国家自然科学基金(30570708)
- 作品数:5 被引量:18H指数:3
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- 相关机构:第三军医大学西南医院中国人民解放军总医院内蒙古医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 创面收集液对表皮干细胞表型的影响
- 2007年
- 目的 探讨全层创面收集液对表皮干细胞类型的影响。方法 以聚氨酯海绵收集成年Wistar大鼠背部全层创面渗出液;以快速黏附分离法体外分离、培养新生Wistar大鼠的表皮干细胞,待表皮干细胞呈克隆生长时加入创面收集液干预,分别于干预后的0,6,12,18,24,30,36,42,48,54,60,72h采用流式细胞仪及β1整合素、角蛋白19,14,10免疫组化染色进行细胞增殖分化的鉴定。结果表皮干细胞在创面收集液干预后仍可持续保持片状聚集生长的态势,但出现数量较多的角蛋白14阳性染色细胞群落,且随时间延长该阳性细胞群落呈上升趋势;另出现了散在的角蛋白10染色阳性细胞。结论创面收集液可以快速诱导体外培养表皮干细胞进入分化状态,且多表现为短暂扩充细胞表型,在该过程中表皮干细胞数量仍可维持在一定的水平。
- 向启利李建福付小兵
- 关键词:细胞分化表型
- 压应力对增生性瘢痕成纤维细胞增殖与凋亡的影响被引量:4
- 2007年
- 目的探讨压应力对体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的影响。方法应用组织块培养法获取人增生性瘢痕成纤维细胞。以简易气控加压细胞培养仪给细胞施5、10、15、25、50、100、150mmHg(1mmHg=0.133kPa)压力(n=6),持续4d,作为实验组;不施压设为对照组(n=6)。分别以MTT法测定细胞吸光度(A)值并计算生长抑制率(inhibitionratio,IR),流式细胞仪测定细胞生长周期及Annexin-V-PI标记法测定细胞凋亡情况。结果5、10、15、25、50、100、150mmHg压力组及对照组,细胞A值分别为0.228±0.004、0.226±0.003、0.213±0.005、0.180±0.005、0.172±0.007、0.165±0.004、0.164±0.004、0.230±0.005,IR分别为0.8%、2.0%、7.3%、21.7%、25.2%、28.2%、28.2%和0。DNAG1期细胞百分比分别为71.80%±0.44%、72.32%±0.40%、74.56%±1.01%、82.82%±2.76%、86.77%±2.06%、88.23%±1.27%、89.11%±1.74%、71.46%±0.49%,早期细胞凋亡率分别为4.22%±0.49%、5.12%±0.74%、8.58%±0.79%、19.28%±1.40%、25.60%±1.21%、35.80%±2.39%、36.18%±2.38%、4.00%±0.36%。其中5、10mmHg压力组上述各指标与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);15、25、50、100、150mmHg压力组各指标与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);10、15、25、50mmHg压力组细胞A值和G1期细胞百分比组间比较,差异均有统计学意义(P<0.01),50、100、150mmHg压力组各组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);10、15、25、50、100mmHg压力组早期细胞调亡率组间比较差异均有统计学意义(P<0.01),100、150mmHg压力组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论适当的持续压应力对增生性瘢痕成纤维细胞具有诱导凋亡、抑制增殖的复合效应,是临床上压迫疗法治疗增生性瘢痕的重要机制之一。
- 肖洪李建福
- 关键词:增生性瘢痕成纤维细胞增殖凋亡
- 丝裂原活化蛋白激酶通路介导创面渗出液对大鼠表皮干细胞内游离钙浓度的影响
- 2007年
- 目的:探讨创面收集液对大鼠表皮干细胞(ESC)内钙离子的作用以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路对胞内游离钙的影响。方法:以聚氨酯海绵收集成年Wistar大鼠背部全层创面渗出液;以快速黏附分离法体外分离、培养新生Wistar大鼠的表皮干细胞。将培养的表皮干细胞分为5组:①单纯对照组;②单纯创面收集液处理组;③PD98059阻断剂+创面收集液处理组;④SB203580阻断剂+创面收集液处理组;⑤PD98059与SB203580阻断剂+创面收集液处理组。应用特异性Ca2+荧光指示剂Fluo-3/AM负载细胞,激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+荧光强度,以判断游离钙的浓度。结果:单纯创面收集液处理组ESC的Ca2+荧光强度明显较单纯对照组增加;③、④两组均出现了不同的钙振荡现象;而⑤组则表现为Ca2+荧光强度的迅速降低。结论:创面收集液引起ESC内游离Ca2+浓度增加,MAPK信号通路对ESC胞内钙离子有反馈调节作用。
- 向启利李建福付小兵
- 关键词:表皮干细胞CA^+有丝分裂素激活蛋白激酶类
- 压应力对增生性瘢痕成纤维细胞生长特性的影响被引量:5
- 2007年
- 目的:探讨不同持续时间压应力对人增生性瘢痕成纤维细胞生长特性的影响。方法:组织块培养法获取人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFb),并随机将HSFb随机分为对照组(未施压)、持续施压组(25mmHg,6~8天)和施压(25mmHg,3~4天)后去除压应力组。分别以MTT法测定细胞生长抑制率、流式细胞仪测定细胞生长周期、免疫组化观察增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及Annexin-V-PI标记法测定细胞凋亡情况。结果:25mmHg持续压应力对HSFb的生长抑制率随加压时间的延长逐渐增大;与对照组相应时相点比较,PCNA表达降低,处于增殖期(S+G2+M)细胞比例减小;细胞凋亡率随施压时间延长逐渐增加;而施压后去除压应力继续培养观察显示,HSFb的抑制率逐渐回降,PCNA表达增加和增殖期细胞比"例反弹"增大,细胞的凋亡率也逐渐下降。结论:适当的持续压应力对人增生性瘢痕成纤维细胞具有抑制增殖与促进凋亡的共同效应,短期加压后去除压力致使上述效应"反弹性"降低,可能是临床上对增生性瘢痕压迫治疗需要早期、持续、长期维持的原因之一。
- 肖洪李建福付小兵
- 关键词:增生性瘢痕成纤维细胞增殖凋亡
- 干细胞应力学效应机制的研究与进展被引量:9
- 2011年
- 背景:近年来多种细胞信号转导的分子基础与相关功能调控机制的研究已取得重要进展,但干细胞的生物学行为相对复杂,其增殖分化的相关信号转导途径和机制尚未明确。目的:复习相关文献,就干细胞力学影响下相关信号通路的研究现状与应用前景进行综述。方法:应用计算机检索CNKI和PubMed数据库中2005/2010关于"干细胞应力学效应机制"的文章,以"干细胞,信号转导"或"干细胞,应力"为检索词进行检索。选择文章内容与干细胞信号转导通路相关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到中英文共179篇文献,根据纳入标准选择33篇文章进行综述。结果与结论:调节干细胞应力下增殖与分化的多条信号通路,包括F-actin、Ca2+、MAPK、Wnt、Notch等,在干细胞的增殖分化中发挥着重要调控作用。应力作用下细胞内力学信号转导和基因表达调控的确切机制将是今后干细胞研究领域的重要内容。
- 包志强任明姬李建福
- 关键词:干细胞信号转导增殖分化