广州医学院基础医学院
- 作品数：14 被引量：57H指数：5
- 相关机构：中山大学基础医学院中国人民解放军第一军医大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 2型糖尿病人群SNP+45基因型与SNP和抵抗素的水平被引量：5
- 2011年
- 目的探讨广州地区2型糖尿病人群与健康人群脂联素+45(SNP+45)位点不同基因型间TC、apoA1、apoB、RETN、APN、TG和Lp(a)水平变化及意义。方法采用病例-对照研究模式,分别测定广州地区已知脂联素+45(SNP+45)位点基因型的2型糖尿病人群和健康人群的TC、apoA1、apoB、RETN、APN、TG和Lp(a),并进行统计分析。结果 2型糖尿病人群和健康人群SNP+45位点的TT基因型组与相应的GG+TG基因型组之间的TC、apoA1、apoB、RETN、APN、TG和Lp(a)比较异均无统计学意义。2型糖尿病人群SNP+45位点TT基因型组与健康人群SNP+45位点TT基因型组之间的apoB、RETN、TG差异有统计学意义。2型糖尿病人群SNP+45位点GG+TG基因型组与健康人群SNP+45位点GG+TG基因型组之间的TC、apoB、RETN、TG和Lp(a)有统计学意义上的差异。结论 2型糖尿病人群脂联素SNP+45位点各基因型组的apoB、RETN、TG明显高于健康人群,显示脂联素SNP+45基因型与2型糖尿病有关。
- 周强罗淼珊林桢陈波杨静吕嘉春
- 关键词：糖尿病脂联素抵抗素多态性
- CD107a/b分子用于评价SARS-CoV/S抗原特异性免疫应答被引量：3
- 2009年
- 目的观察抗原刺激以后CD4+和CD8+T细胞表面CD107a/b分子的表达与效应性细胞因子的产生之间的关系。方法正常Balb/c小鼠脾细胞经多克隆刺激剂刺激或者SARS-CoV/SDNA疫苗免疫小鼠脾细胞经S抗原多肽刺激以后,使用流式细胞仪检测CD4+和CD8+T细胞表面CD107a/b分子的表达与IFN-γ、TNF-α、IL-2等细胞因子的表达之间的关系。结果经抗原多肽刺激后,抗原特异性CD4+和CD8+T细胞表面均表达CD107a/b。约80%的CD8+IFN-γ+细胞同时表达CD107a/b;约25%～40%的CD8+TNF-α+细胞表达CD107a/b;而大部分分泌IL-2的抗原特异性T细胞均不表达CD107a/b。结论可以通过对抗原特异性T细胞表面CD107a/b分子的检测来鉴定抗原特异性T细胞。同时检测效应性细胞因子,可以提高检测的准确性和灵敏度。
- 黄俊吴长有
- 关键词：严重急性呼吸综合征细胞因子
- 日本血吸虫感染小鼠肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答被引量：10
- 2012年
- 目的观察C57BL／6小鼠感染日本血吸虫后肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答。方法20只C57BU6小鼠随机分为感染组和对照组．每组10只，感染组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴，每鼠（40＋5）条。感染后5-6周分离小鼠肠系膜淋巴结的淋巴细胞，分别用抗小鼠CD3单克隆抗体（anti-CD3，1μg／m1）和抗小鼠CD28单克隆抗体（anti-CD28，1μg/ml）刺激，培养4h后收集细胞，RT-PCR检测小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞中自细胞介素17（IL-17）和维甲酸相关孤独受体（ROR-γt）mRNA的转录水平；培养72h后，ELISA检测细胞培养上清液IL-17和1干扰素（IFN-1）的含量。