贵州医科大学基础医学院药理学教研室 作品数:55 被引量:175 H指数:8 相关作者: 祁冰洁 黄莹 更多>> 相关机构: 重庆大学生物医学工程联合学院 蚌埠医学院药学系 遵义医科大学第二附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 民族医药科学技术研究专项课题 贵州省科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 理学 更多>>
雌激素通过钙蛋白酶上调P21/CCNE2 mRNA表达并促进乳腺癌细胞MCF-7的侵袭能力 被引量:1 2016年 目的探讨17β-雌二醇(E2)对乳腺癌细胞mRNA表达,观察E2侵袭的分子信号机制。方法以乳腺癌细胞MCF-7为观察模型,用RT-PCR检测目的基因周期抑制蛋白P21和周期蛋白E2(CCNE2)mRNA的表达;Transwell体外侵袭实验检测细胞侵袭能力;蛋白印迹法检测蛋白表达;采用化学抑制剂或基因沉默法抑制胞内钙蛋白酶(CANP)活性。结果 E2(10 nmol/L)可刺激P21和CCNE2 mRNA表达显著增加(P<0.01);CANP抑制剂calpeptin(10μmol/L)或MEK抑制剂PD98059(10μmol/L)对E2诱导的P21和CCNE2 mRNA上调均有显著抑制作用(P<0.01);E2刺激细胞侵袭能力明显增强(P<0.01),而基因沉默CANP2明显抑制E2对CANP的激活及E2诱导的细胞侵袭效应(P<0.01)。结论 E2可通过激活胞内CANP诱导乳腺癌细胞P21和CCNE2 mRNA表达上调并促进细胞侵袭,提示CANP可能为抑制乳腺癌转移的一个潜在药物靶点。 王丹丹 王筑婷 杨莉 宛蕾 王旭东关键词:雌激素 钙蛋白酶 P21 孕哺期至成年前铝暴露对子鼠空间学习记忆能力和海马miR-132转录的影响 被引量:5 2018年 [目的]探讨孕哺期至成年前持续铝暴露对子鼠空间学习记忆和海马miR-132转录的影响。[方法]将12只清洁级健康SD孕鼠随机分为3组,每组4只。各组饮水中氯化铝浓度分别为0、600、1 000 mg/L,即对照组、低铝组、高铝组。母鼠从妊娠第0天至子鼠出生第21天染毒。从每组中随机选择8只子鼠(4雌4雄,同一窝别雌雄比为1∶1)延续同组剂量继续染毒至成年(出生第90天),每2周称一次体重,子鼠处死前收集24 h尿液,Morris水迷宫实验检测空间学习记忆能力。处死后光镜观察海马组织的病理变化,采用石墨炉原子吸收法测定尿铝和脑铝含量,用实时荧光定量PCR方法检测海马组织中miR-132转录水平。[结果]与对照组比较,高铝组子鼠出生后0~12周体重均降低(均P<0.01)。水迷宫结果显示:与对照组相比,染毒组在第3天和第4天逃避潜伏期延长(均P<0.01),高铝组子鼠首次达台时间延长及穿越平台次数减少(P<0.05,P<0.01)。低铝组、高铝组子鼠尿铝和脑铝水平分别为(11.84±1.03)、(16.32±1.32)μg/L,(12.69±0.43)、(16.61±0.93)μg/g,均高于对照组(均P<0.01)。与对照组比较,染毒组海马神经细胞出现核固缩,染色加深,数量减少和排列紊乱变形等病理改变;miR-132在低铝组、高铝组中的相对转录水平分别为1.48±0.35、1.62±0.38,与对照组(1.00±0.12)比较,miR-132在染毒组中转录水平均升高(P<0.05,P<0.01)。[结论]持续铝暴露损害子鼠的空间学习记忆能力,可能与海马组织中的miR-132转录水平升高有关。 葛启迪 张华 张华 谭瑛 谢春 张玥 谭瑛关键词:孕哺期 子鼠 学习记忆 白细胞介素-11及其受体在新生缺氧缺血性脑病大鼠模型中的表达 2023年 目的探讨白细胞介素-11(IL-11)和IL-11受体蛋白(IL-11Rα)在缺氧缺血性脑病(HIE)新生大鼠模型中的表达。方法7日龄Sprague-Dawley新生大鼠分为假手术组(Sham组9只)和模型组(HIE组21只),HIE组行右颈动脉结扎、8%O2+92%N2的低氧环境缺氧2 h建立HIE模型,Sham组不结扎和不缺氧;造模48 h后观取两组各6只大鼠观察翻正反射、负趋地性试验和Longa评分等短期行为学表现,之后麻醉处死大鼠取脑组织HE染色、观察大鼠大脑皮层及海马组织学改变;于造模后6 h取Sham组3只大鼠,HIE组于造模后6、12、24、48、72 h时各取3只大鼠取脑组织,采用免疫印迹(Western blot)法IL-11、IL-11Rα和糖蛋白130(GP130)的表达。结果与Sham组比较,HIE组大鼠翻正反射、负趋地性试验时间显著延长(P<0.01),Longa评分升高;与Sham组比较,HIE组大鼠脑干组织结构不清晰、脑细胞丢失、海马和皮层细胞坏死严重;HIE模型大鼠脑组织IL-11的表达呈现先降低后升高,与Sham组比较,在72 h时差异有统计学意义(P<0.05);IL-11Rα和GP130的表达趋势为先增后减,与Sham组比较,IL-11Rα和GP130在24 h时明显升高(P<0.01或P<0.01)。