贵州医科大学实验动物中心
- 作品数：62 被引量：217H指数：7
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- 在斑马鱼成血成血管共同前体细胞中异位表达HoxB4对造血发育的影响
- 目的 HoxB4是造血细胞分化早期的重要调控因子,其是最有潜力的造血干细胞扩增工具之一,遂本研究通过建立可示踪的造血干细胞自我更新的斑马鱼模型,在斑马鱼体内时-空特异性过表达斑马鱼HoxB4基因,旨在进一步探讨Hoxb4...
- 舒莉萍
- 不同剂量野百合碱联合异丙肾上腺素对大鼠血流动力学变化及心指数、右心肥厚指数研究
- 2016年
- 目的研究不同剂量野百合碱联合异丙肾上腺素对大鼠血流动力学变化及心指数、右心肥厚指数。方法采用SD大鼠64只,雌雄各半,体重200-250 g,随机分为空白对照组（n=16）;模型组（n=48）。模型组分为高剂量组（n=16）：80 mg/kg野百合碱采取腹腔一次性注射;10 mg/kg异丙肾上腺素采取腹腔连续注射1周;中剂量组（n=16）：55 mg/kg野百合碱采取腹腔一次性注射;8 mg/kg异丙肾上腺素采取腹腔连续注射1周;低剂量组（n=16）：30 mg/kg野百合碱采取腹腔一次性注射,3 mg/kg异丙肾上腺素采取腹腔连续注射1周。动物饲养到第6周后,行肺动脉压和右心室内压检测,心系数和右心室肥厚指数测定。结果与对照组比较,低剂量平均肺动脉压和右室收缩压均无差异变化;中剂量组平均肺动脉压、右室收缩压均有差异变化（P〈0.05）,低剂量组心系数和右心室肥厚指数均无差异显著。中剂量组心系数差异极显著（P〈0.01）,右心室肥厚指数差异显著（P〈0.05）。结论说明采用一次性注射野百合碱55 mg/kg,联合连续注射8 mg/kg异丙肾上腺素1周。既保证了大鼠的存活率,又保证了肺动脉高压的成功形成,野百合碱和异丙肾上腺素能对大鼠产生肺动脉高压,导致心气虚弱。
- 邹习俊杨红宇江滟智妍兰露莎朱颜鑫邹乾
- 关键词：野百合碱异丙肾上腺素血流动力学心指数
- 肝素酶在人β-防御素-3抗甲型流感病毒的作用研究
- 2022年
- 目的探讨肝素酶在人β-防御素-3(Humanβ-defensin 3,HBD3)抗甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)中的作用。方法采用CCK8法检测肝素酶对人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的毒性情况;经肝素酶处理BEAS-2B细胞,并在4℃下与HBD3和IAV病毒液孵育2 h,分为未处理组(HBD3+IAV),肝素酶+HBD3+IAV组,提取细胞总RNA和总蛋白,采用qRT-PCR检测感染细胞中的NP mRNA表达水平,Western blot和免疫共沉淀检测HBD3和IAV HA蛋白表达水平以及HBD3和HA蛋白的相互作用。试验设未经肝素酶处理BEAS-2B细胞对照组。结果肝素酶作用48 h,其浓度在30 U/mL以下浓度时对细胞无毒性作用;HBD3干预IAV感染细胞后细胞中的NP mRNA表达水平显著降低(t=12.81、26.13、28.68,P<0.01),经肝素酶处理IAV感染的细胞其NP mRNA表达水平升高(t=-4.55,P<0.05),结果显示HBD3可抑制病毒复制,而经肝素酶处理IAV感染的细胞其病毒未减少,表明只使用肝素酶不能降低病毒感染;与未经肝素酶处理的细胞相比,经肝素酶处理的细胞中HBD3和HA蛋白表达水平降低,以及HBD3和HA蛋白的相互作用显著降低(P<0.01),表明HBD3和肝素酶共同作用可降低HA的表达来阻止IAV进入细胞。结论肝素酶和HBD3共同作用可以抑制病毒进入细胞,具有抗甲型流感病作用。
- 杨小余马贵凤唐源罗红江滟
- 关键词：甲型流感病毒肝素酶
- FLASH基因在野生型斑马鱼早期表达以及与HoxB4基因的关系被引量：1
- 2018年
- 目的:观测FLASH基因在Tuebingen野生型斑马鱼胚胎早期的表达及与Hox B4基因的关系。方法:以Hox B4转基因斑马鱼系为研究对象,分为实验组、实验对照组和空白对照组,实验组为Hox B4转基因斑马鱼系与Cre鱼系交配所得的过表达Hox B4的带有EGFP荧光的胚胎(Tg:Lmo2-Cre,Lmo2-LDEL-Hoxb4-EGFP),实验对照组为EGFP转基因斑马鱼系与Cre鱼系交配所得的表达EGFP荧光的胚胎(Tg:Lmo2-Cre,Lmo2-LDEL-EGFP),空白对照组为Tuebingen野生型斑马鱼的胚胎;采用FLASH反义mRNA探针做原位杂交并观察其表达。结果:观察到Tuebingen组中3. 7、9～24 hpf的神经外侧板、头部和脊索及18～30 hpf的原肾管可见黑色的阳性杂交信号,36 hpf后未见; 18～72 hpf的空白对照组与实验对照组间FLASH表达水平无差异,实验组18～30 hpf神经系统、造血系统FLASH的表达下调。结论:FLASH基因可能是Hox B4基因的下游靶基因。
- 金璐丁可军孙琮杰陈露周艳华舒莉萍何志旭
- 关键词：斑马鱼转基因原位杂交
- 猪白细胞干扰素对猪蓝耳病、链球菌病、附红细胞体病混合感染的治疗效果观察
- 目的 讨论猪白细胞干扰素对猪蓝耳病、链球菌病、附红细胞体病混合感染的临床疗效,为日后的临床治疗提供参考.方法 选择某养殖场猪蓝耳病、链球菌病、附红细胞体病混合感染病猪100头为研究对象,所有病猪均实施猪白细胞干扰素治疗,...
