广西亚热带生物资源保护利用重点实验室
- 作品数：178 被引量：701H指数：13
- 相关作者：莫品方王猛宋雪梅张霞朱姿英更多>>
- 相关机构：广西大学教育部广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 毛细管区带电泳测定两种生物碱与牛血清白蛋白的结合常数研究被引量：1
- 2014年
- 采用毛细管电泳淌度移动法研究盐酸麻黄碱、磷酸可待因与牛血清白蛋白(BSA)的结合常数.使用未涂层弹性石英毛细管柱75μm×60cm(有效长度50cm),在pH 7.40、浓度25mmol/L Tris-HCl的电泳缓冲溶液及分离电压20kV,紫外检测波长214nm,温度37℃的条件下,测得盐酸麻黄碱、磷酸可待因与BSA的结合常数分别为1.46×104 L/mol和0.75×104 L/mol.该法简单、快捷,可用于研究结合比为1∶1的药物小分子与生物大分子的相互作用.
- 霍鹏朱平川徐远金
- 关键词：毛细管区带电泳盐酸麻黄碱磷酸可待因牛血清白蛋白
- 1株甲基杆菌Methylobacterium sp.WGM16的鉴定及降解甲醇的最佳培养条件被引量：10
- 2011年
- 从水稻根部土壤中筛选到1株粉红色、需氧的兼性甲基营养型菌株WGM16,该菌为革兰阴性杆菌。根据菌株16S rRNA基因序列比对分析及结合菌株常规形态特征、生理生化性状的鉴定,将该菌初步鉴定为Methylobacterium sp.PCR扩增到菌株WGM16编码甲醇脱氢酶α-亚基的mxaF基因,表明菌株WGM16中存在甲基营养代谢途径。在培养温度为32℃、以1%的甲醇作为碳源、pH值为8.0的培养条件下,其甲醇降解率可达75%。
- 田丹丹宋修鹏蒋承健古恒森李俊芳武波
- 土壤中砷的形态分析方法研究及应用被引量：1
- 2014年
- 用高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光法分离和测定土壤中As（Ⅲ）、DMA、MMA、As（Ⅴ）,考察（NH4）2HPO4溶液浓度、pH值、流速对分离的影响,HG-AFS分析条件对峰信号的影响及不同提取剂对土壤中砷形态的提取效果,在确定好各种操作参数下各组分在13min内得到很好的分离,检出限0.43-0.67μg/L,样品加标回收率89.9%～104.5%,相对标准偏差4.88%～6.52%,样品提取率73.5%～82.7%。
- 陈桂鸾徐远金吴琼婧
- 关键词：土壤砷
- 水牛促黄体素受体基因(LHR)的克隆及其表达特征研究
- 从水牛卵巢中克隆了促黄体素受体(Luteinizing hormone receptor LHR)基因,对该基因进行序列分析,并采用RT-PCR和原位杂交的方法检测了LHR基因在卵巢中的表达特征。核苷酸序列分析表明,LH...
- 路毅蒋宗良张明付强陆阳清卢盛晟卢克焕
- 关键词：水牛克隆半定量RT-PCR
- 文献传递
- 受精液中添加β-ME、BSA和咖啡因对猪卵母细胞体外受精后早期发育的影响被引量：8
- 2008年
- 进行受精液中添加不同浓度的β-ME、BSA和咖啡因对猪卵母细胞体外受精及其早期发育的影响试验。结果表明,在受精液中添加β-ME(2、10、50μmol/L)对猪卵母细胞体外受精后的早期发育无显著促进作用,当添加浓度过高(250μmol/L)时对早期胚胎发育反而不利;在受精液中添加咖啡因(1、2、4mmol/L)对猪卵母细胞体外受精后的早期发育无显著的促进作用;在受精液中添加BSA(0.1%、0.2%、0.4%、0.8%)对猪卵母细胞体外受精后的早期发育有一定的促进作用,并以添加0.4%BSA的效果最好。
- 许丹娜田加运何若钢莫品方蓝海恩黄敏瑞卢晟盛卢克焕
- 关键词：卵母细胞体外成熟体外受精胚胎培养
- 厌氧菌株Clostridium sp.WGC702的筛选及其β-葡萄糖苷酶基因的克隆被引量：1
- 2011年
- 从沼气池中筛选一株产β-葡萄糖苷酶的厌氧菌菌株WGC702,基于16S rDNA序列及生理特性将其确定为梭菌属,命名为Clostridium sp.WGC702。用BamHI不完全酶切WGC702的总DNA,回收2～10kb范围内的DNA片段,连接到pGEM-3zf(+)载体上,电转化至大肠杆菌E.coliDH5α中构建基因文库,利用七叶苷平板筛选到120个能产黑色水解圈的阳性克隆。将其中一个含3.5kb左右大小的外源片段的阳性克隆子进行测序,结果发现其中含有一个1347bp大小的完整ORF框,进一步分析表明该片段编码448个氨基酸组成的蛋白质,氨基酸序列与来自Clostridiumcellulovorans 743B(登录号为EES30417.1)的β-葡萄糖苷酶具有48%的同源性,其预测的等电点和分子量分别为4.94和53978.6Da,可能为一个新的β-葡萄糖苷酶基因。
- 申佩弘蒋承建杨霞沈建涛武波
- 关键词：基因文库Β-葡萄糖苷酶基因克隆
- 费氏中华根瘤菌HN01的putA基因克隆
- 2010年
- 从快生型大豆根瘤菌费氏中华根瘤菌HN01的基因组文库中克隆到一个putA(脯氨酸脱氢酶)基因,该基因与已报道的苜蓿中华根瘤菌1021中putA基因在核苷酸和氨基酸水平上分别有82%和86%相似性.利用自杀性质粒pK18mob构建含有putA基因部分片段的重组质粒,通过三亲本结合导入出发菌株HN01中,获得正向插入的极性突变体GXHNPA和反向插入非极性突变体GXHNPB.将putA基因完整的ORF连接到广宿主载体pLAFRJ上,获得用于互补的质粒pGXHN37,通过三亲接合,将pLAFRJ导入GXHNPA和GXHNPB获得互补菌株GXHNPHA和GXHNPHB.对出发菌株、突变菌株、互补菌株进一步的研究发现,以脯氨酸为唯一C、N源的MM培养基中培养时,突变体均不能生长,互补菌株和野生型HN01没有差异,而在完全培养基YMB中培养时,突变菌株生长不受影响.植株实验发现,突变体均能有效结瘤,但是固氮酶活与出发菌株相比有所下降,结瘤时间延迟1d,竞争结瘤能力下降,而互补菌株与野生型HN01没有明显的差异.