结论HIE模型新生大鼠神经功能缺损,脑组织损伤明显,内源性IL-11及其受体可能参与新生大鼠缺氧缺血性脑损伤疾病的发生及发展过程。 左丁 冯占辉 王筱雅 陈惠心 胡颖 张金娟 杨清 叶兰关键词:新生大鼠 神经保护 白细胞介素-11 妇科再造丸含药血清对人子宫肌瘤细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响 被引量:4 2019年 目的:探讨妇科再造丸(FKW)含药血清对体外培养人子宫肌瘤细胞凋亡相关蛋白Bax和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达的影响。方法:对人子宫肌瘤细胞进行原代培养、传代并进行鉴定;60只SD雌性大鼠随机均分为空白组(无药血清组),FKW高、中、低剂量组和桂枝茯苓胶囊(GZFL)组,利用各组大鼠制备无药血清和含药血清分别作用于子宫肌瘤细胞72h时,采用WesternBlot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:培养的细胞经鉴定证实为人子宫肌瘤细胞;与无药血清组比较,FKW含药血清各剂量组均能增加Bax蛋白相对表达量,降低Bcl-2蛋白相对表达量(P<0.05或P<0.01),且作用随剂量的增加而有增强的趋势(P<0.05或P<0.01)。结论:FKW含药血清可影响人子宫肌瘤细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达,这可能是FKW临床应用时缓解子宫肌瘤症状的机制之一。 胡颖 罗俊 张晴 叶兰 胡晓燕 郑涛关键词:妇科再造丸 子宫肌瘤细胞 凋亡相关蛋白 酒精对乳腺癌细胞表皮生长因子受体-钙激活中性蛋白酶通路及细胞迁移的影响 被引量:5 2016年 背景与目的:酒精(ethyl alcohol,Et OH)可促进乳腺癌的恶性演进,但其信号机制尚未完全明了。本研究通过观察Et OH对乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶(calcium-activated neutral protease,CANP)-周期蛋白E/局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)信号通路和细胞迁移的影响,以及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在其中的介导作用,探讨Et OH促进乳腺癌细胞迁移的信号机制。方法:以人乳腺肿瘤细胞系MCF-7为模型细胞(MCF-10A乳腺上皮细胞为对照);采用蛋白[质]印迹法(Western blot)分析周期蛋白E和FAK蛋白剪切反应;通过伤口愈合实验观察细胞迁移效应;采用EGFR抑制剂(EGFR inhibitor,EGFR-I)或CANP抑制剂Calpeptin抑制EGFR或CANP活性,观察抑制剂对Et OH诱导CANP1大亚基、周期蛋白E/FAK蛋白剪切及细胞迁移的影响。结果:以Et OH(0.3%)处理模型细胞可观察到周期蛋白E和FAK出现明显蛋白剪切且该效应呈剂量和时间依赖性,还观察到Et OH刺激细胞迁移活动(+47.30%,P<0.05),但Et OH对MCF-10A细胞迁移无明显影响;以Calpeptin(10μmol/L)预处理模型细胞,可见Et OH(0.3%)或EGF(10 ng/m L)诱导的周期蛋白E/FAK蛋白剪切效应受到明显抑制;EGFR-I(3μmol/L)可显著抑制Et OH诱导的CANP1大亚基和周期蛋白E/FAK蛋白剪切及细胞迁移效应(-53.00%,P<0.01)。结论:Et OH可通过EGFR激活乳腺癌细胞CANP信号活动并促进细胞迁移,EGFR-CANP通路参与介导Et OH与EGF之间的串话,提示EGFR-CANP信号通路中的关键分子可为防止乳腺癌转移的潜在药物靶点。 李勇杰 于庆龙 潘际刚 王宏健 宛蕾 王旭东关键词:酒精 表皮生长因子受体 钙激活中性蛋白酶 细胞迁移 乳腺癌 氧化苦参碱对小鼠肉瘤和肝癌的体内外抗肿瘤作用 被引量:2 2021年 目的:研究氧化苦参碱对小鼠肉瘤和肝癌的体内、外抗肿瘤作用,为氧化苦参碱在抗肿瘤方面的应用提供实验依据。方法:取对数生长期S_(180)和H_(22)细胞悬液预培养24 h,分别设立小鼠S180和H_(22)细胞的空白对照组(RPMI-1640培养基)、阴性对照组(不加药的S180和H_(22)细胞悬液)、5-氟尿嘧啶(5-FU,5×10^(-5)g/L)阳性对照组及5个不同浓度(1×10^(-4)、1×10^(-5)、1×10^(-6)、1×10^(-7)、1×10^(-8)g/L)的氧化苦参碱培养组,连续培养48 h后,采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测氧化苦参碱对S_(180)和H_(22)细胞的增殖抑制率。