吉林省科技厅科研基金(2001007)
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
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- 趋化因子受体CXCR4小分子干扰RNA表达载体的构建及表达
- 2007年
- 目的:构建趋化因子受体CXCR4小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,研究其对CXCR4基因表达的沉默效果,探索抗人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)治疗的新途径。方法:根据软件设计针对CXCR4基因的siRNA序列,经退火成互补双链,克隆到PsilencerM3.1-H1 neo载体中,经测序鉴定插入序列的正确性。转染MT4细胞后,采用RT-PCR及流式细胞仪方法检测转染siRNA质粒的实验组、转染空载体的阴性对照组和空白细胞对照组间抑制基因表达情况。结果:PCR及琼脂糖凝胶电泳检测重组质粒PsilencerM3.1-H1-siRNA neo,有正确的特异性片段,DNA测序也证明具有正确序列;该载体转染MT4细胞48 h后,能明显抑制CXCR4基因表达,其表达抑制率为70%,与空白对照组和阴性组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:成功构建趋化因子受体CXCR4的siRNA表达载体。
- 刘艳王珑张大维赵德明
- 关键词:受体趋化因子人免疫缺陷病毒1型RNA干扰小分子RNA