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王宝恩肝纤维化研究基金(2009009)
作品数:
2
被引量:17
H指数:2
相关作者:
孔令波
赵素贤
张玉果
米红梅
南月敏
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相关机构:
河北医科大学第三医院
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王宝恩肝纤维化研究基金
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河北医科大学...
作者
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任伟光
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张玉果
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赵素贤
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孔令波
1篇
王荣琦
传媒
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中华肝脏病杂...
年份
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2013
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Fas/Fas配体系统及其下游信号转导通路的激活促进酒精性肝炎及酒精性肝纤维化的进展
被引量:6
2013年
目的探明Fas/Fas配体(FasL)系统及其主导信号转导通路在酒精性肝炎和肝纤维化发生、发展中的作用及其机制。方法C57BL/6J小鼠以含4%(V/叨乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养4周,自第5周起联合微量cck腹腔注射至第8周,分别建立酒精性肝炎和肝纤维化模型。脱氧核糖核昔酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测肝细胞凋亡。分别采用逆转录一聚合酶链反应、Westernblot及免疫组织化学染色检测肝组织Fas、FasL、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)及细胞色素P4502El(CYP2E1)的mRNA及蛋白质表达。多组样本均数间差异比较用单因素方差分析或Kmskal-WallisH检验,组间比较用LSD—f检验或Mann-WhitneyU检验。结果应用含4%(V/叻乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料联合微量cch腹腔注射可快速建立小鼠酒精性肝炎和肝纤维化模型。肝细胞凋亡数随肝脏炎症及纤维化的加重而增高,并伴有凋亡相关基因表达增强。对照组、酒精性肝炎组、酒精性肝纤维化组小鼠细胞凋亡相关基因表达水平依次升高:FasmRNA的相对表达量分别为0.50±0.05、0.61±0.10、0.76±0.03(H=12.137P〈0.05),Fas蛋白的相对表达量分别为0.52±0.14、0.86±0.10、0.99±0.09(F=12.758P〈0.01);FasLmRNA相对表达量分别为0.31±0.03、0.53±0.02、1.02土0.04(F=153.260P〈0.01);caspase3mRNA对表达量分别为0.86±0.11、0.85±0.05、1.33士0.16∽=8.740,P〈0.01),caspase3蛋白相对表达量分别为0.40±0.03、0.69±0.06、1.02±0.10(F=90.785,P〈0.01);CYP2ElmRNA相对表达量分别为0.72±0.14、1.00±0.15、1.30±0.20(F=4.713,P〈0.01);各组问比较,尸值均〈0.05。免疫组织化学染色结果显示,FasL及CYP2El的蛋白与mRNA的表达趋势一致。结论Fas/FasL系统及其下游信号转导通路的�
任伟光
孔令波
米红梅
赵素贤
张玉果
王荣琦
南月敏
关键词:
肝炎
酒精性
FAS配体
小鼠酒精性肝纤维化复合模型的建立及肝组织骨桥蛋白和转化生长因子β1的表达
被引量:11
2013年
目的快速建立小鼠酒精l生肝纤维化模型,为酒精性肝纤维化发病机制及防治策略的研究奠定基础。方法64只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、四氯化碳组、乙醇组、溶剂对照组及乙醇+四氯化碳组。乙醇+四氯化碳组小鼠,造模前4周以含40/0乙醇Lieber-DeCarli液体饲料喂养,第5周起联合5%四氯化碳腹腔注射,于造模第0、4、5、6、7、8周各处死6只。其余各组小鼠于造模第8周处死。采用酶法检测小鼠血清ALl7及AST水平lHE及Masson染色观察肝组织病理学变化,并对肝脂肪变、炎症活动及纤维化程度评分。免疫组织化学染色观察肝组织a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)表达变化;实时定量RT-PCR及Westernblot方法检测肝组织骨桥蛋白(OPN)及转化生长因子D1(TGFp1)mRNA及蛋白表达动态变化。结果乙醇+四氯化碳组小鼠于造模第4周出现轻~中度肝脂肪变,第5周出现炎细胞浸润,窦周出现纤维组织沉积,第6~7周肝小叶内可见点、灶状肝细胞坏死,炎细胞浸润、窦周纤维组织沉积呈进行陛加重,第8周肝细胞片状坏死,桥接纤维化形成。免疫组织化学染色显示:a-SMA主要表达于活化肝星状细胞及纤维组织沉积区域,随造模时间延长表达逐渐增强。乙醇+四氯化碳组小鼠肝组织OPN表达随造模时间延长逐渐增强,第0、4、5、6、7、8周mRNA相对表达量依次为1.01土0.13、0.80±0.20、1.83土0.25、2.94士0.19、3.45土0.31及5.99士0.17,各组比较,P=476.270,P〈0.01;蛋白相对表达量依次为0.19土0.06、0.48±0.05、0.52士0.06、1.02±0.10、1.52±0.11及1.50±0.08,各组比较,,=298.027,尸〈0.01。TGFp1表达自第5周明显上调,并呈持续高表达,mRNA相对表达量依次为1.03±0.18、1.07±0.23、3.19±0.40、3.31±0.28、1.58±0.18及2.08土0.26,各组比较,F=85.546,P〈0
孔令波
任伟光
米红梅
赵素贤
张玉果
南月敏
关键词:
骨桥蛋白
小鼠
酒精
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