分别将S180和H_(22)瘤细胞悬液接种于昆明种小鼠,建立S_(180)和H_(22)荷瘤小鼠模型,分别设立正常对照组、模型组、阳性对照组、氧化苦参碱高、中、低剂量组,每组10只。正常对照组和模型组灌胃给予等体积蒸馏水,高、中、低剂量小鼠分别灌胃浓度为100、50、25 mg/kg的氧化苦参碱,阳性对照组灌胃给予30 mg/kg的环磷酰胺。各组连续给药8 d后,检测氧化苦参碱对S_(180)和H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤率、胸腺系数和脾系数以及对S_(180)和H_(22)腹水瘤小鼠生存期的影响。结果:体外研究结果表明,与阴性对照组比较,氧化苦参碱对小鼠S_(180)和H_(22)细胞的增殖均有抑制作用(P<0.05)。动物实验表明,与模型组比较,氧化苦参碱100、50和25 mg/kg剂量组均能够显著抑制小鼠S180肉瘤的生长,抑瘤率分别为48.48%、41.67%和32.58%,差异具有统计学意义(P<0.05);氧化苦参碱100和50 mg/kg剂量组均能够显著抑制小鼠肝癌H_(22)的生长,抑瘤率分别为33.95%和31.63%,差异具有统计学意义(P<0.05);氧化苦参碱50 mg/kg剂量组可显著延长S180腹水型小鼠的生存期,其生命延长率为31.18%,差异具有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组比较,氧化苦参碱各剂量组对S_(180)荷瘤小鼠和H_(22)荷瘤小鼠的胸腺系数和脾系数无明显影响(P>0.05)。结论:氧化苦参碱对� 刘宁 梁兰兰 李淑芳 沈祥春 沈祥春关键词:氧化苦参碱 抗肿瘤 小鼠 TGM1基因过表达可抑制乳腺癌细胞的上皮-间质转化 被引量:1 2018年 目的 :探究转谷氨酰胺酶1(transglutaminase 1,TGM1)基因过表达对乳腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法 :采用实时荧光定量PCR法检测鼠源性乳腺癌FE1.2和FE1.3细胞中TGM1 m RNA的表达水平。采用脂质体法将携带有TGM1基因全长序列的重组载体质粒p CMV3-TGM1-GFPspark转染至FE1.2细胞中,构建TGM1基因过表达的FE1.2细胞株(FE1.2-TGM1)。光学显微镜下观察FE1.2细胞形态的变化,FCM法测量细胞粒径的大小;MTT法检测TGM1基因过表达对鼠乳腺癌细胞增殖能力的影响;实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测EMT相关分子标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、β-链蛋白(β-catenin)以及细胞周期调节蛋白D1(cyclin D1)m RNA和蛋白的表达水平。最后,采用细胞划痕愈合实验检测TGM1过表达对细胞迁移能力的影响。结果 :FE1.3细胞中TGM1 m RNA的表达水平明显高于FE1.2细胞(P<0.001)。将重组载体p CMV3-TGM1-GFPspark转入FE1.2细胞后,FE1.2细胞中TGM1 m RNA和蛋白的表达水平明显上调(P<0.001和P<0.01),细胞形态发生明显改变,细胞的粒径增大(P<0.01),而FE1.2细胞的增殖能力明显降低(P<0.001)。TGM1基因过表达的E1.2细胞中E-cadherin m RNA的表达水平明显上调(P<0.01),vimentin m RNA及蛋白的表达水平均明显下调(P值均<0.001),cyclin D1 m RNA的表达水平明显上调(P<0.05),而cyclin D1蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),β-catenin m RNA的表达水平无明显变化(P>0.05),β-catenin蛋白的表达水平明显下调(P<0.01);TGM1过表达后FE1.2细胞的迁移能力明显减弱(P<0.05)。结论 :TGM1基因过表达能抑制乳腺癌细胞的EMT。 宋喻 姚尧 夏雷 夏雷 刘务玲 杨珏 肖潇 宋晶睿 宋佳蕾 王宁 刘杰麟 YAACOV Ben-David关键词:乳腺肿瘤 上皮-间质转化 VU0360172激活mGluR5对新生大鼠生发基质出血的保护作用 2022年 目的研究VU0360172激活代谢型谷氨酸受体5(metabotropic glutamate receptor 5,mGluR5)对新生大鼠生发基质出血(germinal matrix hemorrhage,GMH)产生的保护作用,并探讨其作用机制。