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基于异源cDNA基因芯片杂交的鳜鱼肌肉组织基因表达谱初步分析被引量：15: 2009年; cDNA基因芯片技术已广泛应用于生物物种间功能基因组和表达谱学研究。然而,鱼类基因芯片开发和应用相对落后。为了筛选与肉质性状相关功能基因,本研究首次试用异源斑马鱼基因cDNA芯片,对两种肉质性状明显差异的鳜鱼和鲢鱼肌肉组织中基因表达进行了比较分析。从两种鱼肌肉组织中提取总RNA,经Biotin荧光标记与拥有15617个cDNA片段的斑马鱼基因芯片(Affymetrix)杂交后,检测出375个表达基因。与鲢鱼比较,鳜鱼肌肉组织锁定的基因中有180个上调表达基因和195个下调表达基因。在鳜鱼肌肉组织180个上调基因中,49个为已知功能基因,131个为未知功能基因。根据基因文库同源功能基因分析,我们将49个已知上调基因按功能大约分为七大类,其中与肌肉结构相关基因包括肌球蛋白重链基因(MYH)、肌纤维间连接基因和细胞骨架结构基因等。同时,我们对与肉质结构性状密切相关的功能基因进行了分析,并结合与鳜鱼优良肉质结构和功能基因表达关系进行了讨论。; 张建社夏新界褚武英陈定根符贵红刘臻成嘉刘芳鲁双庆; 关键词：鳜鱼鲢鱼肌肉组织基因表达

鳜鱼(S.Keneri)肌球蛋白重链基因cDNA的克隆及其特征分析: 2008年; 鳜鱼(S.Keneri)以优良肉质性状成为极具商品价值和大力推广人工养殖名贵鱼类之一.为掌握控制优良肉质性状的遗传基础,采用同源克隆RT-PCR方法,克隆出该鱼肌球蛋白重链(MYH)cDNA序列.该基因cDNA序列全长5938bp,编码区长度为5814bp,含有poly(A)信号,3’非翻译区长124bp,其开放阅读框共编码1938个氨基酸,推算蛋白质分子质量为221.6Ku.鳜MYH基因由3个结构域组成,即MYSc-type-Ⅱ,SMC-N和Myosintail 1,其中MYSc-type-Ⅱ头部结构与鲤、斑马鱼同源性达90%,具高度保守性.通过DNAstar软件MegAlign构建进化树显示不同物种间该基因核苷酸编码序列同源性为77%—86%,氨基酸编码序列同源性达80%—92%.采用RT-PCR方法研究MYH在不同发育阶段差异表达结果表明,MYH在肌肉效应期开始有低量表达,成鱼期和鱼苗期表达量高,而囊胚期与神经胚均未表达.由此推测MYH基因于肌肉效应期开始表达.研究结果揭示鳜鱼肌球蛋白重链基因在进化上保持与其他脊椎动物相似性和差异性,为决定名贵鱼类肉质结构基因的研究提供了分子生物学基础.; 符贵红褚武英成嘉刘芳刘臻胡海星鲁双庆肖调义张建社; 关键词：鳜鱼基因克隆

低聚木糖对草鱼生长性能及血液生化指标的影响被引量：30: 2008年; 试验探讨在草鱼饲料中添加不同浓度梯度的低聚木糖对草鱼生长性能和血液生化指标的影响。取180尾草鱼鱼种,随机分为6组,1组为对照组,不添加低聚木糖,2～6组为试验组,低聚木糖添加量分别为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%和0.6%。养殖56d后,对试验草鱼增重率和血液生化指标进行测定。结果表明,添加0.4%低聚木糖组增质量和血清总蛋白水平比对照组和其他组显著提高,但其尿素氮水平和胆固醇含量比对照组显著降低,因此,最适低聚木糖添加量为0.4%。; 褚武英吴信成嘉符贵红刘臻张建社; 关键词：草鱼低聚木糖血液生化指标