- 兰露莎
- 关键词：猪白细胞干扰素猪蓝耳病链球菌病附红细胞体病
- 人β防御素3和γ干扰素在MAPK信号通路中的相互诱导及联合抗甲型流感病毒的机制被引量：1
- 2023年
- 目的 探讨人β防御素3(HBD3)和γ干扰素(IFN-γ)在丝裂源活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中相互诱导作用及体外联合抗甲型流感病毒(IAV)H1N1的作用。方法 不同剂量IFN-γ(12.5、25.0、50.0、100.0μg/L)或HBD3(0.25、0.50、1.00、2.00 mg/L)分别作用人支气管上皮细胞BEAS-2B 4、12、24、48 h,另设立p38 MAPK、ERK和JNK通路抑制剂预处理后、用IFN-γ(25.0μg/L)或HBD3(1.00 mg/L)处理BEAS-2B细胞4 h, qRT-PCR和ELISA检测HBD3及IFN-γ基因和蛋白表达,Western blot检测p-p38 MAPK、p-ERK、p-JNK蛋白表达;25.0μg/L IFN-γ、1.00 mg/L HBD3、HBD3 siRNA转染及IFN-γ中和抗体(0.50 mg/L)单独或联合作用BEAS-2B细胞、用5×TCID50H1N1感染,qRT-PCR和Western blot检测IAV核蛋白(NP)基因和蛋白的表达情况。结果 在BEAS-2B细胞中,不同剂量的IFN-γ与HBD3可互相诱导表达(P<0.05或P<0.01),且均可诱导p-p38 MAPK、p-ERK和p-JNK的表达上调(P<0.01);p38 MAPK、ERK和JNK通路抑制剂预处理,均明显下调IFN-γ诱导的HBD3表达、及HBD3诱导的IFN-γ表达(P<0.01);IFN-γ和HBD3单独或联合使用均可明显抑制BEAS-2B细胞中H1N1 NP的表达(P<0.05或P<0.01),转染HBD3 siRNA减弱了IFN-γ抑制H1N1 NP表达的作用(P<0.01),IFN-γ中和抗体介入对HBD3抑制H1N1 NP表达的作用无显著影响(P>0.05)。结论 在BEAS-2B细胞中,HBD3和IFN-γ可通过MAPK通路相互诱导表达,且2者联合使用可增强抗IAV H1N1的作用。
- 唐源祝洁杨小余张乙进罗红江滟
- 关键词：甲型流感病毒人Β防御素3Γ干扰素丝裂原活化蛋白激酶
- 实验动物SPF实验室改革初探被引量：1
- 2016年
- 实验动物广泛应用于医学、药学、遗传学、生物学等众多研究领域。随着科学技术的进步和发展．对实验动物的要求也越来越严格。SPF（Speciific Pathogen Free）动物即无特定病原体动物，因其不携带潜在感染或条件致病菌，能够保证实验数据的精确性，已成为生命科学研究中被广泛使用的实验动物。
- 邹习俊杨红宇舒莉萍江滟张硕智妍罗红兰露莎
- 关键词：实验动物实验室SPF无特定病原体条件致病菌
- 豆豉溶栓激酶DCK的体内溶栓抗栓作用被引量：5
- 2016年
- 目的:探讨贵州豆豉溶栓激酶DCK(DCK酶)的体内溶栓抗栓作用及其相关机制。方法:雄性昆明小鼠随机分为模型组,尿激酶(150 U·g^(-1))组,DCK酶低、中、高剂(150,300,450 U·g^(-1))组,ip 7 d,每日1次,第7天给药30 min后,各组小鼠ip 0.8%角叉菜胶,继续每天给药,观察尾部血栓的变化,于24,36 h游标卡尺测量鼠尾长度和血栓长度,计算血栓形成率和血栓形成相对长度。Wistar大鼠随机分为模型组,尿激酶(100 U·g^(-1))组,DCK酶低、中、高剂量(100,200,300 U·g^(-1))组,ip 10d,每日1次。第10天给药30 min后,水合氯醛溶液麻醉大鼠,分离右颈总动脉、左颈外静脉,构建右颈总动脉-左颈外静脉旁路循环,比较该旁路循环异物所致血栓湿重。