于亮
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
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- 整合素连接激酶在胃癌细胞中的表达及其抑制剂对胃癌细胞生长的影响被引量：3
- 2019年
- 目的观察整合素连接激酶(ILK)在胃癌细胞中的表达以及使用ILK小分子抑制剂对胃癌细胞增殖侵袭和下游信号通路产生的影响。方法蛋白质印迹法(Western blot)检测6株胃癌细胞和正常胃黏膜上皮细胞中ILK蛋白表达;噻唑蓝(MTT)实验和平板克隆形成实验检测ILK小分子抑制剂Cpd22对AGS和MKN1细胞株的增殖影响;Transwell实验检测ILK抑制剂对这两株胃癌细胞侵袭的影响;Western blot检测ILK受到抑制后胃癌细胞中磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)以及磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)蛋白水平的改变。应用GraphPad Prism7统计分析作图,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用Student’s t检验分析。结果ILK抑制剂作用于胃癌细胞后增殖明显受到抑制[MTT:AGS实验组(0.741±0.005)比对照组(1.000±0.028),t=8.967,P<0.05;MKN1实验组(0.726±0.024)比对照组(1.000±0.020),t=8.745,P<0.05。平板克隆:AGS实验组(311.000±18.560)个,对照组(804.000±15.39)个,t=20.450,P<0.05;MKN1实验组(220.700±4.807)个,对照组(536.600±20.950)个,t=14.680,P<0.05]。ILK抑制剂可以抑制胃癌细胞侵袭能力[AGS:实验组(17.500±0.957)个,对照组(59.500±1.555),t=23.000,P<0.05;MKN1:实验组(29.500±1.708)个,对照组(78.000±3.559)个,t=12.290,P<0.05]。ILK抑制剂降低胃癌细胞p-Akt和p-GSK3β表达,结果差异有统计学意义(p-Akt:AGS0h为0.780±0.039,48h为0.484±0.003,t=8.058,P<0.05;MKN10h为0.670±0.007,48h为0.301±0.004,t=46.530,P<0.05;p-GSK3β:AGS0h为0.847±0.040,48h为0.199±0.011,t=15.710,P<0.05;MKN10h为0.828±0.039,48h为0.315±0.015,t=12.830,P<0.05)。结论ILK在胃黏膜上皮细胞及胃癌细胞中都有表达,ILK小分子抑制剂可以抑制ILK的功能,影响胃癌细胞的增殖和侵袭能力,并且这些变化与PI3K/Akt通路及p-GSK3β的表达明显相关。
- 季承博刘友东顾琦晟于亮李继坤
- 关键词：胃癌整合素连接激酶增殖蛋白激酶B
- 趋化因子受体CXCR4在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系被引量：2
- 2008年
- 目的观察趋化因子受体CXCR4在结直肠癌组织中的表达及其临床意义，探讨基质衍生因子SDF-1（CXCL12）-CXCR4生物学轴在结直肠癌侵袭转移中的作用。方法免疫组织化学法检测53例结直肠癌组织及27例正常黏膜组织中CXCR4的表达及分布，并分析高表达CXCR4与结直肠癌患者临床病理特征的关系。反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Western印迹方法检测27例结直肠癌肿瘤组织、正常黏膜及5例肝转移灶内CXCR4 mRNA表达及CXCR4蛋白表达水平。结果53例结直肠癌组织中CXCR4表达阳性率为73．