于静 作品数:11 被引量:77 H指数:3 供职机构: 华东师范大学 更多>> 发文基金: 上海市教育发展基金会“曙光计划”项目 上海市科学技术发展基金 上海市科委重大科技攻关项目 更多>> 相关领域: 环境科学与工程 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
鲫鱼(Carassius auratus)卵黄蛋白原的ELISA检测 被引量:35 2003年 采用Sephadex G-200柱层析从鲫鱼(Carassius auratus)成熟鱼卵中提取卵黄脂磷蛋白并制备抗卵黄脂磷蛋白抗血清.用DEAE-cellulose阴离子交换层析和Sephacryl S-300分子筛凝胶层析相结合的两步层析从经17(-雌二醇诱导的雌鱼血浆中提纯卵黄蛋白原.免疫印迹反应显示卵黄脂磷蛋白和卵黄蛋白原都与抗卵黄脂磷蛋白抗血清有特异的反应.以抗卵黄脂磷蛋白抗血清作为抗体,卵黄蛋白原作为竞争抗原建立了间接竞争法酶联免疫吸附反应(ELISA)方法来检测雄鱼血液中卵黄蛋白原含量.该方法可测的最低浓度为7.8ng/mL,工作范围为0.39~25(g/mL,批内和批间误差分别为6.5%和7.5%. 李康 周忠良 于静 王明山 余晓君关键词:环境雌激素 鲫鱼 ELISA 卵黄蛋白原 氯化铅对鹌鹑的肝脏和肾脏抗氧化酶的影响 重金属化合物氯化铅(PbCl2)作用于鹌鹑(Coturnix coturnix)后,发现其肝脏、肾脏中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH —Px)的活性与PbCl2剂量的相关特征.... 王明山 任华 于静 申丽娜 唐思贤 周忠良关键词:肝脏 肾脏 抗氧化酶 鹌鹑 文献传递 南京国民政府初期的私立中学校长群体
——基于1930年数据的统计考察 论文以《全国公私立中等学校名称及分布概况(1930)》一书中私立中学校长群体的信息为基础,参证其他史料,通过历史文献法、类型分析法和量化考察法,对南京国民政府初期的私立中学校长群体进行考察,剖析该群体在区域、学历、年龄、... 于静关键词:南京国民政府初期 校长群体 年龄分布 女性校长 体内筛选法得到的肝癌组织特异性粘附肽及其用途 一种肿瘤导向治疗中的能特异性结合肝癌组织/细胞的粘附肽以及该粘附肽的应用,属于分子药理学技术领域。本发明提供的三种肝癌组织/细胞的粘附肽的多肽序列为:序列一:NH<Sub>2</Sub>-A-G-K-G-T-P-S-L-... 钱旻 周忠良 章平 杜冰 于静 郁萌文献传递 体内筛选法得到的肝癌组织特异性粘附肽及其用途 一种肿瘤导向治疗中的能特异性结合肝癌组织/细胞的粘附肽以及该粘附肽的应用,属于分子药理学技术领域。本发明提供的三种肝癌组织/细胞的粘附肽的多肽序列为:序列一:NH<Sub>2</Sub>-A-G-K-G-T-P-S-L-... 钱旻 周忠良 章平 杜冰 于静 郁萌文献传递 肝癌特异性黏附肽的鉴定和分析 被引量:2 2006年 利用体内噬菌体随机肽库技术筛选出肝癌特异性噬菌体肽A54,随后用化学合成法在体外合成该多肽,并标记荧光素和生物素,在组织和细胞水平对该肽进行了体内外肝癌特异性的鉴定及其抗原定位。将生物素(Biotin)标记的A54肽通过尾缘静脉注射入荷瘤裸鼠体内,通过免疫组化方法,检测A54肽与肝癌组织特异性结合的情况;并用免疫荧光细胞化学技术,对荧光素(FAM)标记A54肽进行了细胞水平的肝肿瘤特异性鉴定及抗原定位。