同时用佛波酯（PMA，10ng／m1）和离子霉素（1μg／ml）刺激淋巴细胞5h后，胞内细胞因子染色，流式细胞术检测Th17细胞的含量和其他细胞因子的产生。结果ELISA检测结果显示，感染小鼠肠系膜淋巴结培养物上清液中IFN-γ[（214．3±62．6）pg／ml]和IL-17[（176．8±62．1）pg／ml]的含量明显高于健康小鼠[（46．7±13．9）和0pg／ml]（P〈0．05）。RT-PCR检测结果显示，IL-17和ROR-γt mRNA转录水平也明显高于健康小鼠。感染小鼠肠系膜淋巴细胞CD4＋T细胞中，Th17细胞的比例为（0．55±0．03）％，明显高于健康小鼠[（0．16±0．01）％]（只以05）。在CD4＋T细胞中，IL-17＋ IL4＋细胞占0．06％，IL-17＋IFNγt和IL-17＋IL5＋细胞各占0．02％，IL-17＋ IL-9＋细胞占0.01％，未检测到Tl-17＋IL-10＋和IL-17＋Foxp3＋细胞。结论日本血吸虫感染C57BIJ6小鼠的肠系膜淋巴结能诱导Th17细胞产生。Th17细胞能分泌IL-4，及少量的IFN-γ、IL5和IL-9，不分泌IL-10，也不表达Foxp3。
- 罗雪平陈殿慧谢红艳高志岩方会龙黄俊
- 关键词：日本血吸虫C57BL/6小鼠肠系膜淋巴结TH17
- 伊贝沙坦对AngⅡ所致心肌肥大和细胞肌球蛋白重链基因表达改变的影响
- 目的观察伊贝沙坦对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)所致心肌细胞中蛋白质合成速率及肌球蛋白重链(MHC)基因表达改变的影响。方法以AngⅡ及伊贝沙坦分别或同时作用于培养的细胞。采用放射性同位素[H]-leu掺入法检测培养心肌细胞蛋...
- 陈爱兰何兆初陈敏生刘启才董颀
- 关键词：伊贝沙坦心肌肥大
- 文献传递
- C57BL/6小鼠γδT细胞的组织器官分布和功能特点被引量：2
- 2013年
- 目的比较C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结中γδT细胞占所分离的淋巴细胞及其CD3+T细胞的百分比、表型和功能的特点。方法分离正常C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结的淋巴细胞,应用细胞表面分子染色的方法,使用流式细胞仪观察γδT细胞占从不同组织分离的淋巴细胞及CD3+T细胞的百分比及其表型的特点。细胞经PMA和离子霉素刺激后,应用细胞内细胞因子染色的方法,通过流式细胞仪观察γδT细胞产生IFN-γ、IL-4、IL-9和IL-17细胞因子的情况。结果γδT细胞占分离淋巴细胞中的百分含量在肝脏明显高于肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结(P<0.05),而γδT细胞在肠系膜淋巴结CD3+T细胞的百分含量要显著的低于其他脏器(P<0.05)。不同组织器官中γδT细胞以CD4-CD8-表型为主,还存在少量CD8+γδT细胞。在肠系膜淋巴结γδT细胞中CD4+细胞的量明显高于其他器官,且明显可见一群CD4+CD8+细胞。不同组织中γδT细胞中IL-17+的细胞量要明显高于IFN-γ+和IL-4+细胞。γδT细胞基本不分泌IL-9。肺脏的γδT细胞分泌细胞因子的能力最强,其IL-17+细胞的量达到(26.6±12.1)%。IFN-γ+细胞的量在肝脏和肺脏中较高,分别为(1.36±0.37)%和(1.6±0.7)%。结论 C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结γδT细胞的含量、表型和功能方面存在显著性差异。
- 黄俊罗雪平陈殿慧方会龙谢红艳
- 关键词：ΓΔT细胞表型细胞因子免疫器官
- 可溶性虫卵抗原和成虫抗原刺激日本血吸虫感染小鼠肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答被引量：2