藏猪肠道不同部位CAT1、EAAC1和PepT1 mRNA的特异性分布被引量：5: 2009年; 选取体重接近且健康的28日龄哺乳仔藏猪6头,屠宰后分离肠道(十二指肠、空肠前段、空肠后段和回肠),运用RFQ-PCR技术对藏猪不同肠段小肽转运载体PepT1、酸性氨基酸转运载体EAAC1和碱性氨基酸转运载体CAT1 mRNA的组织分布进行研究。结果表明:空肠后段PepT1 mRNA表达丰度最高,而回肠的表达量最低;从小肠近端到远端EAAC1 mRNA的表达丰度在小肠的表达呈升高趋势,即回肠表达最高,空肠后段次之,但与十二指肠、空肠前段差异不显著(P>0.05);CAT1 mRNA不同肠段表达格局与EAAC1相似,回肠中CAT1 mRNA表达丰度最高,显著高于十二指肠(P<0.05),但空肠前、后段的差异不显著(P>0.05)。; 石常友宾石玉褚武英唐万林陈敦学; 关键词：藏猪肠道实时定量PCR

哺乳藏猪肠道CAT1、EAAC1和Pept1 mRNA的发育性表达分析被引量：2: 2010年; 选取体重接近且健康的哺乳藏猪30头,其中1、7、14、21和28日龄各6头,运用实时定量PCR对Pept1、EAAC1、CAT1 mRNA表达的发育性变化进行研究。结果表明,在十二指肠中藏猪CAT1、Pept1 mRNA表达的发育性变化相似,14日龄时表达丰度最高;EAAC1、CAT1 mRNA在空肠中表达的发育性变化相似,CAT1在21日龄达到最高点,但与其他日龄相比差异不显著;回肠中Pept1与EAAC1 mRNA表达丰度具有相似的发育性变化,7日龄回肠Pept1 mRNA表达量最高,显著高于其他各发育阶段(P<0.05)。; 陈敦学石常友宾石玉褚武英唐万林林谦; 关键词：肠道发育性表达实时定量PCR

Effect of lead on cytoskeletal protein stability in crucian carp Carassius auratus: 2008年; Inorganic lead （Pb） is one of the most common environmental pollutants. Much evidence indicates that Pb exposure could directly affect fish growth and development. In this study, we investigated the cytotoxic effects of Pb on cytoskeletal protein stability at both protein and mRNA level in crucian carp Carassius auratus. Pb（NO3）2 treatment in concentration of 100 μmol/L resulted in decreased expression of both α- and β-tubulin but γ-tubulin as assayed with SDS-PAGE, Western Blot, and ELISA. In vivo and in vitro analyses on protein expression of tubulins are consistent. The effect of Pb on mRNA expression varied among different tissues. Our results suggest that cytotoxicity of Pb at protein translation level is stronger than at mRNA expression level.; 成嘉张东裔褚武英刘芳刘臻周瑞雪蒙涛张建社; 关键词：LEAD TUBULIN MRNA MICROTUBULE

鲢肌肉脂肪酸分离方法效果比较及组成特征分析被引量：5: 2008年; 采用了三种不同方法,即超声波提取法、索氏提取法和氯仿-甲醇法,从鲢(Hypophthalmichys molitrix)肌肉中提取鱼油,继而进行酸性或碱性甲酯化,经气相色谱/质谱联用技术,对其脂肪酸组成特征进行了定性和定量分析。结果显示:鲢肌肉检测出25种脂肪酸,其中包括7种饱和脂肪酸,8种单不饱和脂肪酸和10种多不饱和脂肪酸。获得不饱和脂肪酸含量占总脂肪酸含量分别为41.39%、36.15%、33.55%,可见三种分离方法间存在明显分离效果差异。因此得出石油醚作溶剂的超声波萃取法是提取和分析鱼类脂肪酸较理想的方法。; 符贵红褚武英成嘉刘臻刘芳肖调义张建社; 关键词：脂肪酸超声波提取

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国家自然科学基金(30640015)