国家自然科学基金(30572453)
- 作品数：5 被引量：35H指数：4
- 相关作者：张丹胡质毅李俊黄萍王艳丽更多>>
- 相关机构：广州中医药大学中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省社会发展科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 安宫牛黄丸对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1基因表达及髓过氧化物酶活性的影响被引量：14
- 2010年
- 【目的】观察安宫牛黄丸对盲肠结扎穿孔术致脓毒症模型大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达及髓过氧化物酶(MPO)活性的影响。【方法】75只雄性SD大鼠随机分为正常对照组,脓毒症模型组(CLP组),1α-氰基-(3,4-羟基)N-苄苯乙烯胺组[AG490组,术前0.5 h皮下注射8 mg/kg的Janusk激酶2(JAK2)抑制剂AG490],雷帕霉素(RPM)组[RPM组,术前0.5 h皮下注射0.4 mg/kg的信号转导和转录激活子(STAT)抑制剂RPM],安宫牛黄丸低、中、高剂量组(术前0.5 h和术后6 h按1.0、2.0、3.0 g/kg剂量灌胃)。于造模后24 h活杀动物,留取肺组织,采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织HMGB1 mRNA表达水平,同时测定MPO活性。【结果】与正常对照组比较,CLP组肺组织HMGB1 mRNA表达显著增强(P<0.01),MPO活性显著增高(P<0.05)。与CLP组比较,AG490组、RPM组以及安宫牛黄丸低、中、高剂量组HMGB1 mRNA表达显著下调(P<0.01),AG490组、RPM组以及安宫牛黄丸低、中剂量组MPO活性显著降低(P<0.05或P<0.01)。【结论】安宫牛黄丸治疗脓毒症的作用与AG490、RPM等JAK/STAT信号通路抑制剂相似,可下调肺组织HMGB1基因表达,降低肺组织MPO活性,减轻腹腔感染所致的急性肺损伤。
- 张丹胡质毅黄萍李俊王艳丽
- 关键词：基因表达调控
- 安宫牛黄丸对脓毒症大鼠血浆内毒素水平的影响被引量：17
- 2010年
- 目的探讨安宫牛黄丸对盲肠结扎穿孔(CLP)法所致脓毒症大鼠血浆内毒素水平的影响。方法取雄性SD大鼠90只,随机分为5组,分别为空白对照组、模型对照组、安宫牛黄丸低剂量组、中剂量组、高剂量组。各组动物于手术前禁食12 h,采用盲肠结扎穿孔法(CLP)复制脓毒症模型,中药组每只大鼠分别于术前0.5 h和术后6 h按1.0,2.0,3.0 g/kg的剂量灌胃安宫牛黄丸,空白对照组和模型组动物灌胃饮用水。于术后24 h,动物腹腔采血以终点显色鲎试验法测定血浆内毒素水平,另外取动物肺脏匀浆测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)含量。结果模型组血浆内毒素水平明显高于空白对照组,而安宫牛黄丸低、中剂量组内毒素水平均显著低于模型组(P<0.01)。模型组肺组织MPO含量明显高于空白对照组,而安宫牛黄丸低、中剂量组肺组织MPO含量均显著低于模型组(P<0.05和P<0.01)。结论安宫牛黄丸具有降低脓毒症大鼠血浆内毒素水平和肺脏MPO含量的作用,提示安宫牛黄丸对脓毒症具有一定的干预作用,为进一步探讨安宫牛黄丸治疗脓毒症的作用机理提供了药效学基础。
- 李俊张丹吴清和黄萍
- 关键词：安宫牛黄丸脓毒症内毒素髓过氧化酶鲎试验
- 安宫牛黄丸对脓毒症大鼠重要器官损伤及死亡率的影响被引量：9
- 2009年