- 2017年
- 目的研究可溶性虫卵抗原(SEA)和可溶性成虫抗原(SWA)刺激日本血吸虫(Schistosoma japonicum)感染小鼠肠系膜淋巴结(MLN)Th17细胞的免疫应答。方法新西兰大白兔2只,经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(约1 000条/兔),45 d后收集成虫及虫卵,制备SWA和SEA。20只C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为感染组和健康组(10只/组),感染组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴,(40±5)条/鼠,感染后5~6周ELISA检测血清中SEA和SWA特异性IgG抗体。分离两组小鼠MLN中的淋巴细胞,均给予4种不同条件刺激:无刺激组(A组),SEA(100μg/ml)+抗-CD28 mAb(1μg/ml)(B组),SWA(100μg/ml)+抗-CD28 mAb(1μg/ml)(C组),抗-CD3 mAb(1μg/ml)+抗-CD28 mAb(1μg/ml)(D组)。培养9 h后,流式细胞仪检测Th17细胞;培养72 h后,ELISA检测细胞培养上清中的白细胞介素(IL-17)和γ干扰素(IFN-γ)。结果 ELISA检测结果显示,感染组小鼠血清SEA、SWA特异性IgG抗体的吸光度(A_(450)值)分别为2.66±0.20和1.68±0.66,高于健康组的0.19±0.05和0.25±0.12(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,B组刺激后,感染组淋巴细胞中CD4^+IL-17^+和CD4^+IFN-γ^+细胞分别占0.43%和0.56%,高于健康组的0.05%和0.20%(P<0.05);C组刺激后则分别占0.39%和0.76%,高于健康组的0.04%和0.19%(P<0.05)。两组小鼠的淋巴细胞体外经SEA(B组)刺激后,感染组淋巴细胞产生的IFN-γ和IL-17分别为(49.13±14.71)和(41.73±2.42)pg/ml,高于健康组的(3.27±0.33)和(9.22±0.58)pg/ml(P<0.01);经SWA(C组)刺激后则分别为(46.92±16.73)和(36.14±4.82)pg/ml,高于健康组的(3.38±0.34)和(8.78±0.93)pg/ml(P<0.01)。B组的IL-17含量高于C组(P<0.05)。结论SEA和SWA能体外诱导日本血吸虫感染C57BL/6小鼠肠系膜淋巴结的淋巴细胞分泌IL-17和IFN-γ,SEA刺激淋巴细胞产生IL-17的含量明显高于SWA;SEA和SWA均能诱导淋巴细胞分化为CD4^+IL-17^+细胞和CD4^+IFN-γ^+细胞。
- 罗雪平袁南贵黄俊
- 关键词：日本血吸虫肠系膜淋巴结可溶性虫卵抗原TH17细胞
- 采用消减杂交初步筛选先兆子痫病理相关基因
- 2003年
- 目的 应用抑制性消减杂交、PCR技术 ,克隆出与先兆子痫有关的高表达基因和 (或 )新基因。方法 分别从正常妊娠分娩胎盘和先兆子痫患者分娩胎盘中提取mRNA ,采用抑制性消减杂交、PCR技术 ,构建先兆子痫胎盘cDNA文库 ,采用反向杂交验证 ,测序分析 ;以初步筛选的差异表达基因为探针 ,与先兆子痫和正常胎盘总体mRNA斑点杂交。结果 构建成功具有高消减效率的与先兆子痫相关cDNA消减文库 ,文库扩增后得到 60个阳性克隆 ,经杂交验证 ,有 3 4个阳性克隆有插入片断 ,随机挑取一阳性克隆菌落 ,测序分析发现该差异表达基因为核蛋白多糖基因 ,以该差异表达基因为探针 ,与先兆子痫和正常胎盘总体mRNA斑点杂交 ,观察其在总体胎盘中的表达。结论 人类先兆子痫胎盘基因表达同正常胎盘相比 ,核蛋白多糖呈差异表达基因 。
