四川农业大学动物医学院猪病研究中心
- 作品数：90 被引量：173H指数：7
- 相关作者：张亮陈杰陈广力付丹杨尧更多>>
- 相关机构：西南医科大学基础医学院北京农学院动物科学技术学院川北医学院实验动物中心更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项四川省科技计划项目国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 四川猪传染性胸膜肺炎放线杆菌耐药基因流行规律与表型相关性研究被引量：5
- 2021年
- 【目的】掌握四川省部分规模化养猪场猪传染性胸膜肺炎放线杆菌耐药基因流行规律与耐药表型相关性。【方法】对疑似患有猪传染性胸膜肺炎的病猪肺脏组织进行细菌分离鉴定和生化试验,并对分离株进行系统进化分析、耐药表型和耐药基因的检测。【结果】从病变肺脏组织分离到11株疑似猪传染性胸膜肺炎放线杆菌菌株,呈革兰氏阴性短杆状,生化试验和DNA分子生物学鉴定11株分离株为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。11株分离株呈多重耐药现象,对四环素和多西环素耐药率为90.90%;对盐酸林可霉素、复方新诺明和链霉素耐药率为54.55%;对盐酸克林霉素、庆大霉素、氯霉素和氟苯尼考耐药率为27.27%;对卡那霉素和红霉素耐药率分别为18.18%和9.10%。检测到sul3、tetB、tetC、ermB、floR、ant(6')-Ia、aph(2'')-Id和aac(6')-Ie-aph(2'')-Ia 8种耐药基因,携带率分别为100%、40.0%、100%、100%、100%、85.7%、14.3%和14.3%,与耐药表型相符。【结论】该地区规模化养猪场发生呼吸道感染死亡育肥猪细菌性病原是猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,表现为多重耐药;分离株携带较多的耐药基因且与表型一致,为该病的防控和临床用药提供了科学依据。
- 王佳凡郑博文杨超马晓平曹三杰黄小波
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌耐药表型耐药基因
- 猪肺泡巨噬细胞HSP70蛋白促进日本乙型脑炎病毒增殖研究
- 引言HSP70是热休克蛋白家族成员,在细胞中发挥压力诱导蛋白合成作用,并且近来大量研究认为HSP70是一个重要的宿主细胞蛋白,能够调节病毒的生命周期。我们前期研究发现,日本乙型脑炎病毒(JEV)可以通过呼吸道感染传播,且...
- 徐炜民柴春霞文心田曹三杰黄小波赵勤文翼平颜其贵杜森焱伍锐
- 猪流行性乙型脑炎的流行与防控
- 2020年
- 猪流行性乙型脑炎,是由流行性乙型脑炎病毒(JEV)引起的猪、人和其他动物的一种急性、热性人兽共患传染病。该病主要在每年7-9月通过传播媒介蚊子而多发。我国是该病的高发区,在多数省区存在该病人和动物的流行,如在我国河南、浙江、吉林、辽宁、黑龙江和内蒙古、四川、重庆等省区均有不同程度的流行,分子流行病学调查表明:近年来猪群流行的JEV以基因1型为主。该病发生猪群具有感染率高、发病率低的特点,猪群感染后主要表现为繁殖障碍,母猪发生流产、早产、死胎,公猪发生睾丸炎,表现为睾丸肿胀;本病的预防措施主要有:灭蚊、免疫猪乙脑减毒活疫苗或灭活苗,本病常用的快速诊断方法有:分子生物学诊断方法(RT-PCR等)血清学诊断方法(ELSA)和病毒分离技术等。
- 曹三杰
- 关键词：流行性乙型脑炎病原学防控措施
- 我国副猪嗜血杆菌病的流行及防治特点
- 本文系统总结了我国副猪嗜血杆菌(HPS)病的流行特点：一是近年来我国副猪嗜血杆菌(HPS)病流行广泛危害严重.主要体现,第1是病原学调查在全国多个省区均能成功分离副猪嗜血杆菌(HPS),且分离率多为28.3％～42.63...