新西兰大耳白兔随机分为模型组,尿激酶(38 U·g^(-1))组,DCK酶低、中、高剂量(38,76,114 U·g^(-1))组,耳缘静脉注射给药,给药1 h后耳缘静脉采血,进行凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶时间(TT),纤维蛋白原(FIB),优球蛋白溶解时间(ELT),纤维蛋白(原)降解产物(FDP)的检测。结果:与模型组比较,DCK酶组在24,36 h各组小鼠鼠尾血栓形成相对长度均明显减少(P<0.05,P<0.01);DCK酶高、中剂量组的旁路循环血栓湿重明显减少(P<0.05,P<0.01)。DCK酶高、中剂量组的PT,APTT,TT时间明显延长(P<0.05,P<0.01),DCK酶高、中剂量组FIB明显减少(P<0.05,P<0.01),DCK酶高、中剂量组ELT的水平明显降低(P<0.05),DCK酶组FDP含量均增加,中剂量组明显增加(P<0.05)。结论:DCK酶具有良好的体内溶栓抗栓作用。
- 贺欢张硕张敏印酬张茜高秀丽张荣平
- 关键词：溶栓抗栓凝血溶血
- 利用吗啉代寡核苷酸技术下调早期斑马鱼胚胎lmna基因的初步研究被引量：5
- 2016年
- 目的利用吗啉代寡核苷酸技术建立下调斑马鱼lmna基因的技术方法。方法在斑马鱼lmna基因序列中选择靶点,设计针对斑马鱼lmna基因的吗啉代寡核苷酸序列(lmna-MO),构建能特异指示lmna基因表达的lmna-EGFP-pCS^(2+)重组质粒,并通过显微注射方式将二者共注射入斑马鱼胚胎中,通过观察胚胎中绿色荧光表达量反应lmna基因表达量,并通过蛋白质印迹法检测胚胎中lamin蛋白表达量。结果蛋白质印迹法检测斑马鱼体内lamin蛋白的表达,分别有大小为69 KD和62 KD两种蛋白表达。设计并构建了lmna-MO和重组质粒lmnaEGFP-pCS^(2+),单独注射lmna-EGFP-pCS^(2+)质粒后观察到从6 hpf到96 hpf胚胎均有绿色荧光蛋白表达;二者共注射后观察到,与对照组相比,实验组从6 hpf至30 hpf胚胎中绿色荧光蛋白表达量均不同程度下降或消失;蛋白质印迹实验结果显示实验组胚胎内lamin蛋白表达量明显下降。表明已成功下调了斑马鱼胚胎lmna基因表达。结论可通过lmna-MO和重组质粒lmna-EGFP-pCS^(2+)共注射方法下调斑马鱼lmna基因表达,并通过绿色荧光蛋白表达量反映下调效果。该方法可为深入研究人核纤层病提供良好的动物模型。
- 刘丰黄慧敏王志华吴西军何志旭舒莉萍
- 关键词：斑马鱼LMNA
- P21对HoxB4的调控机制及其影响造血干细胞增殖初步研究被引量：1
- 2018年
- 目的:利用转基因斑马鱼模型探讨P21是否作为Hox B4的下游基因参与调控造血干细胞(HSC)的增殖发育。方法:转基因斑马鱼系Tg(z Lmo2:LDe L-Hox B4-EGFP)与Tg(z Lmo2:Cre)交配后的胚胎作为Hox B4实验组、Tg(z Lmo2:LDe L-EGFP)与Tg(z Lmo2:Cre)交配后的胚胎作为EGFP对照组、野生型斑马鱼胚胎作为空白对照组,利用P21反义mRNA探针对斑马鱼全胚胎进行原位杂交,观察P21的表达情况。结果:Hox B4实验组胚胎、EGFP实验对照组胚胎及空白对照组胚胎在时相为18 hpf、24 hpf、72 hpf时原位杂交结果未见明显区别,30 hpf及36 hpf的Hox B4实验组斑马鱼胚胎脊椎部位P21的表达发生少量下调,48 hpf的Hox B4实验组、EGFP对照组两组胚胎胸腺部位P21较空白对照组发生少量下调。结论:转基因过表达Hoxb4的斑马鱼在造血细胞增殖异常旺盛的情况下,P21表达量出现下降,提示在胚胎期造血发育过程中P21可能作为Hox B4的下游基因,并通过Hox B4负调控作用来参与调节HSC的增殖发育。
- 李雪华姬牧远周艳华何志旭何志旭
- 关键词：造血干细胞斑马鱼转基因细胞增殖P21HOXB4