6％，高表达率（表达超过50％细胞）为45．3％；有淋巴结转移组CXCR4高表达率（65．4％）明显高于无淋巴结转移组（25．9％）（P〈0．01）。并与肿瘤血管淋巴管浸润有关。随着临床分期的增加，肿瘤组织中CXCR4高表达率有升高趋势，但差异无统计学意义（P〉0．05）。CXCR4的表达与患者肿瘤部位、大小、浸润深度无关（P〉0．05）。27例新鲜结直肠癌组织中CXCR4mRNA及蛋白表达水平明显高于相应的正常黏膜组织（P〈0．01）；5例肝转移灶组织中CXCR4表达显著高于对应的原发灶（P〈0．01）。结论趋化因子受体CXCR4是一类参与结直肠癌病程进展的重要分子，CXCL12-CXCR4信号通路有望成为结直肠癌治疗的新靶点。
- 于亮沈云李继坤孙昱皓王一成张建海
- 关键词：结直肠肿瘤受体趋化因子CXCR4肝转移
- 胃癌组织中Runx3基因启动子甲基化及其蛋白的表达被引量：1
- 2008年
- 目的探讨胃癌组织中Runx3基因启动子甲基化与其蛋白表达的相关性，并分析Runx3基因异常甲基化与胃癌临床病理因素的关系。方法分别采用甲基化特异性聚合酶链反应技术及免疫组织化学方法检测40例胃癌及其配对正常胃黏膜组织中Runx3基因启动子区的甲基化状态和Runx3蛋白表达。结果胃癌组织中Runx3基因启动子区甲基化发生频率（55．0％）明显高于正常胃黏膜组织（12．5％）（P〈0．01）；胃癌组织中Runx3蛋白表达阳性率（37．5％）明显低于正常胃黏膜组织（100％）（P〈0．05）；Runx3基因甲基化与肿瘤的组织分化程度、淋巴结转移数目及TNM分期密切相关（P〈0．05，P〈0．01）。结论启动子区高甲基化是胃癌组织中Runx3基因表达失活的主要机制，有望成为胃癌分子诊断和病期评估的标志之一。
- 李利义李继坤沈云于亮张建海
- 关键词：胃肿瘤甲基化
- 超氧化物歧化酶2基因在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞生物学行为的影响被引量：5
- 2018年
- 目的观察超氧化物歧化酶2（SOD2）在胃癌组织的表达以及沉默SOD2基因对胃癌细胞增殖生长和活性氧产生的影响。方法免疫组织化学染色法检测66例胃癌组织及配对癌旁组织中SOD2蛋白表达；Western blot检测6株胃癌细胞和正常胃黏膜上皮细胞中SOD2蛋白表达及转染小分子干扰RNA siSOD2后胃癌细胞株MKN1、NUGC4中的SOD2表达；用细胞计数试剂盒（CCK-8）实验和细胞活性氧（ROS）检测实验分别检测沉默SOD2基因的两株胃癌细胞株增殖以及ROS产生。结果胃癌组织和配对癌旁组织中SOD2表达阳性率分别为72.7%（48/66）和40.9%（27/66），两者差异有统计学意义（χ^2=13.617，P=0.000）。6株胃癌细胞株的SOD2蛋白表达水平明显高于正常胃黏膜上皮细胞GES1，差异有统计学意义（tMKN1=23.062，PMKN1=0.002；tMKN45=5.648，PMKN45=0.030；tNUGC3=26.613，PNUGC3=0.001；tNUGC4=17.103，PNUGC4=0.003；tAGS=39.475，PAGS=0.001；tN87=37.677，PN87=0.001）。MKN1、NUGC4胃癌细胞沉默SOD2基因72 h和96 h后，增殖能力明显低于阴性对照组（MKN1，t72 h=6.329，P72 h=0.001；t96 h=10.487，P96 h=0.000）、（NUGC4，t72 h=5.551，P72 h=0.003；t96 h=6.304，P96 h=0.001）。同时MKN1、NUGC4胃癌细胞沉默SOD2基因后的ROS水平均显著高于阴性对照组，分别为195.341±10.71、99.439±9.311（t=11.295，P=0.001）和181.561±14.502、97.876±12.867（t=23.476，P=0.000）。结论SOD2在胃癌中高表达，同时沉默SOD2基因表达可以抑制胃癌细胞增殖并且产生过量ROS。
- 王小俊刘友东季承博顾琦晟于亮李继坤
- 关键词：胃癌活性氧增殖
