黑龙江省自然科学基金(ZJN03-04)
- 作品数：5 被引量：39H指数：3
- 相关作者：杨谦王艳君刘志华李敏陈玉玲更多>>
- 相关机构：哈尔滨工业大学沈阳农业大学学研究院更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家高技术研究发展计划黑龙江省国际合作项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 哈茨木霉与多菌灵复合使用对水稻苗期立枯病的防治被引量：23
- 2009年
- 研究哈茨木霉TS1与多菌灵复合使用对水稻幼苗的诱导抗病性及对立枯病的防治效果.水稻种子经哈茨木霉TS1与多菌灵复合处理后,水稻幼苗根部的过氧化物酶(peroxidase)、苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonialyase)、多酚氧化酶(polyphenol oxidase)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase)活性均高于对照;复合处理对立枯病的室内防效达82.25%,比哈茨木霉TS1和多菌灵单独处理分别提高26.87%和9.90%.田间实验表明,菌药3种配比处理对立枯病的防效均大于单独处理,其中以6∶4配比的防效最高,较单独处理分别提高44.46%和11.66%,差异显著;经复合处理的水稻秧苗在株高、根长、百株鲜重和百株干重上均显著高于对照;哈茨木霉TS1可以在水稻幼苗根部定殖,每克根的根际和根表定殖量分别为104和103个以上,不同菌药配比对根际和根表定殖量均无显著影响.
- 李敏杨谦王疏董海陈玉玲
- 关键词：哈茨木霉多菌灵水稻苗期立枯病诱导抗性
- 角毛壳菌几丁质酶基因chi58多点突变及在毕赤酵母中的高效表达被引量：3
- 2008年
- 应用重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,gene SOEing),简称SOE-PCR对角毛壳菌(Chaetomium cupreum)的几丁质酶基因chi58进行多点突变。依据毕赤酵母密码子偏爱性,将毕赤酵母中编码Arg使用频率几乎为0的密码子CGC突变为使用频率高的AGA,构建了含有正确突变的酵母表达载体pPIC9K-chi58A,电转化毕赤酵母GS115,获得的重组酵母株在诱导120h酶活力最高,平均可达101.71U/mL±3.33U/mL;其活力比未优化重组酵母株(31.83U/mL±4.85U/mL)提高了约3倍,且经10代传代培养后遗传稳定性良好。表达产物的SDS-PAGE分析表明,酶蛋白分子大小为58kD。
- 王艳君杨谦
- 关键词：角毛壳菌几丁质酶多点突变毕赤酵母
- 一种快速获得基因密码子偏爱性改造的方法——SOE-PCR被引量：6
- 2008年
- SOE-PCR采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成重叠链,在不需要内切酶消化和连接酶处理的条件下实现DNA片段的拼接,能够高效、快速地实现基因的定点突变。应用SOE-PCR原理成功地实现了对几丁质酶基因chi58的5个位点的突变,构建了几丁质酶基因密码子偏爱性改造突变体—chi58A。实验证明,SOE-PCR具有简捷、快速、高效的优点。扩增过程中未引入其他突变,获得的chi58A突变体基因片段可以用于后续的分子克隆。
- 王艳君杨谦
- 关键词：多点突变
- 病原菌细胞壁诱导下球毛壳菌葡聚糖酶活测定及抑菌试验被引量：7
- 2010年
- 通过对峙培养试验,研究球毛壳菌对稻瘟病菌、尖孢镰刀菌、立枯丝核菌及核盘菌4种植物病原菌生长的抑制作用,结果表明,球毛壳菌对稻瘟病菌、尖孢镰刀菌、立枯丝核菌生长抑制作用更明显。在6种植物病原真菌细胞壁诱导下,球毛壳菌可产生β-1,3-葡聚糖酶,但是产酶规律不同。在稻瘟病菌、立枯丝核菌和尖孢镰刀菌细胞壁诱导下,β-1,3-葡聚糖酶活要明显高于杨树烂皮病菌、核盘菌和叶枯菌。其中,在稻瘟病菌细胞壁诱导11 d后,酶活达到最高,为0.61 U;而杨树烂皮病菌和叶枯菌细胞壁的诱导产酶效果最差。球毛壳菌可作为生物防治真菌。
- 陈刚杨谦刘志华彭鹏
- 关键词：球毛壳菌Β-1,3-葡聚糖酶
- 哈茨木霉Thi4基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2009年
- 哈茨木霉(Trichoderma harzianum)是一种丝状土壤真菌,作为一种优秀的生防因子在植物病害防治过程中发挥着重要的作用。为研究其生防机制并获得生防相关基因,构建了菌丝生长期cDNA文库,通过对部分ESTs序列的测定与生物信息学分析,成功获得了噻唑生物合成酶基因Thi4的全长cDNA序列。Thi4基因全长1311bp,包含一个编码322个氨基酸残基长度为969bp的开放读码框,编码蛋白理论分子量为34.5kDa,等电点为5.18。基因的氨基酸序列含有多个功能性位点且在进化上保守。将基因提交国际权威基因数据库GenBank,序列号为DQ647956。
- 黄彩红杨谦刘志华
- 关键词：哈茨木霉克隆