方法7日龄SD大鼠随机分为假手术组、模型组、VU0360172低、中、高剂量组。颅内注射胶原酶Ⅶ-S建立乳鼠GMH模型,术后3 h腹腔注射不同剂量VU0360172,假手术组、模型组给予等容积溶剂;术后24 h对乳鼠进行神经行为学测试,测定脑含水量、脑血红蛋白含量,HE染色观察乳鼠脑部组织病理学,Western blot法检测Bcl-2、cleaved-caspase-3蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组神经行为学测试消耗时间增加,评分升高(P<0.01),脑含水量、脑血红蛋白含量增加(P<0.01),患侧脑组织损伤显著,Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05),cleaved-caspase-3蛋白表达上调(P<0.01);与模型组相比,VU0360172给药组神经测试时间缩短,评分降低(P<0.05),脑含水量、脑血红蛋白含量均降低(P<0.05),患侧脑组织损伤减轻,Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05),cleaved-caspase-3蛋白表达减少(P<0.01)。结论VU0360172激动mGluR5对乳鼠生发基质出血具有保护作用。 王筱雅 冯占辉 熊英 张晴 杨清 陈惠心 汪朝云 左丁 叶兰关键词:MGLUR5 CASPASE-3 牛蒡苷元对小鼠断尾出血时间和血栓形成的影响 2022年 目的探讨牛蒡苷元(Arc-G)对小鼠止血、血小板数目、凝血、体内血栓形成及血块回缩功能的影响。方法将小鼠随机分为空白对照组(生理盐水)、阿司匹林组(100 mg/kg)、Arc-G低剂量组(12.5 mg/kg)和Arc-G高剂量组(50 mg/kg),剪断小鼠尾尖、观察各组小鼠断尾出血时间;下腔静脉取血,检测血小板数目、血小板平均体积(MPV)、凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和纤维蛋白原(FIB);腹腔注射角叉菜胶建立鼠尾部血栓模型,计量鼠黑尾比例,观察Arc-G对血栓形成的影响;通过血块回缩实验,观察Arc-G体外抑制血栓形成的作用。结果阿司匹林组、Arc-G低剂量组和Arc-G高剂量组小鼠断尾出血时间较空白对照组显著延长,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与空白对照组比较,Arc-G低剂量组和Arc-G高剂量组的血小板数目、MPV、PT、APTT、TT及FIB比较,差异均无统计学意义(P>0.05);鼠尾部血栓模型结果显示,阿司匹林组、Arc-G高剂量组黑尾比例明显低于空白对照组(P<0.01),差异有统计学意义;与溶剂组比较,Arc-G(3.125μmol/L)和Arc-G(12.5μmol/L)可抑制血块回缩,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Arc-G具有抑制止血和抗血栓的作用。 潘彩燕 林晓坚 袁兆伟 张蓉 刘刚 谢娟关键词:角叉菜胶 牛蒡苷元 凝血 抗血栓 松油烯-4-醇改善自噬流障碍对高糖诱导的VSMCs炎性损伤的保护作用 2023年 目的基于改善自噬流障碍,研究松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)炎性损伤的作用及涉及的分子信号。方法采用划痕实验分析VSMCs迁移能力,ELISA法检测细胞培养上清液IL-1β、IL-6的水平;Western blot检测炎症相关分子NF-κB p65、p-NF-κB p65、IL-1β、IL-18及自噬相关信号p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-Beclin1的蛋白表达。结果T4O可抑制高糖诱导的VSMCs迁移,减少促炎因子IL-1β、IL-6的分泌与释放,抑制p-NF-κB p65/NF-κB p65、IL-1β、IL-18的蛋白表达,同时下调p62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及p-Beclin1的表达水平。采用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)干预VSMCs自噬通量后,T4O预处理可明显抑制CQ介导的上述炎症因子及自噬相关信号的蛋白表达水平。结论T4O通过改善自噬流障碍,抑制高糖诱导的VSMCs炎性损伤。 黄梅 涂梦欣 张彦琦 陈虹雨 吴林菁 沈祥春 徐旖旎 张彦燕关键词:松油烯-4-醇 炎性损伤 自噬 高糖