于慧敏 作品数:200 被引量:308 H指数:10 供职机构: 清华大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 “九五”国家科技攻关计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 化学工程 生物学 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
重组红色红球菌及其构建方法和应用 本申请属生物技术、生物催化、基因工程领域,尤其涉及一种基因工程红色红球菌及其构建方法和应用。构建方法包括如下步骤:构建目标基因片段及其表达增强基因片段的融合表达载体;将融合表达载体转化至红色红球菌,构建重组红色红球菌;目... 于慧敏 杜岩 陈博 王苗苗诺卡氏菌腈水合酶基因在毕赤酵母中的克隆表达 <正>丙烯酰胺主要用于制造各种类型的聚丙烯酰胺,而聚丙烯酰胺则在石油、水处理、造纸、采矿、洗煤等工业生产中具有非常广泛的应用。但在目前微生物法利用腈水合酶转化丙烯睛生产丙烯酰胺的工艺中,普遍存在菌种的腈水合酶酶活稳定性差... 于慧敏 史悦 孙旭东 沈忠耀文献传递 耦合末端盐桥与定点突变的重组腈水合酶催化动力学 2014年 双亚基腈水合酶是催化丙烯腈水合生产丙烯酰胺的重要工业酶。通过Discovery Studio 2.5软件对C-末端盐桥耦合定点突变改造的耐热型基因重组腈水合酶NHaseM-TH-SBM(S344K-S346K-L347E-N362S-435DT436(+))进行盐桥网络分析,发现其全局盐桥总数有所下降,但双亚基界面间盐桥数量提高到7个。在重组大肠杆菌中表达了原腈水合酶NHaseM-TH(TH)、盐桥突变酶NHaseM-TH-SB(SB)和盐桥耦合定点突变的重组酶NHaseM-TH-SBM(SBM),研究了3种酶的催化反应动力学和失活动力学。结果表明,SBM的腈水合酶活性为543.9 U·mg?1,比TH提高了31.0%;其米氏方程催化速率常数Kcat比TH提高了20%。SBM的表观失活常数KD在25~42℃范围内均明显低于对照TH,在42℃时为TH的68.0%,显示了良好的热稳定性。SBM是活性和稳定性同时提高的重组腈水合酶。 陈杰 贾旭 于慧敏 罗晖 沈忠耀关键词:腈水合酶 定点突变 反应动力学 失活动力学 一种高丙烯酰胺和丙烯腈耐受性产腈水合酶工程菌及应用 本发明公开了一种属于工业微生物技术领域的高丙烯酰胺和丙烯腈耐受性的产腈水合酶工程菌、该工程菌的构建方法及其在微生物法生产丙烯酰胺中的应用。该工程菌是以高产腈水合酶且利用腈水合酶生产丙烯酰胺的菌株为出发菌株,在该工程菌中额... 于慧敏 马玉超 沈忠耀基因工程技术在工业生物技术产品生产中的应用 在'生物经济'时代即将到来的今天,工业生物技术已经成为当今生物技术产业化关注的热点.不仅是因为它环境友好、节能低耗,多能高效,而且可以利用可再生资源为原料,符合当今经济可持续发展的理念.在这个有人把它称之为生物技术产业化... 沈忠耀 于慧敏 罗晖 史悦 孙旭东关键词:基因工程 工业生物技术 可再生资源 生物技术产业化 生物化工 文献传递 微生物细胞工厂生产化学品的研究进展——以几种典型小分子和大分子化学品为例 被引量:1 2021年 微生物细胞工厂的创制和优化改造是绿色生物制造的重要内容。基于构建高效微生物细胞工厂的主要使能技术及其新发展,以几种典型小分子和大分子化学品为例,综述了微生物细胞工厂生产化学品的研究进展。讨论了启动子工程、代谢流分析等经典的使能技术和CRISPR基因编辑、诱变耦合高通量筛选、基于人工智能的生物信息学等新技术对于微生物细胞工厂构筑的重要作用。分别以有机醇、有机酸、有机胺小分子和多糖、聚酯类生物大分子的微生物合成为例,分析了如何面向不同特点的产物分子,设计实施不同的基因改造策略,并概述了近年来代表性菌株的生产性能。进一步展望了未来微生物细胞工厂生产化学品的总体发展趋势和应用前景。 郑煜堃 孙青 陈振 于慧敏关键词:代谢工程 大宗化学品 大分子 一种生产7-氨基头孢烷酸的方法及其专用重组酶 本发明公开了一种生产7-氨基头孢烷酸的方法及其专用重组酶,目的是提供一种具有戊二酰基-7-氨基头孢烷酸酰化酶和D-氨基酸氧化酶活性的重组酶及其编码基因,利用该重组酶催化头孢菌素C直接生产7-氨基头孢烷酸的方法。本发明所提... 罗晖 李强 于慧敏 沈忠耀文献传递 多肽及其用途 本申请涉及生物技术、基因工程领域,尤其涉及一种多肽及其用途。该多肽,多肽,其长度为20aa‑50aa,氨基酸序列如下所示:M(X)<Sub>n</Sub>‑RX‑(X)<Sub>m</Sub>(A)<Sub>p</Sub... 于慧敏 杜岩 梁有向 王苗苗 陈博一种基因工程红球菌及其构建方法与应用 本发明公开了基因工程技术领域的一种基因工程红球菌及其构建方法与应用。其中的基因工程红球菌构建的方法,是基于CRISPR/Cas9的基因编辑方法,基因敲除效率高,能实现无痕敲除,以及基因叠加敲除,为红球菌的基因改造提供了高... 于慧敏 梁有向 焦松 唐玲珺文献传递 一种头孢菌素C酰化酶及其载体和应用 本发明公开了一种CPC酰化酶,该酶的编码基因为SEQ ID NO:4所示的DNA序列以及与它具有80%以上同源性的DNA序列。本发明还公开了含有编码CPC酰化酶的载体和转化体以及该酶的用途。该酶表达活性高、催化活性高、并... 于慧敏 宋文斯 安明 罗晖 沈忠耀文献传递