贵州省自然科学基金(2007-2122)
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 相关作者:姚新生石彬汤贤英朱红倩孙永苹更多>>
- 相关机构:遵义医学院贵州省人民医院更多>>
- 发文基金:贵州省自然科学基金国家重点基础研究发展计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- FQ-PCR溶解曲线技术分析白血病患者PBMC中T细胞TCRα/βCDR3谱系特征被引量:3
- 2014年
- 目的采用FQ-PCR溶解曲线技术分析临床白血病患者外周血单个核细胞(PBMC)中T细胞TRAV和TRBV基因各家族的CDR3谱系特征。方法提取4例健康志愿者和15例临床白血病患者PBMC中mRNA,逆转录成cDNA,FQ-PCR扩增32个TRAV基因和24个TRBV基因家族的CDR3区,FQ-PCR溶解曲线技术分析CDR3谱系特征,并测序分析单克隆家族CDR3区氨基酸序列的组成。结果 4例健康志愿者PBMC中α/βT细胞的CDR3谱系FQ-PCR溶解曲线峰型图,均表现为多峰图;而15例白血病患者PBMC中α/βT细胞CDR3谱系FQ-PCR溶解曲线峰型图,多数患者出现寡或偏峰型图、低或无峰型图、典型的单峰型图;不同白血病患者异常峰的频率不一致;单峰型图TRAV和TRBV PCR产物基因测序,未发现不同患者存在完全相同的CDR3区。结论FQ-PCR溶解曲线技术能很好的分析白血病患者PBMC中TCRα/βCDR3谱系的单、寡、多克隆性增殖;非T细胞白血病患者PBMC中TCRα/βCDR3的单峰(或寡峰)家族T细胞,可能来源于机体对肿瘤应答的T细胞,而在T细胞白血病患者,可能为肿瘤T细胞或机体抗肿瘤T细胞。本实验可为进一步研究白血病的免疫应答机制和个体化治疗提供基础。
- 孙永苹石彬朱红倩汤贤英马锐姚新生
- 关键词:白血病TCRCDR3FQ-PCR
- Jurkat(E6-1)细胞TCR alpha和beta链重排基因家族取用分析被引量:1
- 2009年
- 目的探讨人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat(E6-1)TCRalpha和beta链的重排基因家族的取用及基因、氨基酸序列与结构,为Jurkat细胞做为单克隆T细胞研究的模型提供基础。方法采用T细胞TCR的免疫扫描谱型分析技术(im-munoscope spectratyping),监测Jurkat细胞的alpha和beta链各基因家族的取用,ABI测序仪测序出各取用家族基因的序列,并分析其氨基酸组成(DNAtools软件),模拟出TCR的结构(CPHmodle 2.0 Server和Informax 9.0)。结果Jurkat细胞TCRalpha链的基因家族取用为:可变区为TRAV1,连接区为TRAJ3;beta链的基因家族取用为:可变区为TRBV8S1,连接区为TRBJ1S2。结论Jurkat(E6-1)细胞的TCRalpha和beta链基因、氨基酸序列和结构的确定,将为Jurkat做为效应T细胞、TCR重排模型等方面的研究提供基础。
- 姚新生孙万邦
- 关键词:JURKATT淋巴细胞受体基因重排