体内外检测结果表明,A54肽仍保留了特异性识别肝癌组织的特性,且结合于肝癌细胞的膜表面。实验证明,化学合成的多肽,在体内仍然具有靶向肝癌细胞膜表面的作用,这进一步证明了筛选出来的目标噬菌体克隆其特异性靶向作用确实是由其表面插入的小分子多肽所介导的,为肝癌特异性导向药物载体的研究提供了科学依据。 吴淼 杜冰 汪磊 周忠良 钱旻 于静关键词:免疫组化 抗原定位 利用体内噬菌体展示技术筛选肝癌组织特异性结合肽 被引量:14 2005年 目的筛选人源肝癌组织特异性结合短肽。方法体外培养人源肝癌细胞株BEL-7402,建立荷瘤裸鼠模型。尾静脉注射噬菌体12肽文库至荷瘤裸鼠体内,循环20 m in后回收肿瘤组织中噬菌体,同时取正常对照组织进行噬菌体效价测定和免疫组化观察。将回收的噬菌体扩增、纯化,并以此作为起始物进行下一轮筛选。经过3轮体内筛选,得到与肝癌组织或细胞特异结合的肽段。随机挑选噬菌体单克隆进行测序,分析序列同源性后进行体外细胞酶联免疫吸附试验(ELISA)和体内回输实验,验证噬菌体克隆的导向性。结果经过3轮体内筛选,瘤组织中噬菌体的回收率逐步提高,回收量随着输入量的增加迅速增加,而每轮筛选肝组织中的噬菌体回收量始终保持在一个恒定范围,并不随输入量的增加而增加。免疫组化结果显示,第3轮筛选后,瘤组织中的噬菌体得到高水平富集,同时其他组织的非特异性结合降至最低。肝癌细胞特异性结合最强的是A54号单克隆,A67、B2号单克隆次之。B2的导向效果最好,A54次之。通过对噬菌体单克隆的序列分析,初步确定了PSS/PTT基序。结论利用体内噬菌体展示技术,可以成功筛选到与肝癌细胞或组织特异结合的噬菌体肽。 杜冰 于静 周忠良 章平 郁萌 钱旻关键词:肽库 肝肿瘤 特异性结合肽 壬基酚对鲫鱼(Carassius auratus)的雌激素效应研究 被引量:32 2004年 实验研究了环境雌激素4-壬基酚(NP)对鲫鱼(Carassiusauratus)的剂量-效应关系。雄性鲫鱼腹腔注射不同剂量的17β-雌二醇(E2)(质量分数分别为0 01,0 10,1 00mg kg(注射剂量 鱼体重,下同))和4-壬基酚(NP)(质量分数分别为1,10,50,100,200mg kg),用ELISA方法测定鲫鱼血浆中卵黄蛋白原含量。结果显示,与对照相比,在注射后14d内,0 01mg kgE2处理组和1 00mg kgNP处理组鲫鱼血浆卵黄蛋白原含量没有显著差异;其他各处理组在注射后8d,血浆卵黄蛋白原含量显著升高(P<0 05),且与暴露浓度呈依赖关系;注射后14d,10,50,100和200mg kgNP处理组的含量依次是对照组的10,59,340和435倍。研究表明,NP对鲫鱼具有明显的雌激素效应。 周忠良 李康 于静 孙竹筠关键词:4-壬基酚 鲫鱼 卵黄蛋白原 肝癌组织特异性黏附肽的筛选 目前恶性肿瘤的治疗在很大程度上依赖于传统的手术治疗、药物治疗(即化疗)和放射治疗,在临床应用中这些方法的局限性和毒副作用也日益明显,因此发展一种特异性强、免疫原性低的导向分子就成为了肿瘤治疗的当务之急。为了寻找能够特异性... 杜冰 于静 范春妹 周忠良 章平 郁萌 钱旻文献传递 肝癌组织特异性粘附肽、体内外结合筛选方法及其用途 一种能特异性结合肝癌组织/细胞的粘附肽、该粘附肽的筛选方法以及该粘附肽的应用,属于分子药理学技术领域。本发明提供的体内外结合的筛选方法,兼备了体内和体外筛选的优点,克服了其缺点,筛选出两种肝癌组织/细胞粘附肽,并测定了其... 钱旻 周忠良 章平 杜冰 于静 金怡 郁萌文献传递