四川省卫生厅科研基金(120257)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- Lck-Cre×Perp^(flox/flox)条件敲除小鼠的繁育及基因型鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的制备Cre-LoxP重组酶系统调控下的T淋巴细胞Perp基因条件性敲除的纯合子小鼠并进行鉴定,为进一步在整体动物水平研究Perp基因在T细胞发育以及在自身免疫疾病发病中的作用提供研究平台。方法将引进的Perp条件敲除小鼠和T淋巴细胞特异性表达Cre重组酶的Lck-Cre小鼠分别进行繁殖和鉴定,然后将两种小鼠进行杂交并对其子代小鼠的基因型进行鉴定,其子代基因型为Lck-Cre×Perpflox/flox的小鼠即为本实验所构建的T细胞Perp基因特异性敲除的纯合子小鼠。结果 Lck-Cre×Perpflox/flox的纯合子小鼠被繁殖成功并准确鉴定。Lck-Cre×Perpflox/flox小鼠脾脏CD3+细胞的Perp基因的RNA及蛋白表达水平与Lck-Cre×Perp+/+小鼠相比显著降低。结论本研究利用Cre-LoxP技术成功构建了T细胞特异性敲除Perp基因的纯合子小鼠,为进一步研究Perp基因在T淋巴细胞发育以及自身免疫性疾病发病中的作用提供了优良的工具。
- 冷潇周艳唐海明张祥刘佳杨佩王衍堂
- 他克莫司对小鼠髓样树突状细胞成熟及抗原呈递的干预作用研究被引量：1
- 2013年
- 目的研究他克莫司(Tacrolimus,FK506)对小鼠骨髓来源的树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BM-DCs)成熟分化以及抗原呈递功能的影响。方法分离诱导imDCs、mDCs和FK-DCs,显微镜下观察细胞形态,流式细胞术检测表面分子CD80、CD86、CD40和MHC II的表达,ELISA检测培养上清中IL-12、IL-6及TNFα的分泌水平,CFSE细胞增殖试剂盒检测FK506对mDCs刺激同种异型的T细胞增殖的影响。结果与vehicle组相比,FK-DCs光镜下形态未见明显改变;mDCs CD80、CD86、CD40和MHC II表达均有明显下调,差异有统计学意义(P<0.05);细胞因子的分泌水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);FK-DCs刺激同种异型T细胞增殖水平有明显降低(1∶10和1∶30组),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FK506在体外可显著抑制LPS刺激的DCs成熟和抗原呈递功能。
- 周艳杨淑霞唐海明杨佩邹强王衍堂
- 关键词：他克莫司树突状细胞抗原呈递