- 唐美琼申佩弘许兢蒋承建陈钢武波
- 关键词：克隆突变体结瘤
- 基因工程菌Pseudomonas sp. B4的构建及其产邻苯二酚发酵条件的初步研究被引量：1
- 2008年
- 利用PCR技术以Pseudomonas sp.B3-1基因组DNA为模板,扩增出2.9kb编码苯甲酸双加氧酶基因簇benABC。将该基因簇连接于pLAFRJ载体,电转化至E.coliDH5α,再通过三亲本结合法导入野生菌株Pseudomonas sp.B3-1中,得到了一株邻苯二酚产量提高的基因工程菌,命名为Pseudomonas sp.B4,在相同发酵条件下,工程菌Pseudomonas sp.B4的邻苯二酚产量达到0.5mg/ml,比野生菌株Pseudomonas sp.B3-1提高了17.5%。对工程菌Pseudomonas sp.B4进行发酵条件优化表明,当苯甲酸钠浓度为6.0g/L,聚蛋白胨浓度为2.5g/L,温度为32℃以及pH值为6.0时,工程菌在200r/min旋转摇床发酵36小时后,邻苯二酚产量达到0.7mg/ml,比野生菌株Pseudomonas sp.B3-1提高了75%。
- 唐咸来熊建文梁璇申佩弘武波
- 关键词：假单胞菌苯甲酸钠邻苯二酚
- 甲基营养菌Methylobacterium sp.MB200中与L-丝氨酸耐受性相关基因的克隆与分析被引量：1
- 2011年
- 甲基营养菌MB200,能利用非C-C键低碳化合物生长并合成L-丝氨酸,对L-丝氨酸耐受浓度低,提高其在静息细胞反应系统中对L-丝氨酸的耐受能力可更好的提高L-丝氨酸的产量。利用质粒转座子pTnMod-RKm'构建了甲基营养菌MB200的突变体库,往培养基中添加20 mg/mLL-丝氨酸对突变体库中的突变体进行平板筛选,共筛选到177株耐受L-丝氨酸的突变体,以10mg/mL的浓度梯度复筛,发现某些突变体能最高耐受40 mg/mL L-丝氨酸。分别提取突变体总DNA,用BamHI酶随机酶切后连接到克隆载体pMD18-T上,导入到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,利用双抗性在(转座子抗性与T载体上的抗性)平板上挑取转化子,并提取质粒,酶切验证后进一步测序。共克隆到了17个基因,为提高甲基营养菌对L-丝氨酸的耐受能力提供了可研究的基因资源。
- 周侃唐咸来蒋承建宋修鹏李俊芳田丹丹申佩弘
- 关键词：METHYLOBACTERIUM突变体L-丝氨酸耐受性
- 农杆菌介导冷调节基因(Cbcor15a)遗传转化甘蔗体系的建立被引量：9
- 2014年
- 【目的】利用农杆菌介导法,将外源冷调节基因Cbcor15a导入甘蔗愈伤组织,建立快速、高效的甘蔗遗传转化体系,为培育具抗寒性甘蔗品种奠定基础。【方法】以新台糖22号(ROC22)为材料,通过对愈伤组织诱导、分化、生根等培养基进行优化,筛选出外源基因转化甘蔗的适合激素种类与用量、PPT用量、抗生素种类与用量;利用甘蔗转基因二元植物表达载体pCambia1300-Cbcor15a-bar,通过农杆菌介导法将目的基因Cbcor15a导入甘蔗愈伤组织。【结果】当农杆菌菌液OD600为0.4、侵染20 min时有利于愈伤组织分化;甘蔗愈伤组织诱导和分化培养阶段的最佳PPT为0.50mg/L。侵染后在共培养中添加500.00 mg/L抗生素Cef能有效抑制农杆菌,添加300.00 mg/L抗生素Cef能促进愈伤组织分化成苗,添加200.00 mg/L抗生素Cef能促进幼苗生根。MS培养基中添加低量NAA更有利于甘蔗愈伤组织的分化;在促进细胞分裂时KT的效果明显优于6-BA。MS培养基中添加5.00 mg/LNAA和70.00g/L蔗糖能有效促进分化苗生根。利用建立的遗传转化体系可获得286株转冷调节基因Cbcor15a的甘蔗转化植株;选取83株通过PPT抗性筛选后长势良好的转化植株进行阳性检测,其中有4株呈阳性。【结论】利用农杆菌介导的Cbcor15a基因转化甘蔗的遗传转化体系能成功将Cbcor15a基因整合到甘蔗基因组。
- 滕峥李鸣崔永祯方位宽梁朝旭何姗珊梁俊吴凯朝叶燕萍李容柏
- 关键词：农杆菌介导
