任尧 作品数:11 被引量:20 H指数:2 供职机构: 四川师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 四川省教育厅重点项目 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
甾体化合物转化菌株Mycobacterium sp.NRRL B-3805链特异RNA-seq分析 胆固醇的微生物分解代谢与病原菌侵染、胞内生存以及甾体药物的绿色合成等密切相关.Mycobacterium sp.NRRL B-3805 是研究微生物转化甾体化合物制备雄烯二酮、雄二烯二酮等甾体药物重要中间体,该菌为新金色... 任尧 葛方兰 何兵 程世君 陈贵英 李维关键词:MYCOBACTERIUM 基因差异表达 非编码RNA γ-聚谷氨酸微孔板微缩发酵与快速测定 被引量:1 2021年 为了有效地筛选获得γ-聚谷氨酸(γ-PGA)高产菌株和便于发酵条件的优化,建立了基于微孔板微缩发酵以及利用酶标仪快速检测γ-PGA的方法。利用单因素实验优化检测条件,优化后的检测波长、温度、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)浓度、反应时间分别为430 nm、25 ℃、15 g/L、2 min,在此条件下构建的标准曲线R^(2)达到了0.9995,与酸水解法的实验结果具有高度的一致性,用此法对不除菌与除菌的发酵液分别进行测定,发现二者无显著性差异;以不同氮源为变量,利用24、48孔深孔板发酵,皮尔逊分析显示实验菌株Bacillus subtilis SCP010-1生长情况与γ-PGA产量均与摇瓶发酵具有良好的相关性。说明利用微孔板进行微缩发酵、随后利用酶标仪对发酵液直接进行检测,可以克服传统检测方法与γ-PGA摇瓶发酵耗时长、试剂消耗量大等不足,在γ-PGA高产菌株筛选和发酵条件优化等方面具有应用价值。 常富城 任尧 加宇星 葛方兰 陈贵英 崔凤娇 房红明 李维关键词:Γ-聚谷氨酸 比浊法 腹腔神经丛阻滞对GK大鼠胰岛素受体底物的影响 2018年 观察NCPB对GK(Goto-Kakizaki,GK)大鼠血糖及胰岛素受体底物的影响.构建25只非胰岛素依赖糖尿病(NIDDM)的雄性GK大鼠,随机抽取5只GK大鼠,以NCPB前表示,先进行口服葡萄糖耐受试验(OGTT),然后处死采取肝组织.其余20只GK大鼠随机分为对照组和NCPB组,每组10只.NCPB组给予双侧质量分数0.5%利多卡因进行NCPB,1 mL/侧,每天1次,而对照组以质量分数0.9%生理盐水替换.分别在14 d和28 d后取对照组和NCPB组各5只GK大鼠进行OGTT实验,通过Western Blot检测对照组和NCPB组肝组织中的胰岛素受体底物-1(IRS-1)、IRS-2表达以及IRS-1磷酸化情况.结果表明:NCPB组在14 d和28 d NCPB处理后,在0、60和120 min时的血糖均显著低于NCPB前(P<0.05或P<0.01)和对照组(P<0.01),而血清胰岛素水平与NCPB前和对照组相差不显著;在14、28 d NCPB后NCPB组肝组织IRS-1和IRS-2蛋白表达水平与NCPB前相比均显著增加(P<0.01),在相应时间点并显著高于对照组(P<0.01);而对照组的肝组织IRS-1丝氨酸307残基的磷酸化水平在14、28 d NCPB后与NCPB前均有所上调(P<0.05),NCPB组在相应时间点丝氨酸307残基的磷酸化程度均较NCPB前显著下降(P<0.01),且均显著低于对照组(P<0.01).NCPB可降低GK大鼠的空腹血糖,减轻GK大鼠糖耐量受损的程度,其机制可能与NCPB提高胰岛素受体底物的蛋白表达和抑制其丝氨酸磷酸化有关. 任尧 牛杨 李军 葛方兰 杨芸 李维 杨永芝 文冬梅关键词:腹腔神经丛阻滞 GK大鼠 胰岛素受体底物 N-末端取代促进人雄激素芳香化酶(CYP19)在大肠杆菌中的异源表达及其酶学特性研究 细胞色素P450芳香化酶19A1 (aromatase,CYP19A1)通过相继的三个反应步骤,催化雄甾化合物产生19-羟基、脱去19位碳、A环芳构化,从而转变为雌甾化合物,它是生物体内雌激素合成的限速步骤。由于细胞色素... 马彩虹 葛方兰 任尧 陈贵英 李维关键词:芳香化酶 大肠杆菌 酶学特性 表达KstD重组大肠杆菌转化甾体化合物的条件优化 被引量:1 2017年 3-甾酮-Δ1脱氢酶是胆固醇降解的关键酶之一,能脱去甾酮C1,2位上的氢原子,形成双键,在甾体药物的合成过程中具有重要的作用.以异源表达3-甾酮-Δ1脱氢酶的重组大肠杆菌为材料,对其培养条件以及黄体酮转化条件进行了优化,实现了甾体化合物的高效转化.首先,对表达3-甾酮-Δ1脱氢酶基因的重组大肠杆菌的培养条件对黄体酮脱氢的影响进行了研究,结果表明,IPTG浓度为0.05mmol/L,在28℃,pH值为7的条件下诱导培养5h,获得最高转化活性的细胞;其次,以优化条件下获得的菌体为催化剂,研究了各种转化条件对底物转化的影响,结果表明,以甲基-β-环糊精为助溶剂,转化温度为37℃,底物质量浓度为6g/L,菌体量为100g/L,pH为7.0,黄体酮的转化率达到99%以上,比优化前的产量提高了2倍,转化率提高近1倍. 