浙江省自然科学基金(Y2100564)
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
- 相关作者:吕良忠严洁萍叶强沈浓儿宗永辉更多>>
- 相关机构:浙江省人民医院浙江中医药大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- mTOR/Akt/FoxO3信号通路在人参皂苷Rg_1抗PC-12细胞OGD损伤的作用被引量:9
- 2015年
- 目的:研究人参皂苷Rg_1对PC-12细胞缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的保护作用,并初步探讨与mTOR/Akt调控FoxO3核浆穿梭相关的可能的分子机制。方法:建立OGD损伤PC-12细胞模型,MTT法检测OGD对PC-12细胞存活率。人参皂苷Rg_110,20,40μmol·L^(-1)预处理PC-12细胞24 h,加OGD损伤,MTT检测细胞存活率,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。Western blot法检测mTOR,p-Akt^(ser473),p-Akt^(thr308),Akt,p-FoxO3,细胞核、细胞质FoxO3和总FoxO3蛋白表达。结果:OGD作用4~24 h显著抑制PC-12细胞增殖,呈时间依赖性。Rg_1(20,40μmol·L^(-1))预处理24 h可显著增加细胞存活率,减少LDH释放,增加SOD活力和降低MDA含量。Rg_1可抑制由OGD引起的mTOR,p-Akt^(ser473)表达降低。OGD 6 h可减少FoxO3磷酸化,并促进细胞质FoxO3进入细胞核;预处理Rg_1增加FoxO3磷酸化,促进FoxO3进入细胞质。提示Rg_1可经由调控mTOR/Akt/FoxO3信号通路抑制PC-12细胞损伤。结论:人参皂苷Rg_1可抑制OGD引起PC-12细胞损伤,作用机制可能与激活mTOR/Akt信号通路调控FoxO3核质穿梭密切相关。
- 严洁萍沈浓儿叶强宗永辉方晴霞吕良忠
- 关键词:PC-12细胞人参皂苷RG1AKT磷酸化MTOR缺氧缺糖
- LPS上调大鼠HIF-1和GLUT表达被引量:1
- 2014年
- 目的 探讨脂多糖(LPS)致大鼠内毒素血症早期,葡萄糖转运体(GLUT)家族在脑、心和肝组织等表达水平及低氧诱导因子-1(HIF-1)调控的相关性.方法 雄性SD大鼠分为对照组(腹腔注射0.9%氯化钠注射液)和给药组(腹腔注射2 mg/kg LPS),每组6只.测定给药后0~24h体温.ELISA法检测血清IL-1水平.RT-PCR法测定GLUT家族mRNA表达.Western blot法检测GLUT1和HIF-1蛋白表达.结果 在大鼠脑、心及肝等组织中,GLUT1和GLUT4均有表达;GLUT2在脑和肝组织中有表达;GLUT3仅在脑组织特异性表达.LPS作用24h可引起大鼠体温升高,血清IL-1水平上调(P<0.05).LPS可上调脑组织GLUT1 mRNA水平和蛋白翻译水平(P<0.01);同时LPS可促进脑组织HIF-1蛋白稳定表达(P<0.001).结论 LPS促进大鼠HIF-1稳定表达,上调GLUT1表达及调控糖代谢.
- 严洁萍俞佳吴越吕良忠
- 关键词:葡萄糖转运体低氧诱导因子-1SD大鼠
- 人参皂苷Rg1对S-亚硝基化谷胱甘肽引起内皮细胞线粒体依赖损伤的保护作用研究被引量:2
- 2014年
- 目的研究人参皂苷Rg1对S-亚硝基化谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)引起内皮细胞损伤的保护作用,并初步探讨可能的分子机制。方法建立S-亚硝基化谷胱甘肽损伤内皮细胞模型,四甲基偶氮唑蓝法检测S-亚硝基化谷胱甘肽对内皮细胞存活率影响,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核聚缩。人参皂苷Rg1 10,20,40μmol·L-1预处理内皮细胞24 h,加S-亚硝基化谷胱甘肽损伤观察细胞存活率。乳酸脱氢酶试剂盒检测乳酸脱氢酶释放。JC-1染色检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,ΔΨm)变化。Western blot法检测bcl-2,bax,cytochrome C(cyt C),cleaved caspase 9,procaspase 9,cleaved caspase 3,pro-caspase 3蛋白表达。结果 S-亚硝基化谷胱甘肽抑制内皮细胞增殖。Rg1(20,40μmol·L-1)预处理24 h可显著减弱S-亚硝基化谷胱甘肽引起内皮细胞存活率降低(P<0.05)和乳酸脱氢酶释放(P<0.05)。Rg1可抑制S-亚硝基化谷胱甘肽引起的ΔΨm下降,抑制S-亚硝基化谷胱甘肽引起的线粒体依赖凋亡蛋白bcl-2/bax,cyt C,cleaved caspase 9/caspase 9,cleaved caspase 3/caspase 3蛋白表达上调,提示Rg1可抑制内皮细胞线粒体依赖凋亡。结论人参皂苷Rg1可减少S-亚硝基化谷胱甘肽引起内皮细胞凋亡,其作用机制与抑制线粒体依赖凋亡通路密切相关。
- 严洁萍吕良忠
- 关键词:内皮细胞人参皂苷RG1线粒体
- 吲哚美辛对宫颈癌细胞Hela细胞增殖抑制作用及机制
- 目的:研究吲哚美辛对宫颈癌细胞Hela细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其诱导细胞凋亡的作用机制。方法:以体外培养的Hela细胞为研究对象,采用MTT法检测吲哚美辛对Hela细胞增殖抑制率,倒置显微镜观察细胞形态的改变,荧光显...
- 徐晖吕良忠
- 关键词:吲哚美辛HELA细胞增殖
- 文献传递
- mTOR/Akt/FoxO3信号通路在人参皂苷Rg1抗PC-12细胞OGD损伤的作用
- 目的:研究人参皂苷Rg1对PC-12细胞缺氧缺糖(Oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的保护作用,并初步探讨与mTOR/Akt调控FoxO3核浆穿梭相关的可能的分子机制。方法:建立OGD损伤...
- 严洁萍吕良忠方晴霞俞佳胡颖郑小春毛小红邵燕飞徐晖
- 关键词:PC-12细胞人参皂苷RGLAKT磷酸化MTOR缺氧缺糖
- 文献传递