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复旦大学化学系生化与分子生物学实验室

作品数:19 被引量:75H指数:6
相关作者:宋爱新刘玉奇王文虎任毅陆君霞更多>>
相关机构:聊城大学化学化工学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:生物学医药卫生理学更多>>

文献类型

  • 16篇期刊文章
  • 3篇会议论文

领域

  • 16篇生物学
  • 3篇医药卫生
  • 1篇理学

主题

  • 10篇蛋白
  • 8篇细胞
  • 7篇血红素
  • 4篇点突变
  • 4篇氧化酶
  • 4篇细胞色素
  • 4篇细胞色素B
  • 4篇细胞色素B5
  • 4篇细胞色素C氧...
  • 3篇定点突变
  • 3篇突变体
  • 3篇结构-功能
  • 3篇结构域
  • 3篇金属蛋白
  • 3篇金属硫蛋白
  • 2篇蛋白结构
  • 2篇电子传递
  • 2篇血红素蛋白
  • 2篇突变体蛋白
  • 2篇锌指

机构

  • 19篇复旦大学
  • 1篇聊城大学

作者

  • 19篇黄仲贤
  • 5篇谢毅
  • 4篇李连之
  • 3篇林英武
  • 3篇任毅
  • 3篇宋爱新
  • 3篇王韵华
  • 2篇汤李民
  • 2篇陆君霞
  • 2篇刘玉奇
  • 2篇王文虎
  • 2篇余文浩
  • 2篇高原
  • 2篇蔡斌
  • 1篇官墨蓝
  • 1篇杨万明
  • 1篇姚文华
  • 1篇杨芃原
  • 1篇陆珺霞
  • 1篇张海亮

传媒

  • 5篇科学通报
  • 3篇高等学校化学...
  • 3篇无机化学学报
  • 2篇复旦学报(自...
  • 2篇化学进展
  • 1篇世界科技研究...
  • 1篇第十一届全国...
  • 1篇2011南湖...

