平俞敏唐云田兆方; 关键词：支气管肺发育不良新生儿糖基化终末产物受体

高氧暴露对新生大鼠肺组织巨噬细胞亚型表达的影响被引量：1: 2015年; 目的:研究新生大鼠高氧暴露后不同时期肺组织巨噬细胞亚型的表达情况。方法:将64只新生SD大鼠随机分为对照组和高氧组,每组32只。高氧组采用体积分数为95%的氧暴露7 d,对照组仅置于同一屋子空气环境中(氧体积分数为21%)。采用细胞流式术对暴露后的不同时期(第1、3、7、21天)大鼠支气管肺泡灌洗液(BLAF)内3种亚类的巨噬细胞(经典活化巨噬细胞、调节巨噬细胞和损伤修复巨噬细胞)进行双阳性筛选;光镜观察并盲法评分比较肺组织病理学评分。结果:与对照组相比,高氧组新生鼠体质量明显较低(P<0.05);高氧组各个时间点F4/80+巨噬细胞含量均增高(P<0.05),IL-12表达增加(P<0.05);高氧组于第1、7、21天CD163表达增加(P<0.05),而第3天两组CD163表达差异无统计学意义(P>0.05);高氧组于第1、3、7天IL-10表达增加(P<0.05),第21天两组IL-10表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高氧暴露新生大鼠肺组织存在巨噬细胞亚型表达差异,与肺组织的损伤具有一定的相关性。; 唐云赵赛杨丽娟程怀平俞敏胡剑田兆方; 关键词：巨噬细胞高氧暴露新生大鼠

糖皮质激素对高氧诱导新生大鼠肺组织RAGE-NF-κB通路的影响被引量：6: 2015年; 目的探讨RAGE-NF-κB信号通路在新生大鼠高氧肺损伤过程中的变化,以及糖皮质激素对其的影响。方法 24只新生大鼠随机分为空气对照组、高氧模型组和激素干预组。模型组新生大鼠于生后即暴露于95%氧气浓度环境中1周,空气对照组大鼠生后仅暴露于同室内空气中饲养7 d,激素干预组于造模后行尾静脉注射地塞米松(1 mg/kg),隔天1次,共3次。日龄13 d时处死全部大鼠,RT-PCR检测各组肺组织RAGE m RNA及NF-κB m RNA的表达;Western blot检测RAGE及NF-κB蛋白水平;ELISA法检测血清及肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α和s RAGE含量;苏木精-伊红染色后行肺组织病理学评估。结果与对照组和激素干预组相比,高氧模型组肺组织RAGE、NF-κB的m RNA和蛋白表达水平均明显增高(均P<0.05),血清中s RAGE含量明显升高(P<0.01),BALF中s RAGE含量下降(P<0.01);与对照组相比,激素干预组肺组织RAGE、NF-κB的m RNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),血清中s RAGE含量明显升高(P<0.05),而BALF中s RAGE含量明显下降(P<0.05)。结论 RAGE-NF-κB通路在高氧诱导的新生大鼠肺损伤中活化增强,糖皮质激素可能通过下调RAGE-NF-κB信号通路对高氧肺损伤发挥保护作用。; 胡剑俞敏唐云田兆方; 关键词：糖皮质激素晚期糖基化终末产物受体新生大鼠

晚期糖基化终末产物受体与肺发育及肺损伤被引量：5: 2013年; 晚期糖基化终末产物受体（receptorforadvancedglycationend，RAGE）是细胞表面分子免疫球蛋白超家族的成员之一。作为模式识别受体，它可与多种不同的配体结合。在正常生理状态下，RAGE在大多数组织中一般呈低水平表达，病理状态下其表达上调；而在肺部的I型上皮细胞有较高水平的基础表达，表明其在肺上皮细胞的增殖和分化及保持肺内环境稳态中起重要作用。RAGE在肺部的正常表达遭到破坏可导致多种肺部疾病，如急慢性肺损伤等。它的可溶性形式sRAGE，作为一种诱饵受体，已被证实可作为肺泡I型上皮细胞损伤的重要标志物，说明RAGE在肺的生物学行为中起着重要的作用，并且可能成为肺损伤性疾病治疗的靶点。; 吉萍俞敏田兆方; 关键词：晚期糖基化终末产物受体肺损伤治疗靶点