- 【目的】观察安宫牛黄丸对脓毒症大鼠重要器官损伤及死亡率的影响。【方法】选用SD大鼠,随机分为正常对照组,模型组,安宫牛黄丸低、中、高剂量组(中药低、中、高剂量组,剂量分别为1.0、2.0、3.0 g.kg-1.d-1)。除正常对照组外,其他组均采用盲肠结扎穿孔(CLP)法复制腹腔感染型脓毒症模型,中药低、中、高剂量组分别于造模前0.5 h和造模后6 h灌胃给药,观察24 h大鼠死亡率,检测造模24 h后各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TB)和肌酐(Cr)含量及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。【结果】模型组血清ALT、TB水平,肺组织MPO活性及24 h死亡率均显著升高(P<0.05或P<0.01)。中药低、中、高剂量组可显著降低肺组织MPO活性(P<0.05或P<0.01),其中低剂量组可显著降低血清TB水平(P<0.05),低、中剂量组还可显著降低24 h死亡率(P<0.05)。【结论】安宫牛黄丸可降低脓毒症大鼠的死亡率,并对肺、肝等重要器官有一定的保护作用。
- 张丹黄萍李俊胡质毅王艳丽
- 脓毒症患者高迁移率族蛋白1水平与卫气营血辨证、APACHEⅡ评分的相关性研究被引量：4
- 2009年
- 【目的】探讨不同中医证型脓毒症患者血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平与急性生理和慢性健康评估Ⅱ(APACHEⅡ)评分、卫气营血辨证分型的相关性。【方法】24例脓毒症患者按卫气营血辨证分为气分证组11例、营血分证组13例,并设8例正常对照组;分别进行APACHEⅡ评分,采用Western blot法检测各组患者血清HMGB1含量,并对HMGB1水平、APACHEⅡ评分及卫气营血辨证证型进行相关性分析。【结果】营血分证组APACHEⅡ评分显著升高,与气分证组比较差异有显著性意义(P<0.01),且不同辨证分型与APACHEⅡ评分呈正相关(P<0.01);气分证组、营血分证组患者血清HMGB1水平较正常对照组显著升高(P<0.05或P<0.01),而营血分证组血清HMGB1水平较气分证组显著升高(P<0.01),且不同辨证分型与血清HMGB1水平、APACHEⅡ评分与血清HMGB1水平均呈正相关(P<0.01)。【结论】脓毒症按卫气营血理论辨证,可反映其病理过程及病情严重程度。
- 张丹胡质毅王新梅王艳丽
- 关键词：脓毒症卫气营血辨证
- 重组GIP蛋白的原核优化表达及其生物活性的研究被引量：2
- 2006年
- 葡萄糖依赖性促胰岛素多肽或抑胃肽(glucose-dependentinsulinotropicpolypeptideorgastricinhibitorypeptide,GIP)是由42个氨基酸组成的胃肠调节肽,在高血糖背景下能够刺激胰岛素释放,能够抑制胃酸分泌、促进神经细胞增生,具有广泛的临床应用价值.化学提取或人工合成GIP,成本过高,不宜规模化生产,故应用基因工程技术研制重组人GIP(rhGIP)并探讨其生物活性有积极的现实意义.人工合成具有大肠杆菌偏爱密码子的编码GIP成熟肽的cDNA序列,利用pET32a(+)系统进行原核表达;在小规模发酵条件下,进行优化诱导表达和目的蛋白的亲和纯化;通过检测SD大鼠胃酸分泌和血糖浓度,对纯化后的rhGIP进行生理活性研究;通过形态学观察和培养基中NO含量测定,检测rhGIP对PC12细胞NO自由基生成量的影响;应用Aβ25-35加入培养基造成PC12细胞神经损伤模型,分别以高、中、低剂量rhGIP作用于此模型,通过MTT(2-(4,5-dimethylthia-zol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide)法测定PC12细胞的活性.结果显示,成功克隆了人GIP基因,诱导表达的rhGIP占细胞总蛋白质的35%,部分可溶,部分以包涵体形式存在.经过诱导表达的重组蛋白质分子质量约为26ku,与理论值相符.纯化后的rhGIP具有免疫活性.优化诱导表达条件为表达菌生长密度A600值0.50,IPTG浓度0.5mmol/L,温度37℃,诱导表达时间4h.裂解上清液经固定化金属亲和层析一步法层析后,表达的水溶性rhGIP融合蛋白的最后得率为1.2mg/L菌液,纯度为85%.纯化后的rhGIP能够使SD大鼠胃液pH值增高,其抑制胃酸分泌作用与生理盐水对照组比较差异有显著性(P<0.05),而rhGIP组和标准品GIP组比较差异无显著性.在高血糖背景下,注射rhGIP15min后,大鼠血浆血糖浓度较基础血糖显著降低(P<0.05),30min时与单独注射葡萄糖的模型对照组比较,差异无显著性,而rhGIP组和标准品GIP组其差异不显著.在rhGIP对神经细胞的营养和对PC
- 胡质毅龙綮新王珣章
- 关键词：原核表达PC12细胞生物活性