- 张克荣邢福祺陈士岭庞战军李冰孔令红李红
- 关键词：消减杂交先兆子痫
- 葡萄胎发病相关新基因的克隆被引量：16
- 2006年
- 目的筛选和克隆与葡萄胎发病相关的新基因。方法采用抑制性消减杂交方法,建立葡萄胎组织与正常早孕绒毛组织间的差示cDNA文库,从中筛选出新基因序列,并克隆其全长。结果从差示cDNA文库中共筛选出28个克隆,测序结果提示含10种基因序列,其中3个基因片段被确认为功能未明的新基因,并获得其中一条基因的全长序列(按克隆序列号命名为F10)。结论F10等新基因可能与葡萄胎的病理发生发展密切相关。
- 李贵堂庞战军周瑾邢福祺李冰陈士岭付欣
- 关键词：葡萄胎基因克隆消减杂交
- 人类抗凋亡基因bcl-xL的克隆及其在大鼠心肌细胞内的高效表达被引量：1
- 2005年
- 【目的】克隆人类抗凋亡基因 bcl-xL cDNA,构建两种不同的真核表达载体,评价大鼠心肌细胞表达外源性bcl-xL 的效果,并比较不同转染方法对 bcl-xL 表达的影响。【方法]】RT-PCR 法从人肝脏组织获取 bcl-xL cDNA,连接至pTargeT^(TM)载体,并亚克隆至真核表达载体 pEGFP-C1上;细菌内同源重组构建重组腺病毒质粒,腺病毒纯化试剂盒获取高滴度的重组腺病毒;脂质体和腺病毒介导分别转染体外培养的大鼠心肌细胞,荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR 和免疫细胞化学染色法检测 bcl-xL mRNA 和 bcl-xL 蛋白的表达。【结果】获取的 bcl-xL cDNA 测序正确,成功克隆真核表达质粒 pEGFP-bcl-xL;病毒颗粒滴度高达5.3×10^(12)pfu/L;脂质体和腺病毒转染心肌细胞效率分别为40.3%和95.4%,转染后bcl-xL mRNA 和 bel-xL 蛋白的表达均增加,但两种方法之间差异有统计学意义(P<0.01)。【结论】成功获取人类 bcl-xL基因并制备真核表达质粒和重组腺病毒,心肌细胞能高效表达外源性 bcl-xL,并以腺病毒介导更为理想。为 bcl-xL 基因治疗缺血性心脏病提供实验基础。
- 廖洪映张惠忠陈波华平殷香保蒙荣森刘启才熊利华
- 关键词：克隆基因疗法
- 伊贝沙坦对血管紧张素Ⅱ所致心肌细胞蛋白质合成和肌球蛋白重链表达的影响被引量：5
- 2006年
- 目的观察伊贝沙坦对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)所致心肌细胞中蛋白质合成速率及肌球蛋白重链(MHC)基因表达改变的影响。方法以AngⅡ及伊贝沙坦分别或同时作用于培养的细胞。采用放射性同位素[3H]-leu掺入法检测培养心肌细胞蛋白质合成速率。应用荧光定量PCR方法检测心肌细胞心房利钠肽因子(ANF)以及α-MHC、β-MHC的表达。结果AngⅡ处理使心肌细胞中[3H]-Leu掺入增加(P<0.05),同时ANF mRNA的表达明显高于正常(P<0.05);α-MHC mRNA的表达显著低于正常(P<0.05),而β-MHC mRNA的表达显著高于正常(P<0.05),α-MHC/β-MHC的比值下降(P<0.05)。当伊贝沙坦与AngⅡ共同作用于培养的心肌细胞时,与AngⅡ组比较,[3H]-Leu的掺入明显下降(P<0.05),与正常组比无统计学意义(P>0.05);同时ANF的表达下降,与正常组比无统计学意义(P>0.05);心肌细胞中α-MHC的表达明显增高(P<0.05),而β-MHC mRNA的表达显著降低(P<0.05),α-MHC/β-MHC的比值上升(P<0.05)。结论伊贝沙坦能抑制AngⅡ所致的心肌细胞肥大和细胞中α-MHC向β-MHC表达的转换。
- 陈爱兰陈敏生何兆初刘启才董颀
- 关键词：伊贝沙坦心肌肥大肌球蛋白重链