年份

  • 3篇2011
  • 1篇2008
  • 2篇2006
  • 2篇2004
  • 5篇2003
  • 3篇2002
  • 2篇2001
  • 1篇2000
19 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
血红素蛋白结构及功能的相互转换被引量:9
2006年
本文综述了利用蛋白质工程方法,实现不同血红素蛋白之间结构及功能的相互转换,包括氧载体与电子传递蛋白间的相互转换、氧载体与生物催化剂间的相互转换、电子传递蛋白与生物催化剂间的相互转换,以及不同类型血红素蛋白之间的相互转换。这些成功的研究成果,丰富了我们对金属蛋白结构-性质-反应-功能之间精妙关系的深入认识。
林英武黄仲贤
关键词:血红素蛋白
血红素蛋白的分子设计新趋向被引量:13
2006年
综述了近年来有关血红素蛋白分子设计所出现的新趋向,包括氨基酸选择突变与血红素修饰相结合,非天然辅基的引入,非天然氨基酸的引入,辅基与蛋白肽链的共价结合,以及全新血红素蛋白的设计与构建5个方面。这些新发展趋向对研究金属蛋白的结构-功能关系提供了重要的信息,同时也为这些理性设计的新颖金属蛋白分子拓宽了其在生物化学、生物工程和药学上的应用。
林英武黄仲贤
关键词:血红素蛋白分子设计
含血红素金属蛋白的结构-功能的研究
黄仲贤
细胞色素c氧化酶研究新进展被引量:19
2001年
综述了细胞色素c氧化酶研究的新进展重点评述了细胞色素c氧化酶晶体结构和各种谱学研究结果、质子传递途径、O2还原的催化机理以及与其相耦联的质子泵机理等方面的最新进展。
李连之黄仲贤
关键词:细胞色素C氧化酶电子传递晶体结构
猴金属硫蛋白突变体(N4C,T27C,N4C/T27C)的构建、表达与结构性质研究
2002年
To evaluate the role of Cys\|X\|Cys fragment in the formation of domains containing metal\|thiolate cluster in metallothionein, we used site\|directed mutagenesis to replace Asn\|4 and Thr\|27 in \%β\%\|\{domain\} of monkey metallothionein Ⅰ with Cys. Thus, at the amino acids sequence level, the \%β\%\|domain was designed to mimic the \%α\%\|domain. Then we studied the recombinant monkey wild type metallothionein Ⅰ(WT mkMT), and mutants of mkMT N4C, mkMT T27C and mkMT N4C/T27C, using UV spectroscopy, CD spectroscopy, electrospray ionization mass spectroscopy, pH titration and the reaction with DTNB \[5,5′\|dithiobis(2\|nitrobenzoic acid)\]. We found that in the mutants also existed a metal ion (Ⅱ)\|thiolate cluster wrapped up by the peptides. In addition to the origin \%α\%\|domain, a new domain containing 4\|metal ion(Ⅱ)\|thiolate cluster was formed in mkMT N4C and mkMT N4C/T27C. And this new domain was more stable than the natural \%β\%\|domain. The obtaining of mkMT N4C, mkMT T27C and mkMT N4C/T27C laid down a base for the further study of the role of Cys\|X\|Cys fragment in the formation of metallothionein′s structure.
黄仲贤高原余文浩张素艳杨芃原
关键词:金属硫蛋白突变体ESI-MS基因表达
细胞色素b_5若干表面荷负电残基突变体蛋白的制备及初步表征被引量:3
2000年
用寡聚核苷酸诱导定点突变方法, 将细胞色素 b_5血红素暴露边周围的负电荷残基用疏水性丙氨酸残基取代, 得到 7种双点和多点突变的细胞色素 b_5 蛋白. 基因碱基序列测定以及蛋白质分子量测定结果都表明突变正确. 突变体蛋白的光谱电化学研究结果表明, 它们的表观还原电位发生了2~10 mV的正向移动. 突变体蛋白的整体结构没有明显变化, 为进一步研究蛋白表面电荷的作用奠定了基础.
王韵华王文虎任毅陆君霞顾少华谢毅黄仲贤
关键词:细胞色素B5定点突变氧化还原电位
细胞色素c氧化酶可溶性Cu_A结构域的表达、分离纯化和初步表征被引量:2
2001年
细胞色素c氧化酶亚基Ⅱ含有可溶性双核铜中心 CuA结构域蛋白.报道了 Paracoccus versutus菌CuA结构域的基因克隆、表达和分离纯化及其初步表征.编码CuA结构域的基因插入 pET11d质粒载体中,于E.coli BL21(DE3)中进行表达.结果表明, CuA结构域蛋白在这个表达体系中主要以包涵体的形式存在,表达量占菌体总蛋白的10%左右.经尿素溶解,Cu~+/Cu~2+重组复性,Q-Sepharose快速阴离子交换柱和Sephadex-G75凝胶过滤柱纯化,得到了电泳纯的紫红色可溶性蛋白.紫外-可见吸收光谱在478nm有较强吸收峰, 530nm处有一肩峰,在 360和 806 nm处有弱吸收峰,它们可归属为混价双金属核中心(Cu2S2R2)中Cu-Cu和Cu-Cu间的电荷转移与轨道相互作用.圆二色谱表明其二级结构主要为β-折叠形式.荧光激发谱最大波长为 280nm,发射谱最大波长为 345 nm.
李连之宋爱新谢毅黄仲贤E.de WaalU.KolczakG.W.Canters
关键词:细胞色素C氧化酶分离纯化光谱性质基因克隆
锌指蛋白ZNF191(243-368)的拉曼光谱
2003年
采用拉曼光谱技术研究了锌指蛋白ZNF191锌指区蛋白ZNF191(243-368)在野生型状态及热变性、EDTA变性条件下的结构及其变化. 结果表明, ZNF191(243-368)中Zn2+ 离子与His/Cys的配位是维持锌指结构的重要因素, 它对于维持锌指结构单元中的疏水核及二级结构均起到重要作用. 拉曼光谱是考察ZNF191(243-368) 结构的一种有力手段.
黄仲贤张海亮姚文华刘玉奇周晶汤李民
关键词:锌指蛋白ZNF191拉曼光谱热变性结合蛋白
锌指蛋白ZNF191(243-368)G321A;N324L;G321A/N324L突变体的制备和表征被引量:3
2003年
通过分子生物学的蛋白质工程方法对锌指蛋白ZNF191(243 368)的第三锌指区Gly321和Asn324进行了定点突变,在大肠杆菌BL21中表达,通过DEAE52,CM23,肝素柱CL 6B纯化,最终获得了ZNF191(243 368)G321A;N324L;G321A/N324L等3个突变体蛋白.运用凝胶电泳、UV光谱、EDTA滴定、金属离子(Co2+,Ni2+)取代等方法对突变体蛋白进行了初步表征.这为今后进一步研究该蛋白的结构和功能提供了必要的物质基础.
黄仲贤汤李民刘玉奇谢毅余龙
关键词:锌指蛋白突变体分子生物学
血红素丙酸基甲酯化的细胞色素b_5及其F58位突变体蛋白的研究
2004年
为了进一步认识Phe58与血红素b之间芳环堆砌相互作用对蛋白质结构稳定性和性质影响的本质, 我们将Cyt b5和它的突变体F58Y, F58W蛋白的血红素丙酸根进行了甲酯化, 考察丙酸根参与的氢键网络是否对Phe58与血红素的p-p相互作用有影响. 各种谱学和反应的研究表明, 野生型及58位突变体蛋白甲酯化后, 58位芳环与周围芳环之间的堆积作用仍然存在, 但由于替代氨基酸残基的体积、疏水性及形成氢键能力等方面性质不同, 对蛋白的稳定性产生了一定的影响.
苏晖陆君霞王韵华任毅谢毅黄仲贤
关键词:突变体蛋白细胞色素B5
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