肺表面活性物质对呼吸窘迫新生儿肺功能的改善作用及其对支气管肺发育不良的防治效果被引量：25: 2014年; 目的:探讨肺表面活性物质对呼吸窘迫新生儿肺功能的改善作用及其对支气管肺发育不良的防治效果。方法:选择呼吸窘迫综合征患儿94例按治疗过程中是否使用肺表面活性物质分为研究组53例和对照组41例,两组患儿明确诊断后均给予常规对症支持治疗,研究组患儿在常规治疗的基础上给予肺表面活性物质治疗,观察两组患儿治疗前后肺功能变化情况,并统计患儿并发症发生情况。结果:两组患儿治疗24、48 h后Pa O2明显上升,Pa CO2明显下降,主要呼吸机参数PIP、PEEP、Fi O2均降低,研究组Pa O2明显高于对照组,Pa CO2、PIP、PEEP、Fi O2均明显低于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);研究组机械通气时间、氧疗时间及住院时间明显短于对照组,两组差异有统计学意义(P<0.05);研究组支气管发育不良发生率及死亡率明显低于对照组(P<0.05)。结论:肺表面活性物质治疗呼吸窘迫新生儿能有效提高氧合功能,改善肺顺应性,缩短氧疗及通气时间,减低患儿病死率,并且可能对减少支气管发育不良有积极意义,值得进一步研究应用。; 胡剑俞敏唐云田兆方; 关键词：新生儿呼吸窘迫肺表面活性物质支气管肺发育不良

小剂量糖皮质激素预防早产儿支气管肺发育不良效果观察被引量：9: 2014年; 目的：观察小剂量糖皮质激素预防早产儿支气管肺发育不良（ BPD）的临床效果。方法将90例出生后10 d仍需机械通气的早产儿随机分为观察组和对照组各45例，观察组静推地塞米松，对照组静推等量生理盐水，总疗程7～10 d。记录两组BPD发病率、呼吸机参数、吸氧时间及不良反应的发生情况。结果观察组BPD发病率为9％，对照组为67％，P＜0．01。观察组机械通气时间、吸氧时间和出生后30 d的体质量均低于对照组，P均＜0．01。两组吸入氧浓度（FiO2）、吸气峰压（PIP）、呼气末正压（PEEP）和平均动脉压（MAP）比较，P均＞0．05。观察组未发生严重激素使用并发症。结论小剂量糖皮质激素可有效预防早产儿BPD的发生，且安全性较高。; 胡剑俞敏唐云田兆方; 关键词：早产儿支气管肺发育不良糖皮质激素小剂量

新生大鼠肺泡Ⅰ型细胞的原代培养及鉴定被引量：1: 2013年; 目的探讨新生大鼠肺泡Ⅰ型上皮细胞(AECⅠ)的分离、纯化及原代培养方法,为主要以AECⅠ损伤为特征的肺部疾病研究提供模型。方法采用弹性蛋白酶联合胶原酶Ⅰ的消化方法,分离肺组织细胞,然后用肺Ⅰ型上皮细胞顶膜蛋白α(T1-α)单克隆抗体及免疫磁珠进行阳性选择的方法纯化AECⅠ,最后进行原代培养;通过锥虫蓝染色检测细胞活力,倒置显微镜观察细胞生长及形态特征,细胞免疫荧光法检测细胞表面特异性抗原的表达。结果每只鼠可获得AECⅠ(1.4±0.4)×106个,纯度90.5%±3.4%,活力93.4%±3.0%。接种于玻璃培养皿48h后倒置显微镜下观察细胞开始粘附伸展,呈克隆样生长,在4～6天时汇合成薄的单层状。免疫荧光显微镜观察新鲜分离的AECⅠ特异标志物水通道蛋白-5(AQP5)阳性,呈现绿色荧光;AECⅡ标志物前表面活性蛋白C(proSP-C)阴性;培养后的AECⅠ免疫荧光染色呈AQP5阳性。结论利用弹性蛋白酶联合胶原酶Ⅰ消化,免疫磁珠进行阳性选择的方法可成功分离出高产量、高纯度的鼠AECⅠ,能满足体外进一步对AECⅠ生理功能的研究,也可为研究AECⅠ损伤修复机制提供细胞培养的模型。; 吉萍俞敏李玉红田兆方; 关键词：原代培养

RAGE与腹腔注射脂多糖诱导新生大鼠急性肺损伤的相关性研究被引量：6: 2014年; 目的:通过腹腔注射途径建立脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,探讨其与肺组织晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end-products,RAGE)的相关性。方法:30只SD新生大鼠随机分为5组,每组6只,根据注射LPS剂量分为0.3、1.0、3.0、9.0 mg/kg组及生理盐水对照组,24 h后观察大鼠的一般情况;ELISA法检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性RAGE(sRAGE)含量;Western blot法检测肺组织RAGE蛋白水平;real time-PCR法检测RAGE mRNA表达水平;HE染色下对肺组织进行病理学评估。结果:LPS 9mg/kg组死亡率高达83.3%,故未计入实验组;其余4组结果显示,TNF-α水平、肺组织RAGE蛋白、mRNA及肺组织损伤评分随梯度剂量的增加而升高,而BALF中sRAGE水平随剂量增加而降低。结论:腹腔注射LPS可以诱导产生新生大鼠的ALI,LPS剂量为3 mg/kg可作为模型最佳诱导剂量;RAGE可作为ALI的敏感指标。; 俞敏赵赛程怀平田兆方; 关键词：脂多糖晚期糖基化终末产物受体肺损伤

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俞敏

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