- 曹三杰文翼平
- 关键词：副猪嗜血杆菌病
- 口蹄疫病毒一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：1
- 2014年
- 目的建立一种能快速、高效、敏感、特异地检测口蹄疫病毒（FMDV）的一步法荧光定量RT—PCR检测方法。方法根据FMDV聚合酶3D基因序列比对结果，设计特异性引物和MGB探针；通过优化，得到最佳反应体系和反应条件；分别以质粒和病毒RNA为模板，构建标准曲线；并进行特异性、敏感性、重复性试验。
- 李金海李兴玉曹三杰
- 关键词：PCR检测方法口蹄疫病毒荧光定量一步法最佳反应体系
- 四川部分地区猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体检测结果分析被引量：4
- 2022年
- 猪瘟(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)是危害我国养猪业的两类重要的传染性疾病,为了评估四川部分地区规模化养殖场猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫效果,本研究采用酶联免疫方法(ELISA)对四川成都、广元、攀枝花、内江四个猪场送检的213份猪血清样本进行了CSFV和PRRSV抗体检测。结果表明:有168份血清CSFV免疫抗体阳性,阳性率为78.87%,四个猪场中阳性率最高为89.80%,最低为63.93%;162份PRRSV抗体阳性,阳性率为76.06%,四个猪场中阳性率最高为93.15%,最低为57.38%。按不同猪群统计显示,母猪及公猪群体的猪瘟疫苗免疫效果较好,仔猪群体具有较好的母源抗体,而保育猪猪瘟免疫抗体数据较差,提示仔猪猪瘟的免疫程序及免疫剂量需要进行调整。猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体中母猪免疫抗体效果差异明显,提示部分养殖场母猪的免疫程序及免疫剂量需进行调整。本研究结果可以为四川地区规模化养殖场CSFV与PRRSV防控提供技术支撑。
- 罗成刚黄小波袁蓉王定国
- 关键词：猪瘟猪繁殖与呼吸综合征抗体免疫效果
- 致倦库蚊成蚊吸食血餐和感染乙型脑炎病毒前后中肠细菌多样性分析被引量：1
- 2023年
- 【目的】为了研究致倦库蚊Culex quinquefasciatus成蚊吸食血餐及感染乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)前后的中肠细菌多样性及差异,更深层次地揭示致倦库蚊与其中肠细菌之间的关系,以及血液消化和病毒感染期间中肠细菌发生变化的原因。【方法】提取吸食糖水(10%蔗糖溶液)、不含JEV血餐和含JEV血餐的致倦库蚊成蚊中肠细菌基因组DNA,PCR扩增中肠细菌的16S rDNA高变区序列,采用Illumina NovaSeq6000测序平台进行测序并进行生物信息学分析;提取吸食不含JEV血餐和含JEV血餐的致倦库蚊成蚊中肠总RNA,使用RT-qPCR检测中肠中抗菌肽(antimicrobial peptide,AMP)基因CqAttacin,CqCecropin,CqCecropin A,CqDefensin A和CqDefensin C表达量。【结果】致倦库蚊成蚊吸食血餐前后的中肠细菌共有204个扩增子序列变体(amplicon sequence variants,ASVs),归属于4门9纲17目27科36属;感染JEV前后的致倦库蚊中肠细菌共有120个ASVs,归属于6门13纲23目38科47属。在属水平上,伊丽莎白金菌属Elizabethkingia作为优势菌属普遍存在于各中肠细菌中;肠杆菌属Enterobacter在吸食血餐后第2天时的致倦库蚊成蚊中肠中丰度最高,摩根氏菌属Morganella、根瘤菌属Rhizobium和鲍特氏菌属Bordetella则主要存在于感染了JEV的致倦库蚊成蚊中肠内。吸食糖水与吸食血餐后第2天时的致倦库蚊成蚊中肠细菌代谢通路差异最大,主要差异代谢通路是磷酸转移酶系统、铁载体类非核糖体肽的生物合成、N-聚糖生物合成、脂肪酸生物合成以及一些氨基酸的代谢通路。感染与未感染JEV的致倦库蚊成蚊中肠菌群存在差异,且感染JEV后中肠细菌丰富度更高。吸食血餐使致倦库蚊成蚊中肠中抗菌肽基因CqAttacin,CqCecropin,CqDefensin A,CqDefensin A和CqDefensin C表达量与吸食糖水的对照组的相比上调,而感染JEV使抗菌肽基因CqCecropin A,CqDefensin A和CqDefensin C表达量与吸食不含JEV血
- 徐昌豪朱茜和易刘雨薇黄裕恬李睿冬曹三杰黄小波颜其贵伍锐文翼平郎一飞赵勤赵珊王一平胡雅劼杜森焱
- 关键词：致倦库蚊细菌多样性乙脑病毒
- 猪乙型脑炎病毒基因Ⅰ型弱毒株免疫小鼠后诱导INF-γ的能力
- 目的：评估基因Ⅰ型猪乙型脑炎病毒弱毒株(SCYA201201株)作为候选疫苗诱发机体产生细胞免疫的能力.方法：将基因Ⅰ型猪乙型脑炎弱毒株(SCYA201201株)腹腔免疫小鼠后使用ELISA检测试剂盒测定早期的INF-γ...