任尧 牛杨 王薇伊 葛方兰 李江 杨欣 李维 陈贵英关键词:重组大肠杆菌 黄体酮 姬菇菇脚对红曲霉菌丝生长和产色素的影响 被引量:2 2014年 为调查以姬菇菇脚为底物进行液态发酵生产天然红曲色素的可行性,作者采用平板培养和液态发酵技术,以平板菌落直径、发酵液菌丝体生物量和色素产量为指标,评估姬菇菇脚对紫红曲霉MR02菌丝生长和产色素能力的影响。结果表明,普通培养基添加姬菇菇脚能促进紫红曲霉MR02菌丝体的生长和色素产量的提高;以不同配比的菇脚和大米粉为底物进行培养,在单一菇脚为底物的培养液中测得一定量的菌丝体和红曲色素;以菇脚为底物培养紫红曲霉MR02,其生长特性符合多细胞生物的生长曲线规律;以不同质量分数的姬菇菇脚为底物发酵,菇脚质量分数为12%,培养到第144小时时,菌丝体生物量为5.52 g/L,培养到第216小时时,红曲色素产量为72.92 U/mL。因此,以紫红曲霉MR02为出发菌株,利用姬菇菇脚为底物发酵生产红曲色素是可行的。 苗玉志 任尧 李维 葛方兰关键词:菌丝生物量 红曲色素 耻垢分枝杆菌烯酰辅酶A水合酶编码基因表达分析及其敲除质粒的构建 被引量:2 2015年 胆固醇是某些病原菌胞内生存所必需的碳源和能源物质,而胆固醇的各种代谢酶是潜在的药物作用靶点.烯酰辅酶A水合酶主要参与了脂肪酸的β-氧化循环,但其在胆固醇降解中的作用机理尚不完全清楚.首先对耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis MC2155)进行了全基因组搜索,获得了18个烯酰辅酶A水合酶的候选基因.对在不同甾醇类化合物条件下的转录组测序结果进行了分析,发现18个候选基因差异表达明显,其中位于胆固醇降解基因簇中的MSMEG_5915(ech A19),在胆固醇条件下表达明显上调,MSMEG_5915(ech A19)可能参与了胆固醇的侧链降解.最后,构建了MSMEG_5915的敲除质粒,并对耻垢分枝杆菌进行了基因转化.经PCR快速分子鉴定,MSMEG_5915基因被同源整合于耻垢分枝杆菌染色体上.为进一步揭示MSMEG_5915(ech A19)基因的功能奠定了基础. 任尧 程世君 马彩虹 王薇伊 唐明 李维 葛方兰 陈贵英关键词:耻垢分枝杆菌 转录分析 电转化 胆固醇氧化酶的三相分离及其血清总胆固醇的测定 被引量:1 2014年 对一株胞外胆固醇氧化酶高产菌 COX48进行了三相分离,结果表明:最优分离条件为:硫酸铵异丙醇沉淀,硫酸铵饱和度为70%,异丙醇与发酵上清液的体积比为0.8∶1时,pH 值为9,在20℃下静置30 min,12000 r/min 离心10 min,纯化倍数4.5倍,回收率高达95%.酶动力学方法检测胆固醇氧化酶测定血清总胆固醇含量,其线性回归方程为 y =0.0064x+0.0027,R 2=0.9654,线性范围0~7.16 mmol/L.结果表明了该酶具有作为临床诊断试剂的潜力,并为临床上利用酶动力学方法测定血清总胆固醇含量奠定了实验基础. 王琼 霍影 汪静 张清燕 任尧 葛方兰关键词:胆固醇氧化酶 三相分离 一株胆固醇氧化酶高产菌的分类鉴定及酶学特性的研究 被引量:1 2013年 研究了胆固醇氧化酶酶学特性,并对其产生菌COX4-8进行了分类鉴定.经过细菌形态、生理生化以及16S rDNA分子鉴定,确定其为红球菌属(Rhodococcuse sp.).通过对菌株COD4-8来源的胆固醇氧化酶的酶学性质进行研究,结果表明该胆固醇氧化酶的最适pH值为7.0,最适温度为40℃.该酶催化胆固醇的米氏常数K m为3.5×10-6mol/L.Hg2+抑制酶活的能力最强,Mn2+对酶活的影响最小;而SDS、Tween-80和TritonX-100对酶活力的影响也较小. 王琼 霍影 汪静 葛方兰 张清燕 任尧 李维关键词:胆固醇氧化酶 红球菌属 酶学特性 芽孢杆菌对玉米真菌病害生物防治效果的研究进展 2024年 玉米是世界上三大粮食作物之一,对粮食安全有着重要影响。近年来,随着全球气候变化,耕作机制转变等原因,玉米病害流行,尤以真菌病害为主,严重降低玉米的产量和品质。常用的合成农药易造成环境污染且危害人类健康,而物理防治因成本高等问题防治效果不理想,生物防治因对环境友好等特点逐渐被应用于植物真菌病害防治,玉米主要依赖生防菌进行真菌病害的防治。木霉属、假单胞杆菌属、芽孢杆菌属等多种生防菌被发现具有良好的生防效果,其中芽孢杆菌因在自然界中分布广、能产生抗逆性较强的芽孢且能促进植物生长而被应用于植物病害的防治中。本文综述了玉米几种主要真菌病害的危害及芽孢杆菌应用于玉米叶斑病、穗腐病和纹枯病等真菌病害中的防效,总结了芽孢杆菌对空间和养分的竞争,抗生素、挥发性有机物等抗菌物质的生产和诱导植物抗性的生防机制研究进展,为生防菌剂的联合使用、提高抗菌物质产量提供研究思路。 蒲欣 吴茂华 刘锋 陈松 任尧 何兵关键词:芽孢杆菌 玉米 真菌病害 生物防治 抗菌物质