- 王侨柴春霞冯瑶曹钰莹邓李霜文心田曹三杰黄小波伍锐文翼平赵勤
- 关键词：弱毒株干扰素-Γ
- 副猪嗜血杆菌qseB、qseC双基因缺失株的构建及生物学特性被引量：2
- 2022年
- QseBC双组分系统(QseBC two-component regulatory systern)与细菌中的群体感应相关,是肠杆菌科和巴斯德氏菌科中的全局性毒力调控因子,但在副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis)中的作用还不清楚。本研究利用自然转化法构建SC1401的双基因缺失株(ΔqseBC)。比较缺失株(ΔqseBC)与野毒株(SC1401)的抗血清杀菌能力、生物膜形成、抗生素耐药性以及压力耐受能力。结果表明:ΔqseBC的生物被膜形成能力明显弱于SC1401。缺失株ΔqseBC的在猪血清中的存活率为55.12%,低于野毒株SC1401(83.76%)。ΔqseBC对恩诺沙星、庆大霉素、头孢噻呋和青霉素的最小抑制浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)明显下降。ΔqseBC对39和42℃高温,1、2、4、8和16 mmol·L^(-1)H2O2,以及50、100和150 mmol·L^(-1)NaCl表现出更高的敏感性。综上表明,QseBC双组分系统在副猪嗜血杆菌的血清抗性、抗生素抗性和胁迫耐受性中发挥了重要作用。QseBC可能与副猪嗜血杆菌的致病能力密切有关,但其具体机制还需要进一步研究。
- 何绿琴闫雪锋文心田曹三杰黄小波伍锐赵勤文翼平
- 关键词：生物被膜抗生素耐药性
- 猪源ST11型艰难梭菌TcdB毒素受体结合域双抗体夹心ELISA的建立被引量：1
- 2022年
- 艰难梭菌是一种重要的人兽共患肠道病原菌,广泛存在于人和多种动物体内。ST11型艰难梭菌是国际上流行最广泛、危害最大的亚型之一。我国作为养猪业大国,猪源艰难梭菌的检测方法欠缺,给猪场艰难梭菌的防控留下隐患。本研究旨在建立一种特异、敏感的双抗体夹心ELISA,为猪源ST11型艰难梭菌流行病学调查提供血清学检测方法。首先采用原核表达并纯化出97 kDa的受体结合域(receptor binding domain, RBD)蛋白,并利用杂交瘤技术成功筛选出能稳定分泌针对RBD蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞AE2D3,经检测其抗体亚型为IgG2b(κ)。其次以针对RBD蛋白的单克隆抗体为检测抗体、兔多克隆抗体为捕获抗体,运用棋盘法确定了捕获抗体和检测抗体的配对浓度、抗原包被条件、封闭条件、检测抗体和待检样品的孵育条件、羊抗小鼠IgG/HRP和TMB显色液反应条件。经测定,此方法的临界值OD_(450)为0.152,与13株非ST11型的艰难梭菌无交叉反应,对RBD蛋白的最低检测浓度为8.83 ng/mL。这一特异、敏感、可用于兽医临床检测猪源ST11型艰难梭菌的双抗体夹心ELISA,为养猪业ST11型艰难梭菌流行病学调查提供了可靠的血清学检测方法。
- 梁伟全柯吉赵勤赵勤穆瑜曹三杰
- 关键词：艰难梭菌单克隆抗体双抗体夹心ELISA
